Гидролизованный коллаген как выглядит набухает: Collagen Formula Greenflash — Официальный интернет-магазин NL International
Что такое коллагеновый порошок, как его принимать и добавлять в блюда
Секущиеся кончики волос, дряблая кожа, хруст в суставах, слоящиеся ногти – любой из перечисленных признаков может свидетельствовать о замедлении синтеза коллагена в организме. Этот фибриллярный белок составляет основу соединительной ткани, входящей в состав почти всех биоструктур. Для восполнения его нехватки и предупреждения преждевременного старения можно принимать коллагеновый порошок.
Для чего пьют коллагеновый порошок
Коллаген – это фибриллярный белок, синтезированный из пептидов. Коллагеновые волокна, состоящие из тысяч плотно упакованных полипептидных цепей коллагена, составляют основу соединительной ткани, из которой образованы хрящи, кости, дерма, сухожилия.
Чтобы организм мог производить коллаген в достаточном объеме, нужно употреблять мясо, морские продукты, овощи и желатин. Однако после 30 лет, при гормональных сбоях и некоторых внутренних заболеваниях синтез коллагена замедляется.
Внимание! Коллаген заполняет межклеточное пространство, что исключает образование пустот, которые приводят к провисанию кожного покрова и преждевременному старению.
Витамин C, пептиды коллагена и гиалуроновую кислоту содержит Напиток Young & Beauty (Красота и молодость) из линейки оперативного питания YooGo. Натуральный комплекс придаёт коже упругость и бархатистость, насыщает её влагой и наполняет здоровым сиянием.
Источником коллагена также является Cуставной фитосорбент Joint Comfort. В составе — гидролизат коллагена, который активирует регенерацию хрящевой ткани; яблочный пектин, что бережно очищает организм; инулин, что нормализует микрофлору кишечника, а также кора ивы, которая оказывает противовоспалительное воздействие.
Недостаток коллагена восполняется с помощью специальных кремов, лосьонов, сывороток. Но большей эффективностью обладают пищевые добавки или лекарственные препараты, которые принимаются внутрь: коллаген в виде капсул, таблеток, жидкости или порошка. В отличие от косметических средств, которые действуют только на поверхности кожного покрова, они принимаются внутрь и лучше усваиваются организмом.
Коллаген в форме порошка: как принимать
Как принимать коллаген в виде порошка, указано в инструкции. Дозировка и нюансы употребления могут отличаться в зависимости от марки препарата. Однако общий принцип применения всегда одинаков: рекомендуемое количество порошка разводят в холодной или теплой воде до полного растворения и выпивают за 1 прием.
Чтобы порошок полностью растворился, желательно развести его в нескольких ложках воды и лишь затем долить остальной объем жидкости. Для улучшения вкусовых качеств препарата можно заменить воду соком или морсом.
Как готовить блюда с коллагеновым порошком
Коллаген в виде порошка нужно принимать за 30 минут до или через 30 минут после употребления пищи. Не желательно смешивать препарат с едой, так как она ухудшит его усвоение. В крайнем случае можно добавить БАД в небелковое блюдо, к примеру, в кашу, блины, кексы либо вафли. Их температура не важна: коллагеновые волокна сохраняют структуру даже в кипятке.
Учтите, что коллаген в виде биодобавки не идентичен желатину. Желатин получают путем нагревания белка. Одной столовой ложки продукта достаточно, чтобы загустить 400 мл жидкости, что позволяет использовать его для приготовления желе или мармелада. Но если вы попытаетесь приготовить эти же блюда с коллагеновым порошком, ждите эпического провала, так как он совсем не сгущает жидкость.
Еще одно отличие между желатином и коллагеном заключается в том, что первый растворяется в горячей воде, а в холодной воде только медленно набухает, тогда как коллаген растворяется и в горячей, и в холодной воде. Учитывайте это при приготовлении блюд.
Гидролизат vs Нативный коллаген — ResedaOdor
В косметической промышленности коллаген популярен как ингредиент средств, предотвращающих старение кожи, а также его широко применяют в косметических операциях и процедурах заживления ран. Ожидается, что к 2025 году объем рынка «косметического» вырастет в несколько раз.
На данном этапе необходимо развести понятия, которые всегда вводят в заблуждение потребителей косметического рынка РФ.
Коллаге́н — фибриллярный белок, составляющий основу соединительной ткани организма и обеспечивающий её прочность и эластичность. Коллаген обнаружен у животных; отсутствует у растений, бактерий, вирусов, простейших и грибов.
Растительный коллаген – понятие, придуманное маркетологами для адаптирования веганской косметики, по факту это гидролизованный белок пшеницы, который по молекулярной структуре не может быть схож с коллагеном животного происхождения.
Гидролизованный коллаген (HC) — это группа пептидов с низкой молекулярной массой (3-6 КДА), которые могут быть получены ферментативным действием в кислых или щелочных средах при определенной температуре инкубации.
Коллагеновые пептиды — термины пептиды коллагена и гидролизованный коллаген являются синонимами и используются взаимозаменяемо для одного и того же продукта. Это просто вопрос семантики. Фраза «пептиды коллагена» основана на конечном продукте, который представляет собой пептиды, полученные из коллагена; тогда как «гидролизованный коллаген» происходит из процесса гидролиза, метода, с помощью которого получают пептиды.
Коллаген является наиболее важным белком, вырабатываемым человеческим организмом, он в основном образуется аминокислотами глицином (33%), пролином и гидроксипролином (22%) (первичная структура) в триплексной спирали, которая образована тремя α-цепями.
Эта структура коллагена очень стабильна из-за внутримолекулярных водородных связей между глицином в соседних цепях. Молекула коллагена образуется для тройной спиральной области и двух негелевых областей на обоих концах спиральной структуры с молекулярной массой ≈300 КДА, длиной 280 Нм и диаметром 1,4 Нм.
Гидролизат представляет собой обрывки белковых нитей, которые представлены отдельными аминокислотами, дипептидами и трипептидами.
Коллаген имеет большую молекулу и не проникает в кожу, в то время как пептиды отлично справляются с этой задачей
Кожа – это барьер.
Защитный барьер кожи составляет 500 Дальтон.
Исходя из этого, все молекулы больше данного показателя НЕ СПОСОБНЫ проникать в кожу человека.Напоминание:
- Молекулярный вес гидролизованного коллагена колеблется в диапазоне 1000-5000 Да.
- Молекулярный вес нативного коллагена равняется 300 000 Да.
Нативный коллаген сохраняет надмолекулярную и молекулярную структуру фибриллярного белка, благодаря этому компонент обладает высокой водопоглощающей способностью, что делает его хорошим компонентом для текстурирования, загущения и образования геля.
Кроме того, коллаген обладает свойствами, связанными с их поверхностным поведением, которое включает эмульсию, пенообразование, стабилизацию, адгезию, защитную коллоидную функцию и пленкообразующую способность.
Простыми словами, большая молекула коллагена действует цельно на коже человека, создавая газопроницаемую пленочку, защищая, очищая и питая кожу.
Коллагеновые волокна в силу своей природной фибрилльности обладают мощными функциями адсорбции, коллагеновая молекула способна принимать на себя влагу и др.вещества в 10 раз больше собственного веса. Данное свойство обеспечивает очищение кожи.
Таким образом, нативный коллаген обладает высокой эффективностью на коже человека/
Гидролизат с разрушенной молекулой не способен к пленкообразованию и поверхностному действию на коже человека, а также в силу сравнительно большой молекулы не преодолевает защитный барьер кожи человека.
Тогда почему гидролизованный коллаген настолько популярен в косметических средствах?
Гидролизованный коллаген хорошо растворим в воде, но не способен самостоятельно образовывать плёнки. Необходимо сочетать его с другими биополимерами [26,75].Также он представляет несколько преимуществ по сравнению с нативным коллагеном. Некоторые из них заключаются в более высокой терапевтической нагрузке, экономичности и не требующей многоступенчатой экстракционной процедуре.
Таким образом, экстрагировать гидролизованный коллаген намного экономично выгоднее, а также он более лёгок в технологическом процессе использования сырья (легко растворяется в воде, можно вводить при любой температуре, нет необходимости соблюдать pH и пр.)
Ключевое значение при выборе коллагена имеет его источник.
В данный момент, нативный коллаген экстрагируется из соединительной ткани свиней, КРС, куриц, медуз и др.
Чистота источника определяет чистоту сырья.
Животные, выращенные на ферме, как правило, подвергаются искусственному вскармливанию, прохождению курсу антибиотиков и мн.др. Все эти факторы отражаются на состоянии их здоровья и в т.ч на состояние соединительной ткани.
Компания Akses Swiss занимается экстракцией коллагена из соединительной ткани глубоководного моллюска, который обитает в дикой среде Тихого океана.
Получая отходы от промышленного лова из Перу посредством низкотемпературной и безферментатвной технологии экстрагируем нативный коллаген без изменений его структуры.
Что даёт сырье высокой степени очистки?
Биосовместимость коллагена является ценным аспектом в большинстве биоматериалов, поскольку при пересадке коллагена в поврежденную ткань он не оставляет странных остатков для организма в процессе его деградации.
Коллаген обладает низкой токсичностью и низкой вероятностью вызвать иммунный ответ, что делает его подходящим материалом для использования в качестве биоматериала в медицинской промышленности.
Preparation of Keratin Hydrolysate from Chicken Feathers and Its Application in Cosmetics
Скотобойни, пищевой промышленности и Кожевенная промышленность ежегодно производят огромное количество твердых кератин побочных продуктов – шерсть, перья, щетина, копыта, когти, рога и тому подобное. Согласно последним статистическим данным общая живой вес кур, индеек, уток и другие убой птицы в США составляет 62,5 миллиарда фунтов за год1; в ЕС это примерно 28,7 млрд фунтов в год. Учитывая, что перья до 8,5% от веса всего птицы, США только ежегодно производит около 5,3 млрд фунтов отходов перья2.
Кератин является белок экспонируется высокая химическая стойкость, потому что это сильно Пенополиолефины с мосты дисульфида, которые затрудняют его обработки. Получения растворимых продуктов требует раскалывание перекрестные ссылки и возможно проведение гидролиза пептидных связей3. Расщепление мосты дисульфида может действовать через реакции анионов тиоловых согласно следующим шаблон4
S– + – SbSc– ↔ – Sb– + – SSc–
С очень высоким рН гидролиз мосты дисульфида также появляется в соответствии с узором6
-SS– + → OH– –– S-Сох
В мягких условиях (рН около 8) даже sulfitolysis проходит по следующей схеме:
-SS – + HSO →3– – ш + – SSO3–
Наиболее экономичным способом унижающего достоинство Кератин является микробных разбивка, который характеризуется мягкая реакция условий во время обработки и высокой разбивка КПД (около 90%)7,8. Keratinases производятся некоторые бактерии, изолированный от почвы и кератин отходов9. Микробной keratinases гидролизуют жесткой и сильно сшитого кератин структур10 и результирующая KH подготовлен богаты растворимые белки, без потери незаменимых аминокислот, обнаруженных в нем11.
Для того, чтобы включать белка в косметических препаратов (например, эмульсии, лосьоны и гели), требования обеспечить, что такие белки, растворимые в воде, данные системы являются прозрачными и что повторное агрегирование пептидов избегать из-за гидрофобных взаимодействий. Таким образом обычной практикой является применение гидролизатов белков, таких как гидролизованный коллаген, эластин и кератина. При добавлении гидролизаты в косметические эмульсии, предпринимаются шаги для обеспечения что гидролизат сначала растворяется в воде. В некоторых случаях желательно, что белок (или гидролизата) растворяется в спирте или других органических растворителей12.
KH обычно характеризуется в шампуни, кондиционеры, лосьоны и Питательная сыворотка для волос, а также туши для ресниц, ногтей и агентов макияж глаз. Эффекты KH, объявил обычно включают в себя, образуя защитную пленку, разглаживание волос или ногтей структуры, повышенной пластичностью и внешний вид обработанной формирования, регулирующих последовательность продуктов и поощрение формирования пены13,14. также было доказано, что KH уменьшает поверхностное натяжение, следовательно добавок в косметике могут способствовать сокращение эмульгатор добавляется стабилизировать кремов. KH ограничить последствия раздражения, вызванные моющие средства (ПАВ) кожи, глаз и волос, таким образом уменьшая любые потенциальные побочные эффекты чистящих средств на ткани (например, обезвоживание кожи, твердости и снижение барьерной функции кожи). Высокая буферизации способности гидролизаты также использована для стабилизации рН косметики; пептиды короче длины имеют большую буферизации эффект15,16. Хотя как стандартные компоненты становятся установили KHs в волос и косметика для ногтей, а также используются в продуктах для ухода за кожей, исследования на увлажняющий эффект KH не появляются в современной литературе.
Щелочная ферментативный технология была разработана для обработки субпродуктов кератин в KH, и активное тестирование в процесс по воздействию целого ряда косметических добавки17,18,19,20,21,22. преимущество щелочной ферментативный гидролиз два этапа с помощью микробных протеазы для куриные перья достигает высокую эффективность в условиях мягкая реакция и качество KH является очень высоким, в отличие от гидролиза, занятых в сильных кислот или щелочей. На первом этапе перья инкубируют при более высокой температуре в щелочной среде, которая частично разрушает структуру кератина и набухает перья; После корректировки рН, перья гидролизуется с протеолитического фермента мягкая условиях на втором этапе. Dialyzed KH обладает высоким содержанием белков.
В целях метода, описанного здесь переработки птицы перья в KH через щелочные ферментативный гидролиз и тестирование эффект увлажняющими свойствами KH, применяется к косметическая Эмульсия O/W. Увлажняющие свойства расследуются инструментальные неинвазивные методы в естественных условиях. Наиболее частые методы для измерения кожи гидратации и барьер функция SC включают измерения электрических свойств кожи (проводимости или емкости). Различные методы для изучения гидратации SC включают вблизи инфракрасные многоспектральные воображая метод (NIM), спектроскопии ядерного магнитного резонанса, оптическая когерентная томография или переходных термотрансферные23. Барьерная функция SC коррелирует с TEWL SC и она измеряется вентилируемых палата метод, метод непроветриваемой камере и открытой камерой метод24.
Свойства модели составов определяются с помощью зонда Multi адаптера 5 МПа с тремя типами датчиков. Первая, измерялся см 825, увлажнения кожи меры путем оценки изменений в электрическую мощность на поверхности кожи; измерительного конденсатора показывает изменения в емкость поверхности кожи в единицах corneometric. Измерялся дает только относительной оценки гидратации кожи25. Для TEWL второй зонд, tewameter TM 300, используется для измерения градиента плотности испарения воды (в открытой камерой инструмент, основанный на закон Фика диффузии) из кожи косвенно две пары датчиков (температура и относительная влажность) Указывает количество воды, перевозимого в определенный район и период времени (г/м2/ч). Этот метод может обнаружить даже малейшее нарушение функции барьера кожи26. РН кожи является одним из показателей барьера и антимикробная функции SC27. Кислотность кожи мантии измерялась (третий) кожи 905 рН зонд, подключен к станции 5 МПа. Это специально разработанные зонд состоит из стекла с плоской вершиной электрода для контакта с полной кожей, подключенных к вольтметра. Система измеряет потенциальные изменения благодаря деятельности водорода катионов, окружающих очень тонкий слой твердых форм, измеренных в верхней части зонда. Изменения напряжения в отображаются как рН28.
Мы представляем эксперименты, разделены на три категории: (1) подготовка KH из курицы перья-двухступенчатый щелочной ферментативный гидролиз и его очистки методом диализа (удаление солей и низкомолекулярных фракций), (2) подготовка косметических составы, содержащие 2, 4 и 6% KH и (3) тестирование свойств KH, измеряя увлажнения, TEWL, кожи и кожи рН. Тестирование проводилось на 10 женщин, средний возраст 27,2 лет и 10 мужчин, средний возраст 26.2 лет. Метод отбора добровольцев и тестирования самой были проведены международные этические принципы био медицинских исследований, использование человеческих субъектов29; все лица дали их осознанного согласия до включения в исследование. Перед началом тестирования начался, добровольцев было предложено заполнить вопросник о состоянии их здоровья. Добровольцы, обязались избегать применения любых косметических продуктов испытательных участков и прилегающих районах в течение 24 ч до и во время периода испытаний; Кроме того они были лишь краткое вечером автомойки с проточной водой.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Гидролизованный коллаген — обзор
3.4 Гидролизованный коллаген и желатин
Коллаген — это животный белок из внеклеточного матрикса соединительной ткани млекопитающих. Коллаген поддерживает биологическую и структурную целостность внеклеточного матрикса, обеспечивая механическую прочность, стимулируя клеточную адгезию и пролиферацию, и являясь динамичным и гибким материалом для улучшения клеточного поведения и функции тканей [10,80]. Существует несколько типов коллагена, но наиболее часто используется тип I.Молекулы коллагена состоят из трех полипептидных цепей, которые образуют трехспиральную структуру, стабилизированную водородными связями с молярной массой ~ 300 кДа, в основном образованные аминокислотами глицином, пролином и гидроксипролином [80,81].
Денатурация природного коллагена с последующим гидролизом протеолитическими ферментами приводит к гидролизованному коллагену (HC), состоящему из небольших пептидов с низкой молярной массой. HC представляет собой раствор с низкой вязкостью, антиоксидантной способностью, антимикробной активностью, биодоступностью и высокой растворимостью.Он используется в косметической, фармацевтической промышленности, производстве биоматериалов, пищевой и нутрицевтической промышленности. Однако из-за своей низкой молярной массы HC не подходит для производства пленок или каркасов сам по себе, поэтому его обычно применяют в сочетании с другими биополимерами [81].
Желатин — это белок, полученный в результате термической денатурации и кислотного или щелочного частичного гидролиза коллагена. Его структура состоит из смеси полипептидов α-, β- и γ-цепей с типичным аминокислотным составом Ala-Gly-Pro-Arg-Gy-Glu-4Hyp-Gly-Pro-.Желатин, полученный кислотной обработкой коллагена, классифицируется как тип A, тогда как желатин, полученный обработкой коллагена щелочью, классифицируется как тип B. Наиболее используемыми источниками экстракции являются бычья, свиная кожа, кости и кожа рыб. Желатин растворим в воде, и его свойства зависят от характеристик исходного коллагена и процесса экстракции. Он представляет пленкообразующую способность, гелеобразование, адгезию, когезию, прозрачность, загущение и способность связывать воду. Он широко используется в пищевой промышленности в качестве гелеобразователя, стабилизатора, эмульгатора и текстурирующего агента для некоторых продуктов [82].В медицинских целях желатин используется в перевязочных материалах для ран, доставке лекарств и оральных пленках, проявляя такие свойства, как биоразлагаемость, биосовместимость, неиммуногенность, мукоадгезивность и пленкообразующая способность [10,23].
Добавление углеводородов к ODF на основе желатина увеличивает гибкость пленок и делает пленки более гидрофильными, с низкими значениями краевого угла смачивания и быстрым распадом. Такое поведение может быть связано с низкой молекулярной массой молекул HC по сравнению с желатином [26,41,42].
ODF на основе желатина продемонстрировали высокую прочность на разрыв и мукоадгезивность по сравнению с другими природными полимерами [15,23,24,26,41,42,79]. Однако пленки, по-видимому, обладают плохой гидрофильностью, когда желатин используется отдельно. Он был смешан с HC [26,41,42], крахмалом [15,23,24,79], CMC [79] и HPMC [27], в которых увеличение доли других компонентов смеси увеличивало гидрофильность и уменьшенное время распада ODF. При смешивании с крахмалом [24] или HC [26] пленки сохраняли постоянную мукоадгезивность независимо от пропорции смесей, но с ГПМЦ [27] увеличение доли желатина увеличивало мукоадгезивность смесей.
Метод, используемый для оценки времени дезинтеграции, также влияет на ODF на основе желатина. В нескольких исследованиях использовался метод слайд-кадра, в котором время распада — это время, необходимое для того, чтобы капля раствора, помещенная на верхнюю часть пленки, растворила пленку, образуя отверстие. Эти исследования показали подходящее время дезинтеграции порядка 30 с [15,23,24,27,42]. С другой стороны, когда использовался метод чашки Петри, образец погружали в раствор и считали время, необходимое для полного разрушения пленки.В исследованиях представлены результаты распада за 5 мин [26,79]. Однако когда Kwak et al. [83] использовали рыбий желатин по сравнению с желатином из свиной кожи типа А, обычно используемым в других исследованиях для получения ODF с кофеином, они получили время распада 40 с методом чашки Петри. Это указывает на то, что источник желатина также может играть важную роль в конечных свойствах ODF.
В целом, исследований с использованием коллагена для разработки ODF мало, но кажется, что HC усиливает гидрофильность и свойства дезинтеграции при смешивании с другими биополимерами.Кроме того, желатин показывает хороший потенциал для применения в качестве ODF, в первую очередь при использовании в сочетании с другими полимерами, в которых желатин действует как усилитель механической прочности и мукоадгезионных свойств.
Обзор, применение, побочные эффекты, меры предосторожности, взаимодействия, дозировка и обзоры Б.А. Может ли коллаген II типа поддерживать терапевтический эффект, вызванный метотрексатом, у пациентов с хроническим ревматоидным артритом? Двойное слепое рандомизированное исследование.Br J Rheumatol 1998; 37 (10): 1110-1117. Просмотреть аннотацию.
Маккаун, К.М., Карбон, Л.Д., Каплан, С.Б., Элион, Дж. А., Лор, К.М., Кремер, Массачусетс, Дж. Бустилло, М., Гонсалес, М., Кэли, Г., Стир, Е. Л., Сомес, Г. У., Майерс , LK, Seyer, JM, Kang, AH, и Postlethwaite, AE. Недостаточная эффективность перорального бычьего коллагена типа II, добавленного к существующей терапии ревматоидного артрита. Arthritis Rheum 1999; 42 (6): 1204-1208. Просмотреть аннотацию.
Трентам, Д. Э., Динезиус-Трентам, Р. А., Орав, Э. Дж., Комбитчи, Д., Лоренцо, К., Сьюэлл, К. Л., Хафлер, Д. А., и Вайнер, Х. Л. Эффекты перорального введения коллагена типа II на ревматоидный артрит. Наука 9-24-1993; 261 (5129): 1727-1730. Просмотреть аннотацию.
Zhang, LL, Wei, W., Xiao, F., Xu, JH, Bao, CD, Ni, LQ, и Li, XF Рандомизированное, двойное слепое, многоцентровое, контролируемое клиническое испытание коллагена куриного типа II в пациенты с ревматоидным артритом. Arthritis Rheum 7-15-2008; 59 (7): 905-910. Просмотреть аннотацию.
AutoImmune Inc. объявляет о результатах исследования III фазы препарата Colloral. URL https://www.autoimmune.com/clinic/coll.html (по состоянию на 24 октября 1999 г.).
Барклай Т.С., Цурунис К., Маккарт ГМ. Глюкозамин. Энн Фармакотер 1998; 32: 574-9. Просмотреть аннотацию.
Barnett ML, Combitchi D, Trentham DE. Пилотное испытание перорального коллагена типа II в лечении ювенильного ревматоидного артрита. Arthritis Rheum 1996; 39: 623-8. Просмотреть аннотацию.
Барнетт М.Л., Кремер Дж. М., Сент-Клер В. и др.Лечение ревматоидного артрита пероральным коллагеном II типа. Arthritis Rheum 1998; 41: 290-7. Просмотреть аннотацию.
Cazzola M, Antivalle M, Sarzi-Puttini P, Dell’Acqua D, Panni B, Caruso I. Оральный коллаген типа II в лечении ревматоидного артрита. Шестимесячное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование. Clin Exp Rheumatol. 2000; 18 (5): 571-7. Просмотреть аннотацию.
Crowley DC, Lau FC, Sharma P, Evans M, Guthrie N, Bagchi M и др. Безопасность и эффективность неденатурированного коллагена типа II при лечении остеоартрита колена: клиническое испытание.Int J Med Sci. 2009 Октябрь 9; 6 (6): 312-21. Нет doi Просмотреть аннотацию.
Kalden JR, Sieper J. Оральный коллаген в лечении ревматоидного артрита [от редакции]. Arthritis Rheum 1998; 41: 191-4.
Луго JP, Сайед З.М., переулок NE. Эффективность и переносимость добавки неденатурированного коллагена типа II в модуляции симптомов остеоартрита коленного сустава: многоцентровое рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование. Nutr J. 2016; 15: 14. DOI: 10.1186 / s12937-016-0130-8. Просмотреть аннотацию.
Луго Дж. П., Сайед З. М., Лау ФК и др.Неденатурированный коллаген типа II (UC-II®) для поддержки суставов: рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование на здоровых добровольцах. J Int Soc Sports Nutr. 2013; 10 (1): 48. Просмотреть аннотацию.
Mullins RJ, Richards C, Walker T. Аллергические реакции на пероральный, хирургический и местный бычий коллаген. Анафилактический риск для хирургов. Aust N Z J Ophthalmol 1996; 24: 257-60. Просмотреть аннотацию.
Томпсон Диджей, Бэррон К.С., Уиткап С.М., Робинсон МР. Безопасность и эффективность куриного коллагена II типа при увеите, связанном с ювенильным ревматоидным артритом.Ocul Immunol Inflamm. 2002; 10 (2): 83-91. Просмотреть аннотацию.
Trentham DE. Устная толеризация как лечение ревматоидного артрита. Rheum Dis Clin North Am 1998; 24: 525-36. Просмотреть аннотацию.
Wei W., Zhang LL, Xu JH, et al. Многоцентровое двойное слепое рандомизированное контролируемое клиническое исследование III фазы куриного коллагена II типа при ревматоидном артрите. Arthritis Res Ther. 2009; 11 (6): R180. Просмотреть аннотацию.
Xie Q, Shi R, Xu G, et al. Эффекты AR7 Joint Complex при артралгии у пациентов с остеоартритом: результаты трехмесячного исследования в Шанхае, Китай.Nutr J. 27 октября 2008 г .; 7:31. Просмотреть аннотацию.
Польза для здоровья, побочные эффекты, применение, дозы и меры предосторожности
Бакман К., Гутьеррес Дж. И др. Эффекты коллагена II типа для субъективного обезболивания. Прикладные решения для здоровья 1999;
Кэткарт, Э. С., Хейс, К. К., Гоннерман, В. А., Лаццари, А. А., и Францблау, К. Экспериментальный артрит у нечеловеческих приматов. I. Индукция бычьим коллагеном II типа. Lab Invest 1986; 54 (1): 26-31. Просмотреть аннотацию.
Гарнеро, П., Гинейтс, Э., Кристгау, С., Финк, Б. и Дельмас, П.Д. Связь базовых уровней глюкозилгалактозилпиридинолина в моче и С-телопептида коллагена II типа с прогрессированием разрушения суставов в пациенты с ранним ревматоидным артритом. Arthritis Rheum 2002; 46 (1): 21-30. Просмотреть аннотацию.
Гарнеро, П., Ландеве, Р., Боерс, М., Верхувен, А., Ван Дер Линден, С., Кристгау, С., Ван дер Хейде, Д., Боонен, А., и Гёзенс, П. • Связь исходных уровней маркеров деградации костей и хрящей с долгосрочным прогрессированием повреждения суставов у пациентов с ранним ревматоидным артритом: исследование COBRA.Arthritis Rheum 2002; 46 (11): 2847-2856. Просмотреть аннотацию.
Hauselmann, HJ, Caravatti, M., Seifert, B., Wang, K., Bruckner, P., Stucki, G., and Michel, BA Может ли коллаген типа II поддерживать терапевтический эффект, индуцированный метотрексатом у пациентов с длительным -постоянный ревматоидный артрит? Двойное слепое рандомизированное исследование. Br J Rheumatol 1998; 37 (10): 1110-1117. Просмотреть аннотацию.
МакКаун, К. М., Карбоне, Л. Д., Каплан, С. Б., Элион, Дж. А., Лор, К. М., Кремер, М. А., Бустилло, Дж., Гонсалес, М., Kaeley, G., Steere, E.L., Somes, G.W., Myers, L.K., Seyer, J.M., Kang, A.H. и Postlethwaite, A.E. Недостаточная эффективность перорального бычьего коллагена типа II, добавленного к существующей терапии ревматоидного артрита. Arthritis Rheum 1999; 42 (6): 1204-1208. Просмотреть аннотацию.
Nandakumar, KS, Backlund, J., Vestberg, M., and Holmdahl, R. Специфические антитела к коллагену II (CII) вызывают артрит в отсутствие T- или B-клеток, но прогрессирование артрита усиливается CII-реактивными Т-клетки. Arthritis Res Ther 2004; 6 (6): R544-R550.Просмотреть аннотацию.
Nissim, A., Winyard, PG, Corrigall, V., Fatah, R., Perrett, D., Panayi, G., and Chernajovsky, Y. Генерация неоантигенных эпитопов после посттрансляционной модификации коллагена типа II под действием присутствующих факторов внутри воспаленного сустава. Arthritis Rheum 2005; 52 (12): 3829-3838. Просмотреть аннотацию.
Сьюэлл, К. Л. и Трентэм, Д. Е. Патогенез ревматоидного артрита. Ланцет 1-30-1993; 341 (8840): 283-286. Просмотреть аннотацию.
Sieper, J and Mitchison, AN.Терапия пероральным коллагеном II типа как новая возможность селективной иммуносупрессии в терапии ревматоидного артрита. Zeitschrift fuer Rheumatologie 1994; 53 (2): 53-58.
Trentham DE, Halpner AD, Trentham RA, Bagchi M, Kothari S, Preuss HG и Bagchi D. Использование неденатурированного коллагена типа II в лечении ревматоидного артрита. Клиническая практика альтернативной медицины 2001; 2 (4): 254-9.
Трентам, Д. Э., Динезиус-Трентам, Р. А., Орав, Э. Дж., Комбитчи, Д., Лоренцо, К., Сьюэлл, К. Л., Хафлер, Д. А. и Вайнер, Х. Л. Эффекты перорального введения коллагена типа II при ревматоидном артрите. Наука 9-24-1993; 261 (5129): 1727-1730. Просмотреть аннотацию.
Трентэм Д. Э., Таунс А. С. и Канг А. Х. Аутоиммунитет к коллагену типа II — экспериментальная модель артрита. J Exp Med 9-1-1977; 146 (3): 857-868. Просмотреть аннотацию.
Zhang, LL, Wei, W., Xiao, F., Xu, JH, Bao, CD, Ni, LQ, и Li, XF Рандомизированное, двойное слепое, многоцентровое, контролируемое клиническое испытание коллагена куриного типа II в пациенты с ревматоидным артритом.Arthritis Rheum 7-15-2008; 59 (7): 905-910. Просмотреть аннотацию.
AutoImmune Inc. объявляет о результатах исследования III фазы препарата Colloral. URL http://www.autoimmune.com/clinic/coll.html (по состоянию на 24 октября 1999 г.).
Барклай Т.С., Цурунис К., Маккарт ГМ. Глюкозамин. Энн Фармакотер 1998; 32: 574-9. Просмотреть аннотацию.
Barnett ML, Combitchi D, Trentham DE. Пилотное испытание перорального коллагена типа II в лечении ювенильного ревматоидного артрита. Arthritis Rheum 1996; 39: 623-8. Просмотреть аннотацию.
Барнетт М.Л., Кремер Дж. М., Сент-Клер В. и др. Лечение ревматоидного артрита пероральным коллагеном II типа. Arthritis Rheum 1998; 41: 290-7. Просмотреть аннотацию.
Kalden JR, Sieper J. Оральный коллаген в лечении ревматоидного артрита [от редакции]. Arthritis Rheum 1998; 41: 191-4.
Московиц RW. Роль гидролизата коллагена в заболеваниях костей и суставов. Semin Arthritis Rheum 2000; 30: 87-99. Просмотреть аннотацию.
Mullins RJ, Richards C, Walker T. Аллергические реакции на пероральный, хирургический и местный бычий коллаген.Анафилактический риск для хирургов. Aust N Z J Ophthalmol 1996; 24: 257-60. Просмотреть аннотацию.
Trentham DE. Устная толеризация как лечение ревматоидного артрита. Rheum Dis Clin North Am 1998; 24: 525-36. Просмотреть аннотацию.
Xie Q, Shi R, Xu G, et al. Эффекты AR7 Joint Complex при артралгии у пациентов с остеоартритом: результаты трехмесячного исследования в Шанхае, Китай. Nutr J. 27 октября 2008 г .; 7:31. Просмотреть аннотацию.
Исследование хронической оральной токсичности препарата пептидов морского коллагена из кожи кеты (Oncorhynchus keta) с использованием крысы Sprague-Dawley
Abstract
В связи с повышенным потреблением препарата пептидов морского коллагена (MCP) в качестве ингредиентов в функциональных продуктах питания и фармацевтических препаратах, необходимо было выполнить требования безопасности в форме оценки хронической пероральной токсичности.Чтобы определить хроническую пероральную токсичность MCP, было проведено 24-месячное исследование кормления MCP. Крыс Sprague-Dawley (S-D) в возрасте четырех недель обоих полов лечили MCP при концентрациях в рационе 0%, 2,25%, 4,5%, 9% и 18% (вес / вес). Фактическое потребление пищи и вес тела отдельных животных регистрировали периодически до умерщвления. Образцы крови и мочи были собраны для оценки химического состава сыворотки и анализа мочи. На протяжении всего экспериментального периода не было токсикологически значимой разницы между животными, получавшими носитель, и животными, получавшими МСР, в отношении выживаемости, массы тела, потребления пищи, анализа мочи, параметров клинической биохимии и относительной массы органов у обоих полов.Более того, частота неопухолевых поражений в группах, получавших MCP, не увеличилась значительно по сравнению с контрольной группой. В настоящих экспериментальных условиях не наблюдалось более высокого риска хронических токсических эффектов у крыс, получавших MCP, при концентрациях в рационе 2,25%, 4,5%, 9% и 18% (вес / вес), чем у крыс, получавших базовую диету для грызунов. .
Ключевые слова: пептиды морского коллагена, хроническая пероральная токсичность, крысы Sprague-Dawley
1. Введение
В последние годы было признано, что биоактивные пептиды, полученные из пищевых белков растений и животных, могут оказывать широкий спектр физиологических или гормоноподобная биологическая активность, превышающая их пищевую ценность [1].С морскими видами, составляющими почти половину всего глобального биоразнообразия, море предлагает огромные ресурсы для изучения морских биоактивных пептидов [2,3]. Препарат морских коллагеновых пептидов (MCP) представляет собой низкомолекулярный пептид, ферментативно гидролизованный из тканей коллагена морских рыб. Коллагеновые ткани, в том числе кожа, кости и чешуя, составляют 30% отходов переработки морской рыбы [4]. Было обнаружено, что как специфические белковые фрагменты МСР обладают широким спектром функциональных и биологических свойств, включая антиоксидантное [4,5], антигипертензивное [6,7] и противовозрастное действие [8].Эти биоактивные свойства или возможности для улучшения здоровья привели к использованию пептидов морского коллагена в качестве ингредиентов функциональных пищевых продуктов или фармацевтических препаратов [2,3].
Поскольку пептиды морского коллагена представляют собой модифицированные натуральные продукты, существуют требования безопасности для проведения исследований зависимости реакции от дозы на животных и клинических испытаний для оценки их переносимости и потенциальных хронических побочных эффектов, которые могут быть вызваны самими пептидами коллагена или их побочными эффектами. продукты при переработке [1].Кроме того, для пептидов коллагена из морской рыбы существуют значительные различия в физико-химических свойствах и аминокислотном составе по сравнению с пептидами коллагена из домашнего скота, такого как корова и свинья [9,10]. Следовательно, предыдущие данные оценки безопасности пептидов коллагена от домашнего скота все еще недостаточны для оценки профилей безопасности пептидов морского коллагена.
В настоящее время отсутствуют данные о пероральной хронической токсичности пептидов морского коллагена in vivo .Учитывая повышенное потребление пептидов морского коллагена в качестве ингредиентов в продуктах питания и фармацевтических препаратах, оценка потенциальной хронической токсичности этого соединения имеет важное значение [11,12]. Поэтому 24-месячное диетическое исследование, проведенное на крысах Sprague-Dawley (S-D), получавших разные уровни MCP, было проведено для оценки профилей хронической пероральной токсичности MCP.
2. Результаты
2.1. Показатели выживаемости
Ни в одной из групп, получавших препарат пептидов морского коллагена (MCP) в течение 12 месяцев, не было обнаружено смертности.В 24-месячном исследовании показатели выживаемости 0%, 2,25%, 4,5%, 9% и 18% групп, получавших MCP, составили 55%, 70%, 55%, 60% и 60% для женщин и 45%. , 65%, 65%, 70% и 60% для мужчин соответственно. Статистически значимой разницы в анализе выживаемости между контрольной группой и группами, получавшими MCP, не было ( P > 0,05) ().
2.2. Общее состояние, масса тела, эффективность питания, потребление пищи и потребление MCP
Не было заметной разницы в общих состояниях между группами, получавшими носитель, и группами, получавшими MCP.Как показано в, наблюдалась возрастная тенденция к увеличению массы тела той же группы. Между тем, прирост массы тела значительно снизился после 18-месячного лечения MCP. Что касается потребления продуктов питания, то в каждой группе наблюдалась заметная возрастная тенденция к снижению; в то время как никаких дозозависимых изменений в потреблении пищи не было обнаружено ни у одного пола, когда животных лечили MCP в течение 12 или 24 месяцев.
Рисунок 1
Данные о ежемесячной выживаемости крыс Sprague-Dawley (S-D), получавших препарат пептидов морского коллагена (MCP) в течение 24 месяцев.Значения были проанализированы на предмет статистической значимости различий с помощью анализа выживаемости Каплана-Мейера. Все P > 0,05 по сравнению с контрольными значениями.
Рисунок 2
Кривые роста крыс S-D, получавших препарат пептидов морского коллагена (MCP) в течение 24 месяцев. Уровни массы тела выражали как средние значения и анализировали с помощью теста однофакторного дисперсионного анализа (ANOVA). Множественное сравнение теста Даннета t было использовано для оценки разницы между группами, получавшими МСР, и контрольной группой.Все P > 0,05 по сравнению с контрольными значениями.
Более того, эффективность питания в той же группе с возрастом значительно снизилась (). На протяжении всего экспериментального периода, поскольку не было обнаружено статистической разницы или дозозависимой тенденции массы тела и эффективности питания между контрольной группой и группами, получавшими МСР, у обоих полов, фактическое суточное потребление тестируемого вещества показало хорошую корреляцию с его диетическими концентрациями. в разных группах. В течение 24 месяцев лечения прием МКП 2.25%, 4,5%, 9% и 18% групп, получавших MCP, оценивались как 1,063, 2,216, 4,609 и 8,586 г / кг · мт / день для женщин и 0,907, 1,798, 3,418, 6,658 г / кг · мт / день для мужчин соответственно ().
Таблица 1
Пищевая эффективность крыс S-D, получавших препарат пептидов морского коллагена (MCP) в течение 24 месяцев.
Пол | MCP (%) | n | 6 месяцев Пищевая эффективность (г / 100 г) | n | 12 месяцев Пищевая эффективность (г / 100 г) | n | 18 месяцев Пищевая эффективность (г / 100 г) | n | 24 месяца Пищевая эффективность (г / 100 г) | ||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
Женский | 0 | 20 | 3.54 ± 1,41 a | 20 | 2,04 ± 5,80 | 16 | −0,86 ± 5,82 | 10 | −0,02 ± 0,08 | ||||||||||||||
2,25 | 20 | 2,21 ± 1,50 20 | 2,74 ± 6,57 | 19 | 0,42 ± 3,15 | 10 | 0,04 ± 0,06 | ||||||||||||||||
4,5 | 20 | 2,74 ± 1,98 | 20 | 4,04 ± 2,49 | — 0.35 ± 2,49 | 10 | 0,03 ± 0,05 | ||||||||||||||||
9 | 20 | 3,53 ± 2,24 | 20 | 3,50 ± 5,11 | 19 | 0,99 ± 2,22 | 10 | 0,04||||||||||||||||
18 | 20 | 2,74 ± 3,14 | 20 | 2,49 ± 1,78 | 17 | 0,39 ± 2,32 | 10 | 0,04 ± 0,05 | |||||||||||||||
мужчина | 2.13 ± 1,46 | 20 | 2,11 ± 3,00 | 18 | 0,76 ± 1,46 | 9 | -0,12 ± 0,30 | ||||||||||||||||
2,25 | 20 | 3,05 ± 2,40 | 20 | 1,66 | 19 | 0,57 ± 1,57 | 10 | −0,09 ± 0,14 | |||||||||||||||
4,5 | 20 | 2,78 ± 2,86 | 20 | 2,79 ± 2,45 | 19 | 1.55 ± 2,82 | 10 | 0,00 ± 0,02 | |||||||||||||||
9 | 20 | 3,33 ± 1,75 | 20 | 3,02 ± 2,44 | 18 | -0,50 ± 2,57 | −10 | ± 0,07 | |||||||||||||||
18 | 20 | 3,97 ± 2,06 | 20 | 3,54 ± 3,18 | 18 | 0,46 ± 1,53 | 10 | -0,05 ± 0,06 |
Пол | MCP (%) | n | 12 месяцев | n | 24 месяца | ||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
Расход продуктов питания a кг | 0w (г / день) Потребление MCP b (г / кг · веса тела / день) | Потребление пищи a (г / кг · веса тела / день) | Потребление MCP b (г / кг · веса тела / день) | ||||||||||||||||
Женский | 0 | 20 | 65.4 ± 5,7 | 0,000 | 10 | 57,0 ± 3,9 | 0,000 | ||||||||||||
2,25 | 20 | 63,7 ± 8,9 | 1,290 | 10 | 52,5 ± 4,1 | 1,0 | 4,5 | 20 | 65,2 ± 9,2 | 2,641 | 10 | 54,7 ± 7,7 | 2,216 | ||||||
9 | 20 | 61,4 ± 6,2 | 4.973 | 10 | 56,9 ± 4,9 | 4,609 | |||||||||||||
18 | 20 | 62,7 ± 7,2 | 10,157 | 10 | 53,0 ± 4,2 | 0 8,586 | 20 | 51,7 ± 4,9 | 0,000 | 9 | 43,7 ± 3,9 | 0,000 | |||||||
2,25 | 20 | 51,3 ± 4,6 | 1,039 | 10 | 44.8 ± 3,2 | 0,907 | |||||||||||||
4,5 | 20 | 50,6 ± 5,8 | 2,049 | 10 | 44,4 ± 3,8 | 1,798 | |||||||||||||
9 | 20199 20 | 4,107 | 10 | 42,2 ± 3,4 | 3,418 | ||||||||||||||
18 | 20 | 48,8 ± 3,6 | 7,906 | 10 | 41,1 ± 3,5 | 6.658 |
2.3. Клинические биохимические параметры
Как показано в, не было обнаружено никаких дозозависимых изменений или статистических различий по уровням аланинаминотрансферазы (АЛТ), аспартатаминотрансферазы (АСТ), альбумина (АЛБ), общего белка (ТП) и азота мочевины крови в сыворотке крови. (АМК) после 12 месяцев и 24 месяцев лечения. Когда животных лечили MCP в течение 24 месяцев, уровни креатинина (CR) незначительно увеличивались в 9% и 18% группах самцов по сравнению с контрольной группой ( P > 0.05). Кроме того, значительное увеличение уровня ТП в сыворотке наблюдалось в группе мужчин, получавших 9% МСР ( P <0,05), тогда как в группах женщин, получавших МСР, по сравнению с контрольной группой не было обнаружено значительного повышения уровня ТП в сыворотке. В то время как повышение уровня ТП в сыворотке в группе мужчин, получавших 9% МСР, рассматривалось как случайное и не связанное с лечением из-за отсутствия значительной дозовой зависимости.
После 12 месяцев лечения значительно сниженные уровни триглицеридов (ТГ) в сыворотке крови наблюдались у 2 пациентов.25% и 4,5% женских групп, получавших МСР, по сравнению с женщинами контрольной группы ( P <0,05), тогда как сывороточные уровни ТГ в мужских группах существенно не различались между контрольной и получавшей МСР группами (P > 0,05). ). Более того, не было никакого эффекта, связанного с MCP, на сывороточные уровни общего холестерина (TCHOL) у обоих полов ( P > 0,05). После 24 месяцев лечения МСР значительно более низкие уровни ТГ в сыворотке крови наблюдались в группах женщин, получавших 4,5% и 9%, а также во всех группах мужчин, получавших МСР, по сравнению с контрольной группой ( P <0.05). Аналогичным образом, уровни TCHOL в сыворотке в группах мужчин, получавших 4,5%, 9% и 18% МСР, заметно снизились по сравнению с контрольной группой мужчин ( P <0,05), в то время как у женщин значимых межгрупповых различий не наблюдалось. группы ( P > 0,05). Кроме того, по оценочным данным за 12 месяцев и 24 месяца не было выявлено значительной разницы в уровнях глюкозы в сыворотке (GLU) между контрольной и получавшей MCP группами (2).
2.4. Общий анализ мочи
В параметрах анализа мочи и микроскопическом исследовании осадка мочи не было обнаружено связанного с MCP эффекта.Объем мочи, pH и удельный вес были в пределах нормы (данные не показаны).
2.5. Относительный вес органов
Вариабельность веса органов была связана с наличием общих результатов, таких как масса, атрофия, опухоль, фиброз, увеличение площади и области гиперемии [13]. После 24 месяцев приема МСР не было выявлено значительных связанных с МСР различий по относительной массе органов мозга, сердца, легких, печени, селезенки, почек, надпочечников, семенников и яичников ().
2.6. Гистопатологическое исследование
При гистологическом исследовании данные неопухолевых поражений представлены в. Большинство поражений, связанных с воспалительными изменениями и возрастными дегенерациями (фиброз, эмфизема, атрофия и гиперплазия), были обнаружены во всех группах. По сравнению с контрольной группой, частота жировой вакуолизации гепатоцитов заметно снизилась в группах обоих полов, получавших МСР, при этом значимости не было ( P > 0,05). Никакого другого значительного увеличения частоты патологических изменений или поражений не наблюдалось в группах, получавших MCP, по сравнению с контрольной группой ( P > 0.05).
Таблица 3
Биохимические параметры сыворотки крови крыс S-D, получавших препарат пептидов морского коллагена (MCP) в течение 12 месяцев и 24 месяцев.
месяцев | Параметр | Женский MCP (%) | Мужской MCP (%) | ||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
0% | 2,25% | 4,5% | 9015 9% 901 % | 2,25% | 4,5% | 9% | 18% | ||||||
n | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | ||
12 | ALT (Е / л) | 61.80 ± 12,17 а | 59,95 ± 16,43 | 67,79 ± 18,09 | 70,27 ± 11,39 | 68,93 ± 11,59 | 63,15 ± 16,78 | 58,40 ± 9,77 | 65,36 ± 14,71 9019 9,77 16,88 | ||||
АСТ (Ед / л) | 126,15 ± 38,96 | 137,70 ± 31,27 | 130,38 ± 28,35 | 134,67 ± 27,07 | 135,00 ± 43,59 | 151,10 ± 45,51 | 13 ± 37,31163,00 ± 42,07 | 125,50 ± 45,85 | 123,64 ± 34,70 | ||||
ALB (г / л) | 37,96 ± 5,24 | 38,66 ± 2,41 | 39,49 ± 3,94 395 | 39,49 ± 3,94 | 39,54 ± 3,65 | 31,64 ± 2,03 | 31,55 ± 1,48 | 31,20 ± 2,88 | 29,37 ± 3,26 | 31,08 ± 2,01 | |||
TP (г / л) | 90,70200 90,00 ± 4,62 ± 5.11 | 80,81 ± 3,99 | 82,38 ± 5,39 | 81,20 ± 5,99 | 70,00 ± 2,81 | 68,06 ± 6,09 | 69,50 ± 4,45 | 65,87 ± 6,33 | 67,86 ± 2,71 | ||||
) | 9,36 ± 2,57 | 8,14 ± 1,71 | 9,43 ± 1,82 | 9,93 ± 1,87 | 9,41 ± 1,38 | 6,09 ± 1,05 | 5,56 ± 0,87 | 6,73 ± 1,68 9019 2,99 | 5.86 ± 0,69 | ||||
CR (мкмоль / л) | 74,85 ± 13,63 | 78,65 ± 10,80 | 75,19 ± 11,86 | 83,07 ± 12,60 | 71,60 ± 12,11 | 200 68,85 ± 4 | 73,86 ± 10,27 | 75,67 ± 16,39 | 68,57 ± 3,74 | ||||
ТХОЛ (ммоль / л) | 2,57 ± 1,63 | 2,42 ± 0,56 | 0,33 ± 1,01 | 2,56 .51 ± 1,00 | 2,95 ± 1,44 | 2,31 ± 0,33 | 2,54 ± 1,36 | 2,67 ± 0,78 | 2,39 ± 0,67 | ||||
ТГ (ммоль / л) | 4,14 ± 2,09 | 2,47 ± 1,64 * | 2,87 ± 2,11 * | 3,09 ± 1,65 | 3,22 ± 1,48 | 2,45 ± 1,35 | 2,03 ± 1,01 | 1,81 ± 1,01 | 2,13 ± 1,54 | 2,03 ± 0,79 | |||
GLU (мм Л) | 6.27 ± 0,69 | 6,27 ± 0,52 | 6,50 ± 0,37 | 6,66 ± 0,44 | 6,57 ± 0,40 | 6,07 ± 1,65 | 6,25 ± 0,41 | 6,04 ± 0,62 | 6,24 ± 0,31 | 6,39 ± 0,40 | 6,39 ± 0,40 | ||
24 | n | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 9 | 10 | 10 | 10 | 10 | ||
ALT (U / LT) | 41.89 ± 13,93 | 41,30 ± 5,95 | 45,30 ± 12,28 | 43,17 ± 7,14 | 45,63 ± 15,77 | 43,50 ± 12,99 | 41,67 ± 10,97 | 41,25 ± 7,76 | 41,89 ± 200 8,34 | ||||
АСТ (Ед / л) | 152,11 ± 26,94 | 181,70 ± 47,22 | 162,70 ± 30,79 | 153,17 ± 40,59 | 166,13 ± 57,35 | 164,60 ± 63,55 | ± 57,35164,60 ± 63,55 | ± 43,0225 ± 37,21 | 160,89 ± 28,94 | 133,71 ± 50,51 | |||
АЛБ (г / л) | 37,39 ± 2,65 | 37,38 ± 2,64 | 35,00 ± 2,12 | 35,07 ± 1,73 | 28,65 ± 2,47 | 28,19 ± 2,81 | 29,20 ± 0,82 | 29,29 ± 2,82 | 29,53 ± 1,45 | ||||
TP (г / л) | 75,11 ± 7,46 | 200 78,33 ± 5,10 ± 6.07 | 76,50 ± 4,97 | 74,50 ± 3,51 | 63,00 ± 4,55 | 64,11 ± 4,70 | 61,75 ± 3,86 | 69,44 ± 5,81 * | 67,43 ± 2,57 | ||||
BUN (ммоль / л) | 6,76 ± 1,55 | 6,41 ± 1,35 | 6,64 ± 1,59 | 6,08 ± 2,15 | 6,21 ± 0,72 | 6,05 ± 1,46 | 7,01 ± 4,80 | 5,08 ± 0,83 | 4,83 ± 0,87 | 7 | |||
CR (мкмоль / л) | 67.22 ± 5,14 | 71,10 ± 5,32 | 66,90 ± 5,02 | 72,00 ± 5,34 | 71,25 ± 5,50 | 56,90 ± 6,45 | 58,43 ± 4,12 | 53,25 ± 2,63 | 61,10 ± 4,62 | 61,3019 ± 3,01 | |||
TCHOL (ммоль / л) | 2,61 ± 0,58 | 2,49 ± 0,42 | 2,48 ± 0,35 | 2,79 ± 0,37 | 2,48 ± 0,45 | 4,02 ± 1,32 | 3,49 ± 0,76 | 2,99 * | 2.98 ± 0,58 * | 3,08 ± 0,73 * | |||
ТГ (ммоль / л) | 4,33 ± 1,37 | 3,63 ± 0,88 | 2,48 ± 1,11 * | 2,96 ± 1,34 * | 3,42 ± 1,24 | 3,99 ± 2,07 | 2,67 ± 0,85 * | 2,21 ± 0,86 * | 2,31 ± 1,02 * | 2,35 ± 0,87 * | |||
GLU (ммоль / л) | 5,27 ± 0,46 | 5,06 ± 1,09 | 4,73 ± 0,82 | 5,58 ± 0.43 | 4,94 ± 1,15 | 4,82 ± 0,65 | 4,63 ± 0,93 | 5,18 ± 0,57 | 5,53 ± 0,69 | 5,37 ± 0,93 |
Таблица 4
Относительный вес органов крыс SD, получавших морской коллаген препарат пептидов (МСР) в течение 24 месяцев.
Пол | MCP (%) | n | Мозг (г / 100 г · мт) | Сердце (г / 100 г · мт) | Легкие (г / 100 г · мт) | Печень (г / 100 г · мт) | Селезенка (г / 100 г · мт) | Почки (г / 100 г · мт) | Надпочечники (г / 100 г · мт) | Яичники (г / 100 г · вес.433 ± 0,195 a | 0,320 ± 0,070 | 0,354 ± 0,066 | 2,808 ± 0,819 | 0,196 ± 0,232 | 0,665 ± 0,182 | 0,034 ± 0,012 | 0,020 ± 0,010 | ||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
0,450 ± 0,157 | 0,404 ± 0,096 | 0,367 ± 0,139 | 2,638 ± 0,880 | 0,114 ± 0,059 | 0,606 ± 0,276 | 0,030 ± 0,018 | 0,026 ± 0,010 | ||||||||||||||||
11 | 0,519 ± 0,275 | 0,381 ± 0,118 | 0,351 ± 0,110 | 2,387 ± 0,609 | 0,115 ± 0,046 | 0,629 ± 0,253 | 0,025 ± 0,006 | 0,019 ± 0,008 | 9 | 12 | 0,494 ± 0,240 | 0,430 ± 0,035 | 0,412 ± 0,094 | 2,573 ± 0,459 | 0,111 ± 0,016 | 0,734 ± 0,290 | 0,032 ± 0,007 | 0,026 ± 0.002 | |||||
18 | 12 | 0,416 ± 0,099 | 0,350 ± 0,071 | 0,348 ± 0,094 | 2,423 ± 0,849 | 0,155 ± 0,093 | 0,659 ± 0,177 | 0,031 ± 0,007 | 0,031 ± 0,007 0,016 | ||||||||||||||
Мужской | 0 | 9 | 0,281 ± 0,082 | 0,410 ± 0,059 | 0,391 ± 0,123 | 3,218 ± 1,216 | 0,129 ± 0,037 | 0.726 ± 0,214 | 0,022 ± 0,009 | 0,276 ± 0,067 | |||||||||||||
2,25 | 13 | 0,318 ± 0,046 | 0,433 ± 0,099 | 0,441 ± 0,079 | 2,761 ± 0,850 | 0,770 ± 0,246 | 0,016 ± 0,011 | 0,384 ± 0,110 | |||||||||||||||
4,5 | 13 | 0,369 ± 0,150 | 0,471 ± 0,079 | 0,425 ± 0,028 | 2.468 ± 0,727 | 0,135 ± 0,087 | 0,637 ± 0,162 | 0,017 ± 0,013 | 0,397 ± 0,135 | ||||||||||||||
9 | 14 | 0,338 ± 0,099 | 0,490 ± 0,110 | 0,406 | 0,490 ± 0,110 | 0,406 2,870 ± 0,877 | 0,118 ± 0,072 | 0,762 ± 0,431 | 0,019 ± 0,008 | 0,380 ± 0,090 | |||||||||||||
18 | 12 | 0,382 ± 0,133 | 0,465 ± 0.088 | 0,412 ± 0,090 | 3,199 ± 0,642 | 0,151 ± 0,052 | 0,833 ± 0,275 | 0,015 ± 0,004 | 0,301 ± 0,098 |
Таблица 5
Неопухолевые поражения с препаратом пептидов морского коллагена (MCP) в течение 24 месяцев.
Участки | Поражения | Женский MCP (%) | Мужской MCP (%) | |||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
0 | 2,25 | 4.5 | 9 | 18 | 0 | 2,25 | 4,5 | 9 | 18 | |||||||||||||
( n = 20) | ( n = 20) 902 201 | 901 )( n = 20) | ( n = 20) | ( n = 20) | ( n = 20) | ( n = 20) | ( n = 20) | ( n = 20) | ||||||||||||||
Мозг | Сжатие | 2:00 AM | 2 | 2 | 1 | 1 | 2 | 1 | 1 | 1 | 2 | 2 | ||||||||||
Гипофиз | Гиперплазия дистальной части | 4 | 3 | 2 | 2 | 3 | 4 | 3 | 2 | 2 | 2 | |||||||||||
Щитовидная железа | Cc Гиперплазия эл. | 2 | 3 | 4 | 3 | 2 | 2 | 3 | ||||||||||||||
Фокальный миокардит | 2 | 0 | 1 | 0 | 1 | 1 | 0 | 1 | 1 | 0 | 0 | |||||||||||
Легкое | Очаги воспалительных клеток | 4 | 2 | 2 | 1 | 2 | 3 | 2 | 2 | 2 | 2 | 2 | 2 | |||||||||
Эмфизема | 5 | 3 | 3 | 3 | 2 | 5 | 3 | 2 | 2 90 200 | 3 | ||||||||||||
Печень | Вакуоляция гепатоцитов | 8 | 5 | 3 | 4 | 5 | 7 | 3 | 2 | 2 | 4 | Fibrosis | 1 | 1 | 0 | 2 | 1 | 1 | 0 | 1 | 2 | 0 |
Желудок | Кишечная метаплазия | 1 | 1 | 0 | 1 | 0 | 1 | 0 | 0 | 1 | ||||||||||||
Кишечник | Дивертикул | 0 | 1 | 0 | 1 9019 | 1 | 0 | 0 | 0 | |||||||||||||
Селезенка | Повышение экстрамедуллярного кроветворения | 2 | 0 | 1902 00 | 1 | 0 | 1 | 0 | 1 | 0 | 0 | |||||||||||
Почка | Фиброз | 2 | 1 | 0 | 1 | 1 0 | 1 | 2 | 1 | 0 | 1 | |||||||||||
Очаги воспалительных клеток, клубочковые | 7 | 6 | 6 | 5 | 4 | 4 | 3200 | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 | ||||||||||
Очаги воспалительных клеток, таз | 1 | 0 | 0 | 1 | 1 | 0 | 1 | 0 | 0 | 1 | ||||||||||||
2 | 2 | 0 | 0 | 1 | 2 | 1 | 1 | 0 | 1 | |||||||||||||
Гиперплазия мозгового вещества | 2 | 0 | 1 | 2 | 1 | 2 | 1 | 0 | 2 | 2 | ||||||||||||
Гиперплазия мочевого пузыря | 9 | 0 | 0 | 1 | 1 | 1 | 2 | 0 | 1 | 0 | ||||||||||||
Молочная железа | Гиперплазия | 6 9019 | 4 | 3 | ||||||||||||||||||
Поджелудочная железа | Атрофия островковой клетки | 6 | 5 | 4 | 4 | 3 | 5 | 6 | 4 44 | |||||||||||||
Гиперплазия, островковая клетка | 0 | 1 | 0 | 1 | 1 9020 0 | 0 | 0 | 1 | 1 | 0 | ||||||||||||
Матка | Метаплазия плоскоклеточная | 6 | 5 | 4 | 3 | 4 | ||||||||||||||||
Гиперплазия, эндометрий, | 10 | 8 | 7 | 9 | 7 | |||||||||||||||||
9019 9019 | 3 | 2 | 1 | |||||||||||||||||||
Варгина | Киста подслизистая | 1 | 0 | 1 | 1 | |||||||||||||||||
Яички | Атрофия яичек | 6 | 5 | 5 | 6 | 4 | ||||||||||||||||
Предстательная железа | Вступление | 1 | 1 | 0 | 1 |
3.Обсуждение
Обладая различными биоактивными свойствами, препарат пептидов морского коллагена (MCP) становится все более популярным в качестве пищевой добавки. Это долгосрочное исследование кормления MCP на крысах S-D направлено на получение данных оценки безопасности. Насколько нам известно, это первое исследование по оценке хронической токсичности препарата биоактивных пептидов коллагена из кожи кеты ( O. keta ) на крысах S-D.
Показатели выживаемости в контрольной группе обоих полов соответствовали показателям, о которых сообщалось в предыдущих 24-месячных исследованиях кормления на крысах S-D [14]; это подтверждает адекватность наших экспериментальных условий.В настоящем исследовании средняя масса тела и потребление пищи в течение 24 месяцев исследования не зависели от приема МСР, что соответствовало четырехнедельному исследованию пептидов коллагена из кожи свиньи Ву [15]. Кроме того, в предыдущем сообщении предполагалось, что комбинированные препараты, содержащие желатин, обладают побочными эффектами, включая ощущение неприятного вкуса, периодический изжогенность и отрыжку [16]. В то время как данные о массе тела, потреблении пищи и эффективности питания в нашем исследовании показали, что диета с добавлением MCP из кожи кеты может не иметь значительного влияния на пищевой аппетит и / или абсорбцию у крыс.
По данным биохимии сыворотки или гистопатологического исследования печени не было выявлено хронических побочных эффектов или токсичности органов-мишеней для печени. Более того, нет предшествующих сообщений о гепатотоксичности, вызванной пероральным введением пептидов коллагена пищевого происхождения. Что касается профиля токсичности пептидов коллагена для почек, пептиды коллагена, полученные из кожи свиньи, в дозе 16,6 г / кг · м.т. / день, как сообщалось, вызывают гипертрофию почек у растущих крыс [15]. Однако это исследование имело методологические недостатки, которые вызывают сомнения относительно вывода.Во-первых, только шесть крыс-самцов / группа были выделены для 4-недельного воздействия в этом исследовании, что, согласно последним рекомендациям FDA, было менее оптимальным. Во-вторых, введение пептидов коллагена в дозе 16,6 г / кг · м.т. / день увеличивало содержание белка в рационе до 34%. Как известно, высокое содержание белка может вызывать рост почек за счет индукции инсулиноподобного фактора роста-I [17]. Таким образом, этот неблагоприятный эффект может быть связан с высоким содержанием белка в рационе. В нашем настоящем исследовании количество сырого протеина в рационе групп, получавших МСР, было уменьшено на 2.25%, 4,5%, 9% и 18% соответственно для поддержания постоянного уровня белка в рационе. Таким образом, на основании данных биохимических параметров сыворотки, включая азот мочевины крови (АМК) и креатинин (CR), а также анализа мочи в группах, получавших МСР, в течение всего экспериментального периода не было выявлено клинического неблагоприятного воздействия на функцию почек. Короче говоря, MCP из кожи кеты до максимальной дозы 18% в рационе в долгосрочном диетическом исследовании, по-видимому, не токсичен для печени и почек.
На протяжении всего эксперимента наблюдалась возрастная тенденция к увеличению уровней триглицеридов (ТГ) и общего холестерина (ТХОЛ) в сыворотке крови в контрольной группе и группах, получавших МСР, что соответствовало другим сообщениям [18].В исследовании Wergedahl было обнаружено, что гидролизат рыбьего белка, полученный из костных рамок лосося, снижает уровень общего холестерина в плазме и увеличивает долю холестерина ЛПВП у крыс Zucker (fa / fa) с генетическим ожирением [19]. Следует отметить, что частота вакуолизации гепатоцитов в группах, получавших МСР, была снижена по сравнению с контрольной группой. Микроскопически «жировые изменения» или стеатоз гепатоцитов морфологически совместим с цитоплазматической вакуолизацией гепатоцитов, повреждением клеток, вызванным липотоксичностью чрезмерного накопления нейтральных липидов в гепатоцитах [20,21].Wergedahl et al. обнаружил, что крысы, получавшие гидролизат белка лосося, имели более низкое содержание липидов в печени, чем крысы, получавшие казеин, поскольку первые, скорее всего, имели более высокую секрецию из печени липопротеинов, богатых триацилглицерином [19]. Более того, исследование Масатаки показало, что пептид коллагена кеты или радужной форели может влиять на абсорбцию липидов и метаболизм у крыс и может быть полезен для подавления кратковременного повышения уровня триглицеридов в плазме [22]. Из-за отсутствия значительной дозовой зависимости гиперлипидемический потенциал MCP в нашем исследовании все еще требует подтверждения в дальнейших исследованиях.Эти результаты сывороточного TCHOL и TG, однако, позволяют предположить, что длительное введение MCP не оказывает неблагоприятного воздействия на абсорбцию и метаболизм липидов.
4. Экспериментальная часть
4.1. Приготовление и процедура идентификации исследуемого вещества
Препарат морских пептидов коллагена (MCP), предоставленный CF Haishi Biotechnology Ltd. Co. (Пекин, Китай), был приготовлен из кожи выловленного в дикой природе лосося кета ( O. keta ) (из Восточно-Китайское море, средняя масса тела, 1.47 кг). Процедура приготовления и идентификации МКП проводилась по методике, описанной в нашем предыдущем исследовании [23]. Вкратце, кожу рыбы очищали, снимали чешую, разрезали на мелкие кусочки, обезжиривали и гомогенизировали. После гомогенизации и эмульгирования в дистиллированной воде материал ферментативно гидролизовали комплексной протеазой (3000 Ед / г белка), которая включает 7% трипсина, 65% папаина и 28% щелочной протеиназы, при 40 ° C и pH 8. за 3 ч. Полученный гидролизат повторно экстрагировали центрифугированием и затем разделяли через керамическую мембрану (200 мкм).После очистки с помощью процедуры нанофильтрации, конденсации путем криоконцентрирования в вакууме, обесцвечивания активированным углем, фильтрации и сушки распылением был получен порошок МСР, используемый в следующих исследованиях.
4.2. Характеристика MCP
Образец MCP содержит около 90% гидролизованного белка, 6,0% золы, 1,4% углеводов, 2,5% воды и 0,1% жира. Затем молекулярно-массовое распределение образцов было проанализировано с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (HPLC, Waters Corp., Милфорд, Массачусетс, США) и определено методом времяпролетной масс-спектрометрии с лазерной десорбцией и ионизацией на основе матрицы LDI-1700 (MALDI-TOF-MS) (Liner Scientific Inc., Рино, штат Невада, США). анализировали с помощью аминокислотного анализатора (H835-50; Hitachi, Tokyo, Japan). Кроме того, аминокислотный состав дополнительно анализировали с помощью автоматического аминокислотного анализатора H835-50 (Hitachi, Токио, Япония). Анализ MCP показал 86,5% молекулярных масс, распределенных между 130 и 1000 Да.Результаты аминокислотного состава показывают, что MCP богат глицином> глутаминовой кислотой> пролином> гидроксипролином> аспарагиновой кислотой> аланином> аргинином.
Таблица 6
Аминокислотный состав препарата пептидов морского коллагена из кожи кеты.
Аминокислота | Кол-во остатков / 100 остатков | ||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
Глицин | 23,77 | ||||||||
Глутаминовая кислота | 12.22 | ||||||||
Пролин | 9,79 | ||||||||
Гидроксипролин | 7,51 | ||||||||
Аспарагиновая кислота | 7,29 | ||||||||
Аланин | 6,59 | 6,59 | 6,59 | ||||||
Лейцин | 4,64 | ||||||||
Серин | 4,23 | ||||||||
Валин | 2,94 | ||||||||
Изолейцин | 2.57 | ||||||||
Треонин | 2,53 | ||||||||
Фенилаланин | 2,51 | ||||||||
Гистидин | 1,61 | ||||||||
Метионин | 0,03 | 0,03 | 0,03 | Экспериментальные животные и условия содержания
Добавить комментарий