Лактотропный гормон: Лактотропный гормон (пролактин, лютеотропный гормон). «БИОЛОГИЧЕСКАЯ ХИМИЯ», Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф.

Гормон пролактин (лактотропный гормон) | Москва

Пролактин (лактотропный гормон) — это гормон, который воздействует на ткани молочных желез

Стимулирует и поддерживает выработку молока в молочных железах, регулирует менструальный цикл. Во время беременности повышается содержание эстрогенов, стимулирующих выработку пролактина. Стимулирует синтез белка, жиров и углеводов, образования желтого тела и выработку прогестерона. Влияет на водно-солевой обмен, усиливает эффекты альдостерона и вазопрессина.

Пролактин синтезируется в передней доли гипофиза. Вырабатывается во сне и после пробуждения. Также участвует в формировании иммунного ответа.

Анализ крови на пролактин назначается при подозрении и первичной диагностики пролактиномы. Аденома гипофиза – наиболее частая причина высокого уровня ПРЛ в крови. Аденомы гипофиза гормонально активные:

• пролактинома (продукция пролактина),
• соматотропинома (продукция СТГ. проявляется симптомами гигантизма и акромегалией),
• кортикотропинома (продукция АКТГ, при болезни Иценко-Кушинга),
• тиреотропинома (продукция ТТГ, развитием гипотиреоза),
• гонадотропинома (продукция ФСГ, ЛГ).

Причины развития аденомы гипофиза

Перенесенные инфекционные заболевания головного мозга, внутриутробные аномалии развития плода, последствия черепно-мозговых травм. В зависимости от размеров: микропролактинома (менее 1 см) и макропролактинома (более 1 см).

Чаще всего аденома гипофиза диагностируется у женщин в возрасте 30-40 лет.

Симптомы гиперпролактинемии

У женщин:

• развитие бесплодия, в связи с отсутствием овуляции, невынашивания беременности,
• нарушение менструального цикла, олиго и аменореи,
• дисфункциональные маточные кровотечения,
• снижение либидо,
• галакторея — выделение жидкости (молозива) из молочных желез.
  Встречается в 80%случаев.

При макропролактиноме отмечается появление головных болей, нарушение зрительных функций (снижение остроты зрения, двоение в глазах), внутричерепная гипертензия.

Неврологические нарушения: нарушение сна, снижение памяти, головокружения, также рост волос на лице, выпадение волос.

Гиперпролактинемия в кровотоке снижает пролиферацию (рост и деление клеток), индуцирует апоптоз кератиноцитов волосяной луковицы. Это приводит к снижению роста волос. Помимо прямого действия на фолликул, пролактин оказывает опосредованное влияние на волосы, так как происходит повышение уровня андрогенов к коре надпочечников. Таким образом, гиперпролактинемия может приводить к диффузному телогенному выпадению волос.

У мужчин:

• геникомастия (увеличение молочных желез),
• снижение уровня тестостерона,
• сексуальные расстройства,
• снижение образования сперматозоидов,
• снижение либидо,
• эректильная дисфункция,
• также приводит к развитию бесплодия.

Гиперпролактинемия также может быть при многих других эндокринных заболеваниях: заболевания щитовидной железы(гипотиреоз), синдромом поликистозных яичников, гипогонадизмом, недостаточностью коры надпочечников (гипокортицизм), врожденной гиперплазией коры надпочечников, заболевания гипоталамуса (краниофарингиомы, глиомы, метастатические поражения и аномальное развитие сосудов), эстрогенпродуцирующие опухоли яичников.

При гиперпролактинемии снижается уровень андрогенов, изменяется уровень женских половых гормонов. В связи с повышенность хрупкостью костей развивается остеопения и остеопороз. Также гиперпролактинемия может быть при системных заболеваниях, при поражении гипоталамо-гипофизарной области: туберкулезе, бактериальных абсцессах, саркоидозе, ХПН. Гиперпролактинемия в ряде случаев является составной частью синдрома МЭН-1.

При сочетании недостаточности диафрагмы турецкого седла с повышением давления ликвора в желудочках мозга развивается синдром «пустого» турецкого седла. При этом синдроме содержание пролактина часто повышается.

Функциональные причины, не требующие лечения:

• сон,
• физические нагрузки,
• курение,
• прием белковой пищи,
• стрессы,
• половой акт женщины,
• послеродовой период,
• кормление грудью.

Гиперпролактинемия наблюдается при приеме большого ряда фармакологических препаратов (таких как блокаторов дофамина, нейролептики, антидепрессанты, блокаторы кальциевых каналов, оральные эстрогенсодержащие контрацептивы, опиаты)

Психогенная гиперпролактинемия наблюдается в ряде случаев психо-неврологических расстройств органического и функционального генеза.

Гиперпролактинемия замедляет метаболизм и усиливает аппетит, что приводит к избыточной массе тела или ожирению (50% случаев). Нарушается углеводный и жировой обмен. Повышение активности В-клеток поджелудочной железы приводит к нарушению метаболизма глюкозы и развитию инсулинорезистентности, что ведет к развитию метаболического синдрома.

Нормализация уровня пролактина ведет к снижению массы тела. Снижение веса на 4-8 кг у 50-70% спустя 6-18 месяцев лечения пролактином. Основа лечения ожирения — медикаментозная терапия, направленная на нормализацию уровня пролактина, а также — формирование принципов рационального питания.

Исследование пролактина во время беременности не информативно, так как в организме женщины повышено содержание эстрогена, происходит стимуляция пролактина, его уровень повышается в несколько раз что является абсолютной нормой.

Проведение исследования

Анализ крови на пролактин проводится строго натощак утром, на 3 -5 день менструального цикла, за 2 дня до исследования исключить стрессовые ситуации , физические нагрузки, за 2 часа до сдачи анализа не курить.

При лабораторной диагностике гиперпролактинемии проводится исследование на мономерный пролактин, макропролактин (Big-big пролактин), соматотропин, ТТГ, тироксин, кортизол, женских половых гормонов (ЛГ, ФСГ, эстрадиола, прогестерона, дегидроэпиандростерона), также андрогенов (общего тестостерона). При макропролактиномах — уровень АКТГ, ИФР-1.

Так как гиперпролактинемия сопровождается ожирением — определение инсулина, С-пептида. Также тест на беременность.

При топической диагностике: рентгенография черепа в 2-х проекциях или КТ (с контрастированием) или МРТ гипоталамо-гипофизарной области, УЗИ органов малого таза и молочных желез, исследование полей зрения.

Лечение

Лечение гиперпролактинемии зависит от причин, вызвавших повышение уровня пролактина. Лечение заболеваний эндокринной системы приводит к нормализации гормонального статуса и снижению пролактина.

Медикаментозное лечение

При лечении пролактиномы гипофиза для подавления уровня пролактина назначается агонисты дофаминовых рецепторов: Препарат 1 поколения — бромокриптин 1.25 мг 1-3 раза в день во время еды. Максимальная суточная доза — 10-12.5 мг.

При лечении бесплодия — овуляция наступает на 4-8 неделе беременности. При микроаденоме — лечение не менее 12 месяцев.

При отмене препарата — ремиссия длительностью более года наступает у 12% больных с микро- и 17% с макропролактиномами.

Препарат 2 поколения: квинаголид — однократно принимается, ежедневно.

Препарат 3 поколения: достинекс (каберголин) 0.25 мг 2 раза в неделю (при микроаденомах).

Контроль уровня пролактина через 2-4 недели при подборе дозировки, далее каждые 3-6 месяцев.

При отмене препарата, достинекс выводится 3-4 месяца. Контроль уровня пролактина через 6 месяцев. 1 мг 2 раза в неделю (при лечении макроаденомы). Лечение не менее 12 месяцев. Достинекс эффективно восстанавливает фертильность у женщин с гиперпролактинемией: у 72% больных при приеме в течение 24 недель восстанавливается овуляция и наступает беременность, при продолжительности терапии до 40 недель — у 90%. Препарат вызывает регрессию аденомы гипофиза, уменьшение размеров аденомы через год после непрерывной терапии. А в некоторых случаях — до полного исчезновения.

Контроль МРТ ежегодно.

Также применяется лучевая терапия — разрушение аденомы гипофиза ионизирующим излучением. Показана при наличии макроаденом гипофиза, при неэффективности медикаментозной терапии.

Хирургическое лечение

Удаление макроаденомы гипофиза (трансназально, трансфеноидально, транскраниально) показано при неэффективности медикаментозного лечения и нарушения функции зрения.

Эффективность лечения при макроаденомах — 50-60%. При микроаденомах -70 -90%.

Идиопатическая гиперпролактинемия: при отсутствии клинической симптоматики и умеренном повышении неактивных форм пролактина, без патологии ГМ (гипофиза) не требует лечения.

Лечение соматотропиноты

— медикоментозно. Аналоги соматостатина (октреатид), а также применяется лучевая терапия.

Лечение кортикоторопиномы — нормализация уровня гормонов коры надпочечников. Также симптоматическое лечение для коррекции нарушений белкового и углеводного обмена. Лучевая терапия используется как дополнение к оперативному лечению.

Лечение тиреотропиномы — удаление опухоли.

Эффективность лечения микроаденом гипофиза при своевременной диагностике заболевания — высокая. Макроаденомы — имеют тенденцию к росту, требуется мониторирование эффективности проводимого лечения.

Сдать анализ на пролактин — цены в Санкт-Петербурге в Инвитро

Метод определения Твёрдофазный хемилюминесцентный иммуноанализ.

Исследуемый материал Сыворотка крови

Синонимы: лактотропный гормон, лактогенный гормон, маммотропин, физолактин. Prolactin, PRL.

Краткая характеристика определяемого вещества Пролактин

Полипептидный гормон, стимулирующий пролиферацию молочной железы и секрецию молока. Пролактин вырабатывается в передней доле гипофиза, небольшое количество синтезируется периферическими тканями. При беременности вырабатывается также в эндометрии. Во время беременности пролактин поддерживает существование жёлтого тела и выработку прогестерона, стимулирует рост и развитие молочных желёз и образование молока. Это один из гормонов, способствующих формированию полового поведения. Пролактин регулирует водно-солевой обмен, задерживая выделение воды и натрия почками, стимулирует всасывание кальция. В целом пролактин активирует анаболические процессы в организме. Среди других эффектов можно отметить стимуляцию роста волос. Пролактин оказывает также модулирующее воздействие на иммунную систему.

С какой целью определяют уровень Пролактина в крови

Гипофизарный гормон, участвующий в регуляции функции молочных желез и лактации. Тест используется в диагностике гипоталамо-гипофизарных расстройств и нарушений репродуктивной функции.

Что может повлиять на результат теста «Пролактин» и дополнительные варианты применения

Суточная секреция пролактина имеет пульсирующий характер. Во время сна его уровень растет. После пробуждения концентрация пролактина резко уменьшается, достигая минимума в поздние утренние часы. После полудня уровень гормона нарастает. В отсутствие стресса, суточные колебания уровня находятся в пределах нормальных значений. Во время менструального цикла в лютеиновую фазу уровень пролактина выше, чем в фолликулиновую. С 8-й недели беременности уровень пролактина повышается, достигая пика к 20-25 неделе, затем снижается непосредственно перед родами и вновь увеличивается в период лактации.

Внимание! Тест на присутствие макропролактина проводится в качестве дополнительного исследования к определению пролактина при выявлении повышенного уровня пролактина (по соответствующим рекомендациям – для всех пациентов с результатом пролактина > 700 мЕд/л). Пролактин может присутствовать в крови в разных молекулярных формах. Макропролактин – это пролактин, связанный в иммунные комплексы с антителами, присутствующий в крови в варьирующих количествах. Он выводится из крови медленней, чем мономерный пролактин и может накапливаться в высокой концентрации. Эта форма пролактина обладает меньшей биоактивностью, пациенты с высоким содержанием макропролактина могут не иметь классических симптомов, характерных для повышения концентрации пролактина. Результаты данного исследования следует учитывать при трактовке повышенных значений показателя пролактина, расхождении результатов исследования с общей клинической картиной, отсутствии воспроизводимости при проведении исследований в разных лабораториях. Обращаем внимание на то, что выполнение исследования на макропролактин не увеличивает стоимость определения пролактина. Выявление возможного значимого присутствия макропролактина в пробах гиперпролактинемических пациентов необходимо для исключения диагностических ошибок, необходимости назначения ненужных биохимических и рентгенологических исследований, а также предотвращения неадекватной лекарственной терапии или хирургического вмешательства.

Пределы определения: 12,6 — 172200 мЕд/л.

https://personamedufa.ru/

Пролактин — это лактотропный гормон, вырабатываемый передней долей гипофиза.

Его баланс в организме очень важен как для женщин, так и для мужчин.

Роль пролактина в организме:

• Влияет на иммунную и репродуктивную системы, регулярность менструального цикла и овуляции, а также на либидо и потенцию
• Участвует в обеспечении водно-электролитного баланса
• Взаимодействует с гормонами периферических эндокринных желез
• Обеспечивает нормальное развитие молочных желез и образование молока при ГВ

⠀

Повышенный уровень пролактина нарушает вышеуказанные процессы, приводя к разнообразным патологиям: ожирение, бесплодие, задержка полового развития и тяжелое протекание климакса, боли в груди, патологии гипофиза и т.д.

Традиционно высокие концентрации пролактина наблюдаются у беременных и кормящих женщин, но в данном случае это норма.

Природа так обеспечивает возможность выкормить малыша грудным молоком, и, кроме того, высокий пролактин является естественным «контрацептивом», правда, без 100% гарантии. Мы не рекомендуем этому «средству» доверять

И, к слову, именно гиперпролактинемией объясняется такая частая проблема кормящих, как поредение волос. Обычно «волосопад» заканчивается вместе с окончанием ГВ и возвращением пролактина в «небеременную» норму.

Также высокий пролактин может стать «кнопкой», запускающей механизмы появления «сосудистых звездочек», гирсутизма (излишний рост волос), себореи и акне.

В сдаче анализа на определение концентрации пролактина есть свои хитрости, рассказать?

Напишите в комментариях, какие еще гормоны вам интересны.

Почти 9 из 10 женщин сталкивается с инфекцией ВПЧ

Вирус папилломы человека сегодня обсуждаем. Поделитесь этим постом с подругами.

ВПЧ поражает клетки эпителия, в результате образуются папилломы – сосочковые разрастания, выступающие над поверхностью кожи. Есть более 100 типов ВПЧ, опасных для мужчин и для женщин и вызывающих возникновение папиллом в разных областях тела на коже и слизистых оболочках. Часто это эстетический дефект, но, например, папилломы гортани могут привести к охриплости голоса, нарушению дыхания, а папиллома мочеточника – к нарушению оттока мочи из-за его сужения.

ВПЧ может сидеть в организме годами, ничем себя не выдавая, а потом бац – и получаем заболевания половых органов, от папиллом в лучшем случае до рака шейки матки.

В нашей стране от него каждый день умирают 17 женщин. Это реально много, больше, чем в США и Европе.

Пути заражения ВПЧ: главным образом при половых контактах, любых.

⠀

По статистике, большинство типов вируса попадает в организм женщин в первые годы половой активности. У около 91% инфицированных иммунная система самостоятельно справляется с этой заразой.

Поэтому, если вдруг вам диагностировали ВПЧ, а потом оно «само прошло», не ругайте лабораторию и докторов, так может быть.

Правда, повторно заразиться тоже легко. У женщин с возрастом риск ВПЧ снижается, а у мужчин остаётся практически неизменным в течение всей жизни.

Часто ВПЧ-инфицированный мужчина является источником инфекции и способствует более высокому риску передачи вируса женщине, мы писали об этом в одном из недавних постов про вакцинацию.

⠀

С анализами на ВПЧ вообще интересно:

Молодым девушкам до 18 лет, которые уже ведут активную половую жизнь, гинекологи рекомендуют провериться на ВПЧ «высокого риска»

При этом в США, где к этому заболеванию относятся крайне серьезно, рекомендуют до 25 лет, грубо говоря, не париться – как было сказано выше, велики шансы найти вирус, который потом уйдет сам по себе.

Также анализ на ВПЧ необходим после лечения цервикальной интраэпителиальной неоплазии, предраковых состояний или рака шейки матки.

А вот анализа на ВПЧ для мужчин нет.

Зато есть профилактика от этого вируса. Делали ли вы себе вакцину от ВПЧ?

Как помочь «уставшим» надпочечникам?

Конечно, бороться нужно индивидуально с причиной, а не маскировать следствие. Это самая главная рекомендация.

Но есть также некоторые общие правила, которые помогут вашим надпочечникам, а значит и вам, чувствовать себя лучше.

⠀

• Здоровый сон. Ложитесь в 22-23, вставайте в 6-7, и вы увидите, как хорошо высыпаетесь и как много успеваете за день.
• Готовьтесь ко сну: за час до того, как отправиться в постель, выключите телевизор, отложите книгу и избавьтесь от привычки листать Инстаграм перед сном
• Давайте организму физическую нагрузку. Банальные ежедневные прогулки пешком – уже здорово, любое спортивное хобби – еще лучше Но не занимайтесь на износ.
• Меньше сахара, больше белка, которого так не хватает современному человеку. Не призываем к экстремальным мерам, но все же напомним, что сахар есть не только в десертах, но и соках, соусах, кетчупах и многих других продуктах.
• Снизить уровень стресса помогут адаптогены – знаете, что это такое? Расскажем в одном из следующих постов.

⠀

Что из перечисленного уже делаете?

Пролактин, Prolactine — анализ крови со скидкой до 50% в Lab4U

Срок исполнения

Анализ будет готов в течение 2 дней, исключая день забора. Срок может быть увеличен на 1 день в случае необходимости. Вы получите результаты на эл. почту сразу по готовности.

Срок исполнения: 2 дня, исключая субботу и воскресенье (кроме дня взятия биоматериала)

Подготовка к анализу

Заранее

Взятие крови на гормоны рекомендовано проводить в утренние часы, если другое время не указано лечащим врачом. Для проверки динамики показателя каждый раз выбирайте одинаковые интервалы сдачи анализа.

Обсудите с врачом прием лекарственных препаратов накануне и в день проведения исследования крови, а также другие дополнительные условия подготовки.

Не сдавайте анализ крови сразу после рентгенографии, флюорографии, УЗИ, физиопроцедур.

Накануне

За 24 часа до взятия крови:

• Ограничьте жирную и жареную пищу, не принимайте алкоголь.

• Исключите спортивные тренировки и эмоциональное перенапряжение.

От 8 до 14 часов до сдачи крови не принимайте пищу, пейте только чистую негазированную воду.

В день сдачи

Перед забором крови

• 60 минут не курить,
• 15-30 минут находиться в спокойном состоянии.

Информация об анализе

Показатель

Пролактин — это гормон, производимый гипофизом. Одна из самых важных функций гормона — поддержание желтого тела в яичнике, которое вырабатывает прогестерон, необходимый для успешного вынашивания. У мужчин пролактин также регулирует деятельность надпочечников и выработку андрогенов.

Назначения

В случае слишком высокого содержания пролактина в крови (гиперпролактинемия) может наблюдаться депрессия, снижение либидо, репродуктивные нарушения как у женщин, так и у мужчин.

Специалист

Назначается как в комплексе анализов на половые гормоны, так и отдельно, терапевтом, гинекологом, андрологом или эндокринологом.

Важно

Пролактин называют одним из «гормонов стресса», так как повышение его уровня наблюдается при повышенных физических и эмоциональных нагрузках. При сдаче анализа важно избегать стрессов накануне и в день сдачи анализа.

Метод исследования — Хемилюминесцентный иммунный анализ

Материал для исследования — Сыворотка крови

Состав и результаты

Пролактин

Узнайте больше о анализах на гормоны:

Женские гормоны: секрет красоты изнутри.

Медицинские анализы при избыточном весе и ожирении.

Как подготовиться к ЭКО?

Пролактин вырабатывается гипофизом. Он обеспечивает развитие молочных желез в пубертатном периоде, а после беременности отвечает за лактацию. Кроме того, одна из важных функций гормона — поддержание желтого тела в яичнике, которое вырабатывает прогестерон, необходимый для успешного вынашивания. Под влиянием пролактина формируется материнский инстинкт и привязанность. А у мужчин пролактин также регулирует деятельность надпочечников и выработку андрогенов.

В случае слишком высокого содержания пролактина в крови (гиперпролактинемия) может наблюдаться депрессия, снижение либидо, репродуктивные нарушения как у женщин, так и у мужчин. Пролактин называют одним из «гормонов стресса», так как повышение его уровня наблюдается при повышенных физических и эмоциональных нагрузках. При сдаче анализа важно, но и избегать стрессов накануне.

Пролактин (Prolactine, PRL) состоит из одной полипептидной цепи, содержащей 198 аминокислот, с тремя дисульфидными мостиками, его молекулярная масса составляет приблизительно 22, 5 кДа. Пролактин вырабатывается клетками передней доли гипофиза. Секреция пролактина регулируется гипоталамусом, в основном, через высвобождение пролактин-ингибирующего фактора (дофамина) и пролактин-рилизинг фактора (серотонина).

Тиреотропин-рилизинг-фактор (ТРФ) тоже оказывает стимулирующие влияние на секрецию пролактина и используется при провокационном тесте для оценки нарушения секреции пролактина гипофизом и резервов пролактина. Основным физиологическим действием ПРЛ является стимуляция и поддержание лактации у женщин. В норме секреция пролактина изменяется во времени, поэтому концентрация пролактина в сыворотке крови ночью при проведении анализа в 2–3 раза выше, чем днем. Период биологической полужизни пролактина приблизительно 20–50 минут. Возникает вопрос, когда сдавать анализ на пролактин? Кровь на пролактин назначают женщинам и во время менструального цикла для определения концентрации пролактина в сыворотке крови, которая может изменяться и обычно незначительно повышаться в середине цикла.

Концентрация пролактина в анализе крови у здоровых людей повышается в ответ на физиологическую стимуляцию: сон, физические упражнения, стимуляция сосков, половое сношение, гипогликемия, хирургический стресс и беременность. Пролактин, секретируемый в передней доле гипофиза, обеспечивает нормальное развитие груди и лактации у женщин. Повышение концентрации пролактина при проведении анализа крови происходит на восьмой неделе беременности и непрерывно на протяжении всей беременности продолжает повышаться.

В течение трех недель после родов, при отсутствии грудного вскармливания, концентрация пролактина возвращается к норме. Патологически высокие значения в анализе на пролактин у женщин обычно связаны с бесплодием, у мужчин с импотенцией и бесплодием, первичным гипотиреоидизмом и опухолями гипофиза. Содержание пролактина остается высоким сразу после родов, а также у новорожденных. Недостаточность пролактина у здоровых людей отмечена в редких случаях.

Гиперпролактинемию вызывают следующие патологические состояния: аденомы гипофиза, секретирующие пролактин (пролактиномы), гипотиреоидизм, функциональные и органические заболевания гипоталамуса, почечная недостаточность и эктопические опухоли. При первичном гипотиреозе анализ крови на пролактин помогает выявить повышение концентрации пролактина, которая связана с повышением выработки ТРФ (стимулирует выделение пролактина), сопровождающегося снижением концентраций T4 в сыворотке и повышением сывороточных концентраций тиреотропного гормона.

Гиперпролактинемия связана с созреванием фолликула, угнетением синтеза стероидов в яичниках, секрецией фолликулостимулирующего гормона и лютеинизирующего гормона. Показано, что некоторые препараты или повышают, или понижают концентрации пролактина.

Факторы, влияющие на результат исследования:

• повышают: циметидин, ранитидин, антипсихотические средства (нейролептики, производные фенотиазина, молиндон, локсапин, пимозин), карбидопа, эстрогены, лабеталол, метоклопрамид (внутривенное введение, долговременный пероральный прием больших доз), даназол, фуросемид, перидола;
• понижают: противосудорожные средства (карбамазепин, вальпроевая кислота, леводоп), дофаминергические средства (бромкриптин, каберголин, тергурид, ропинерол), циклоспорин А, дексаметазон, допамин, апоморфин, метоклопрамид (при пероральном приеме), морфин, нифедипин, рифампицин, секретин, бомбезин, тамоксифен, тиоксин.

Анализ крови на пролактин PRL

Пролактин — гонадотропный гормон, производится клетками передней доли гипофиза. Под действием пролактина происходит выработка молока, рост и развитие молочных желез. Пролактин подавляет секрецию ФСГ и ЛГ (вследствие этого при повышении пролактина не происходит овуляция).
Пролактин имеет важное значение при диагностике состояний, связанных с нарушением менструального цикла и/или бесплодием. Обычно назначается в комплексе с другими гормонами. Сдавать анализ крови на пролактин следует с утра, накануне и в день сдачи анализа рекомендуется избегать стрессов (в этом случае результат может быть несколько завышен).

Пролактин (PRL, Лактотропный гормон, Лактогенный гормон, маммотропин) – это гормон, продуцируемый гипофизом. В женском организме выполняет большое количество важных функций. Лактотропный гормон необходим для нормализации менструального цикла, развития молочных желез, активизации процесса лактации. Он контролирует выработку фолликулостимулирующего гормона и прогестерона. Этот гормон вырабатывается в больших количествах во время беременности. В мужском организме и у небеременных женщин его концентрация в норме невысокая.

Общие сведения

Лактогенный гормон синтезируется в большом количестве во время беременности и в послеродовой период. Вместе с эстрогеном и прогестероном он стимулирует выработку грудного молока. После прекращения кормления грудью уровень Prolactin снижается. В период кормления активность выработки гормона напрямую зависит от интенсивности, с которой ребенок сосет грудь.

При наличии опухолей гипофиза (пролактином) маммотропин также может синтезироваться в больших количествах. Такие новообразования диагностируются редко, в большинстве случаев они доброкачественные. Пролактиномы чаще встречаются у женщин, но такая опухоль может появиться и у мужчины. Она проявляется такими симптомами, как галакторея, ухудшение зрения, сильные головные боли непонятного происхождения. Такая клиническая картина обусловлена излишним давлением на зрительный нерв новообразованием на гипофизе. При наличии пролактиномы также может наблюдаться нарушение синтеза других гормонов. Последствием таких опухолей становится женское бесплодие и частичная потеря половой функции у мужчин. При своевременно поставленном диагнозе и адекватном лечении прогноз в большинстве случаев благоприятный.

Сколько стоит анализ на пролактин?

Организм человека – тонкая, чувствительная и очень сложная система, в которой одно не существует без другого, все тесно взаимосвязано и переплетено.

Здесь железами внутренней секреции вырабатывается огромное количество различных гормонов, многие из которых влияют на слаженное функционирование репродуктивной системы.

Очень часто, при тех или иных сбоях в сфере полового здоровья врачи назначают своим пациентам исследование на пролактин. Что же это за такой важный гормон и какова его роль в организме человека?

Пролактин, лактогенный, лактотропный гормон или маммотропин оказывает большое влияние на регулирование половой системы, функции деторождения и лактации в послеродовом периоде.

У девочек в подростковом возрасте пролактин стимулирует правильное развитие и рост молочных желез, у недавно родивших женщин гормон способствует приходу молока. 

Влияние пролактина на мужской организм еще не раскрыто медиками в полной мере, однако, небольшое его количество содержится в мужской простате и изменение этой концентрации может повлечь за собой различные патологии:

— частые мигрени;

— ухудшение зрения;

— набухание молочных желез;

— половую дисфункцию;

— выделение из сосков молозива (иначе, галакторея).

Исследование на пролактин для женщин не менее важно, так как слишком много основополагающих функций организма регулируется этим гормоном. При малейших отклонениях от здоровья молодым девушкам желательно сразу обратиться к врачу и пройти все назначенные исследования. Такая забота о своем организме гарантирует Вам беременность и роды без осложнений, вскармливание младенца грудным молоком, здоровое потомство и хорошее настроение!

Чаще всего анализ на пролактин назначается врачами гинекологами, маммологами, терапевтами, эндокринологами. Результат исследования позволит точно установить, является ли переизбыток или нехватка данного гормона причиной тех или иных осложнений со здоровьем.

Правильная подготовка к сдаче венозной крови является ключевой  в исследовании. Ведь именно оттого, насколько точно выполнены требуемые рекомендации, будет зависеть результат. Не зря пролактин называют «гормоном стресса» — плохое настроение, психологическое напряжение, недосып, чувство тревоги способны существенно изменить его концентрацию.  Анализ лучше сдавать натощак, в утреннее время, с вечера избегать курения, алкоголя,  соленой, жирной и острой пищи.

Сколько стоит анализ на пролактин?

Подробнее о стоимости услуг Вы сможете узнать на сайте Центра молекулярной диагностики CMD www.cmd-online.ru. Здесь представлено множество полезной и актуальной информации об анализах на гормоны, их стоимости и сроках выполнения. К тому же, Вы всегда будете в курсе наших новостей и акций, призванных создавать максимально приятные и выгодные для наших клиентов условия!

Нашли опечатку в тексте? Выделите её и нажмите ctrl+enter

Половые гормоны (исследования репродуктивной функции)

Исследование уровня глобулина, связывающего половые гормоны, в крови

Код услуги: А09. 05.160

670 ₽

Белок плазмы крови, участвующий в связывании и транспорте половых гормонов.

гспг глобулин половые гормоны

Исследование уровня андростендиона в крови

Код услуги: А09.05.146

Исследование используют преимущественно в диагностике гиперандрогенных состояний.

половые гормоны андростендион

Исследование уровня хорионического гонадотропина в крови

Код услуги: А09.05.090

690 ₽

Определение уровня хорионического гонадотропина в крови при таких же показаниях, что и определение уровня бета хорионического гонадотропина в крови.

половые гормоны

Исследование уровня антимюллерова гормона в крови

Код услуги: А09.05.225

1 270 ₽

Маркер овариального резерва у женщин репродуктивного периода. Маркер тестикулярной функции в препубертате у мужчин.

Антимюллеров гормон АМГ AMH половые гормоны

Исследование уровня дигидротестостерона в крови

Код услуги: А09.05.150

1 270 ₽

ДГТ используют в диагностике нарушений полового развития, вызванных врожденным дефицитом фермента 5-альфа-редуктазы, в оценке андрогенного статуса организма, в комплексе исследований при гирсутизме. Также данное исследование применяют в терапевтическом мониторинге лечения ингибиторами 5-альфа-редуктазы.

дигидротестостерон дгт dht половые гормоны

Исследование уровня В — хорионического гонадотропина в крови

Код услуги: А09.05.090.001

Исследование проводят при ранней диагностике беременности, при проведении пренатального скрининга с целью выявления риска аномалий развития плода (в комплексе с тестами на альфа-фетопротеин и свободным эстриол на 15-20-й неделях беременности). Кроме этого, ХГЧ используется в лабораторной диагностике как онкомаркер опухолей трофобластной ткани и герминативных клеток яичников и семенников, секретирующих хорионический гонадотропин.

хорионический гонадотропин человека ХГЧ бета-ХГЧ б-ХГЧ половые гормоны

Исследование уровня общего эстрадиола в крови

Код услуги: А09. 05.154

690 ₽

Исследование применяется для оценки функции яичников при нарушениях менструального цикла у женщин, а также при женском и мужском бесплодии, для выявления нарушений метаболизма стероидов, контроля гормональной терапии. Также возможно использовать этот тест в диагностике опухолей, вырабатывающих эстрогены, и при подозрении на нарушения метаболизма стероидов.

эстрадиол е2 половые гормоны

Исследование уровня прогестерона в крови

Код услуги: А09.05.153

690 ₽

Исследование применяется для оценки лютеиновой фазы менструального цикла и подтверждения эффективности овуляции, оценки плацентарной функции при беременности, а также для дифференциальной диагностики различных видов аменореи, установления причин бесплодия, в мониторинге прогестерон-замещающей терапии.

прогестерон половые гормоны

Исследование уровня дегидроэпиандростерона сульфата в крови

Код услуги: А09.05.149

800 ₽

Исследование применяют при подозрении на избыток образования андрогенов, а также при симптомах аменореи, бесплодия или маскулинизации у женщин.

Дегидроэпиандростерон-сульфат ДЭА-S04 ДЭА-С DHEA-S половые гормоны

Исследование уровня 17-гидроксипрогестерона в крови

Код услуги: А09.05.139

690 ₽

Исследование используют в диагностике врожденной гиперплазии надпочечников (врожденный адреногенитальный синдром).

17-ОН прогестерон 17-ОП 17-гидроксипрогестерон половые гормоны

Исследование уровня фолликулостимулирующего гормона в сыворотке крови

Код услуги: А09.05.132

690 ₽

Анализ уровня ФСГ в сыворотке крови – один из базовых тестов в диагностике патологий репродуктивной системы, как у женщин, так и у мужчин. Одновременное измерение концентрации фолликулостимулирующего и лютеинизирующего гормонов используется для диагностики мужского и женского бесплодия и определения тактики лечения.

фолликулостимулирующий гормон фсг половые гормоны

Исследование уровня лютеинизирующего гормона в сыворотке крови

Код услуги: А09. 05.131

690 ₽

Анализ используется при составлении гормонального профиля, определении возможности зачатия ребенка и т.д.

лг lh лютеинизирующий гормон половые гормоны

Исследование уровня пролактина в крови

Код услуги: А09.05.087

820 ₽

Анализ используется в диагностике гипоталамо-гипофизарных расстройств и нарушений репродуктивной функции.

пролактин лактотропный гормон лактогенный гормон маммотропин физолактин половые гормоны

Исследование уровня общего тестостерона в крови

Код услуги: А09. 05.078

690 ₽

Анализ используется в диагностике эндокринологических, гинекологических и андрологических нарушений.

тестостерон общий тестостерон стероидный андрогенный гормон половые гормоны

Prolactin Cell — обзор

12.6 Пролактин и гормон роста

В лактотропных клетках гипофиза метилирование промотора обратно коррелирует с экспрессией пролактина (PRL) [7]. В клетках, не связанных с гипофизом, ген PRL подавляется метилированием как промотора, так и экзонов. Эстроген частично увеличивает секрецию ПРЛ за счет гипометилирования промотора гена ПРЛ [8]. С другой стороны, аномальная экспрессия гена PRL в некоторых аденомах гипофиза [24] и в линии B-лимфобластоидных клеток IM-9-P [30] связана с измененным метилированием экзонов.

ПРЛ — важный гормон, регулирующий рост тканей плода и взрослого человека. Он стимулирует синтез ДНК и увеличивает клеточный цикл в различных тканях. ПРЛ вызывает глобальное гипометилирование ДНК, например, в почках и печени [31], способствуя общей экспрессии генов. Половое созревание у женщин инициирует морфогенез ветвления молочной железы, который требует гормона роста (GH) и эстрогена, а также инсулиноподобного фактора роста 1 для образования протокового дерева, заполняющего жировую подушку. При беременности совместное действие прогестерона и ПРЛ приводит к образованию альвеол, которые выделяют молоко во время лактации.Гипометилирование гена казеина происходит в этот период в молочной железе [32]. В частности, наблюдается усиление метилирования ДНК по трем динуклеотидам CpG функционального STAT5-связывающего сайта промотора казеина [33]. После периода доения наблюдается снижение метилирования. Отсутствие потребности в молоке при отъеме запускает процесс инволюции, в результате чего железа восстанавливается до состояния, предшествующего беременности. Эти процессы требуют многочисленных сигнальных путей, которые выполняют различные регуляторные функции на разных стадиях развития желез.Экспрессия эпителиально-специфического фактора транскрипции ETS ELF5 увеличивается после стимуляции ПРЛ. ELF5 лежит в основе геномной регуляторной сети, ответственной за координацию всех механизмов, которые приводят к дифференцировке альвеолярного компартмента груди [34]. Было высказано предположение, что метилирование промотора ELF5 действует как привратник клонов во время эмбрионального развития. Метилирование промотора ELF5 является клон-специфичным и регулируется в развитии молочной железы [35].

В соматотропных клетках гипофиза метилирование ДНК может модулировать, но обычно не контролирует экспрессию гена GH [36].Однако сайт связывания рецептора глюкокортикоидов (GRBS) существует примерно на 100 пар оснований ниже начала транскрипции GH. Этот GRBS избирательно ингибируется метилированием двух пар GC в этом сайте [37], избегая усиливающего эффекта глюкокортикоидов. Ген GH также имеет несколько неметилированных элементов, реагирующих на щитовидную железу (TRE) [38], что позволяет модулировать гормоны щитовидной железы [39]. В других клетках гипофиза и в тканях, не являющихся гипофизом, ген GH подавляется метилированием CG примерно на 140 пар оснований от сайта транскрипции [40,41].Однако в некоторых аденомах гипофиза (секретирующих GH) ген GH полностью гипометилирован [10,25,42]. У соматотропов ген PRL подавляется гиперметилированием промотора [43,44].

GH регулирует широкий спектр физиологических процессов, включая рост длинных костей, окисление жирных кислот, поглощение глюкозы и метаболизм печеночных стероидов и чужеродных соединений. Его основная цель — печень. GH оказывает зависимое от пола влияние на печень у многих видов животных, при этом многие печеночные гены, в первую очередь гены, кодирующие ферменты цитохрома P450, транскрибируются зависимым от пола образом из-за различий в метилировании промоторов [45].Подавление DNMT3A / B играет роль в зависимом от возраста и пола, а также в индуцированном GH гипометилировании ДНК [46]. С другой стороны, GH индуцировал DNMT1 у карликовых мышей [47]. Таким образом, GH по-разному влияет на метилирование в зависимости от физиологических и патологических состояний.

Соматомедины (например, IGF1 / 2) — это группа гормонов, которые вырабатываются при стимуляции GH для стимуляции роста и деления клеток. Инсулиноподобный фактор роста 1 (IGF1) — гормон, сходный по структуре с инсулином.Он играет важную роль в росте детей и продолжает оказывать анаболическое действие на взрослых. Дефицит GH или IGF1 приводит к снижению роста. IGF1 связывается по крайней мере с двумя рецепторами клеточной поверхности: рецептором IGF1 (IGF1R) и рецептором инсулина. Метилирование промотора и экспрессия IGF1 могут изменяться в скелетных мышцах диабета [48].

Инсулиноподобный фактор роста 2 (IGF-2) также имеет структурное сходство с инсулином. Основная роль IGF-2 — гормон, способствующий росту во время беременности.Он оказывает свое действие путем связывания с рецептором IGF1. Измененное метилирование локуса IGF2 / h29 участвует в импринтированных нарушениях развития, таких как синдром Беквита-Видеманна [49]. Локус IGF2 / h29 играет важную роль в эволюции сумчатых и млекопитающих [50] и играет важную роль в развитии плода-плаценты. IGF2 влияет на рост, морфологию и способность плаценты к переносу питательных веществ и тем самым контролирует снабжение питательными веществами для роста плода [51].

Пролактин

Пролактин

Пролактин — одноцепочечный белковый гормон, тесно связанный с гормоном роста.Он секретируется так называемыми лактотрофами передней доли гипофиза. Он также синтезируется и секретируется широким спектром других клеток организма, в первую очередь различными иммунными клетками, мозгом и децидуальной оболочкой беременной матки.

Пролактин синтезируется как прогормон. После расщепления сигнального пептида длина зрелого гормона составляет от 194 до 199 аминокислот, в зависимости от вида. Структура гормона стабилизируется тремя внутримолекулярными дисульфидными связями.

Физиологические эффекты пролактина

Традиционное представление о пролактине состоит в том, что его основным органом-мишенью является молочная железа, и стимуляция развития молочной железы и выработки молока довольно хорошо определяют его функции. Такая картина в некоторой степени верна, но не может передать точное описание этого многофункционального гормона.

Трудно указать на ткань, которая не экспрессирует рецепторы пролактина, и хотя передняя доля гипофиза является основным источником пролактина, гормон синтезируется и секретируется во многих других тканях.Всего было зарегистрировано несколько сотен различных действий пролактина у разных видов. Здесь кратко описаны некоторые из его основных эффектов.

Развитие молочной железы, производство и воспроизводство молока

В 1920-х годах было обнаружено, что экстракты гипофиза, вводимые девственным кроликам, вызывают выработку молока. Последующие исследования показали, что пролактин играет две основные роли в производстве молока:

• Пролактин вызывает лобулоальвеолярный рост молочной железы .Альвеолы ​​- это скопления клеток в молочной железе, которые действительно выделяют молоко.
• Пролактин стимулирует лактогенез или производство молока после родов. Пролактин вместе с кортизолом и инсулином действуют вместе, чтобы стимулировать транскрипцию генов, кодирующих белки молока.

Критическая роль пролактина в лактации была подтверждена на мышах с целевыми делециями в гене пролактина. Самки мышей, гетерозиготные по удаленному гену пролактина (и продуцирующие примерно половину нормального количества пролактина), демонстрируют неспособность к лактации после первой беременности.

Пролактин также играет важную роль в некоторых нелактационных аспектах репродукции. У некоторых видов (грызуны, собаки, скунсы) пролактин необходим для поддержания желтых тел (структур яичников, выделяющих прогестерон, «гормон беременности»). Мыши, гомозиготные по инактивированному гену пролактина и, следовательно, неспособные секретировать пролактин, бесплодны из-за дефектов овуляции, оплодотворения, доимплантационного развития и имплантации.

Наконец, пролактин, по-видимому, оказывает стимулирующее действие у некоторых видов на репродуктивное или материнское поведение, такое как строительство гнезда и поиск разбросанных детенышей.

Влияние на иммунную функцию

Рецептор пролактина широко экспрессируется иммунными клетками, а некоторые типы лимфоцитов синтезируют и секретируют пролактин. Эти наблюдения предполагают, что пролактин может действовать как аутокринный или паракринный модулятор иммунной активности. Интересно, что мыши с гомозиготными делециями гена пролактина не демонстрируют значительных отклонений в иммунных ответах.

В настоящее время ведется большое количество исследований, чтобы определить роль пролактина в нормальных и патологических иммунных реакциях.Похоже, что пролактин играет модулирующую роль в некоторых аспектах иммунной функции, но не является строго обязательным для этих ответов.

Контроль секреции пролактина

В отличие от того, что наблюдается со всеми другими гормонами гипофиза, гипоталамус тонически подавляет секрецию пролактина гипофизом. Другими словами, обычно на лактотроф действует гипоталамический «тормоз», и пролактин секретируется только при отпускании тормоза. Если ножка гипофиза разрезана, секреция пролактина увеличивается, в то время как секреция всех других гормонов гипофиза резко падает из-за потери высвобождающих гормонов гипоталамуса.

Допамин служит основным фактором ингибирования пролактина или тормозом секреции пролактина. Дофамин секретируется в портальную кровь нейронами гипоталамуса, связывается с рецепторами на лактотрофах и подавляет как синтез, так и секрецию пролактина. Агенты и лекарства, которые мешают секреции дофамина или связыванию рецепторов, приводят к усилению секреции пролактина.

В дополнение к тоническому подавлению дофамином, секреция пролактина положительно регулируется несколькими гормонами, включая тироид-рилизинг-гормон, гонадотропин-рилизинг-гормон и вазоактивный полипептид кишечника.Стимуляция сосков и молочных желез, как это происходит во время кормления грудью, приводит к высвобождению пролактина. Этот эффект, по-видимому, происходит из-за спинальной рефлекторной дуги, которая вызывает высвобождение пролактин-стимулирующих гормонов из гипоталамуса.

Эстрогены обеспечивают хорошо изученный положительный контроль над синтезом и секрецией пролактина. Повышение концентрации эстрогена в крови на поздних сроках беременности, по-видимому, отвечает за повышенный уровень пролактина, который необходим для подготовки молочной железы к лактации в конце беременности.

Болезнь

Чрезмерная секреция пролактина — гиперпролактинемия — относительно частое заболевание у людей. Это состояние имеет множество причин, включая пролактин-секретирующие опухоли и терапию определенными лекарствами.

Общие проявления гиперпролактинемии у женщин включают аменорею (отсутствие менструального цикла) и галакторею (чрезмерную или спонтанную секрецию молока). У мужчин с гиперпролактинемией обычно наблюдается гипогонадизм, снижение полового влечения, снижение выработки спермы и импотенция.У таких мужчин также часто наблюдается увеличение груди (гинекомастия), но очень редко вырабатывается молоко.

Обновлено 2018 г. Присылайте комментарии по адресу [email protected]

Пролактин вызывает апоптоз лактотропов у самок грызунов

Abstract

Оборот клеток передней доли гипофиза, происходящий во время женского полового цикла, является плохо изученным процессом, который включает сложную регуляцию пролиферации клеток и апоптоза множеством гормонов. У крыс всплеск пролактина (ПРЛ), возникающий во время проэструса, совпадает с наивысшей скоростью апоптоза.Так как клетки передней доли гипофиза экспрессируют рецептор пролактина (PRLR), мы стремились выяснить фактическую роль PRL в регуляции обмена клеток гипофиза у женщин, ведущих цикл. Мы показали, что острая гиперпролактинемия, индуцированная у овариэктомированных крыс с помощью инъекции ПРЛ или лечения антагонистом дофамина, быстро увеличивала апоптоз и снижала пролиферацию, в частности, клеток, продуцирующих ПРЛ (лактотропов), предполагая прямую регуляцию этих клеточных ответов ПРЛ. Чтобы продемонстрировать, что апоптоз, происходящий в природе в проэструсе, регулируется временным повышением эндогенных уровней PRL, мы использовали самок мышей с дефицитом PRLR (PRLRKO), у которых передача сигналов PRL полностью отменена. Согласно нашей гипотезе, во время проэструса не наблюдалось увеличения скорости апоптоза лактотропа, что, вероятно, способствует онкогенезу гипофиза, наблюдаемому у этих животных. Чтобы расшифровать молекулярные механизмы, лежащие в основе эффектов PRL, мы исследовали специфичный для изоформ паттерн экспрессии PRLR у циклических самок дикого типа. Этот анализ выявил драматические изменения соотношения длинных и коротких PRLR во время эстрального цикла, что особенно актуально, поскольку эти изоформы проявляют отличные сигнальные свойства.Этот паттерн был заметно изменен в модели хронической блокады передачи сигналов PRLR с участием трансгенных мышей, экспрессирующих чистый антагонист PRLR (TG ^{Δ1-9-G129R-hPRL} ), что свидетельствует о том, что PRL регулирует экспрессию собственного рецептора в изоформ-специфичных манера. Взятые вместе, эти результаты демонстрируют, что i) всплеск PRL, происходящий во время проэструса, является основным проапоптотическим сигналом для лактотропов, и ii) частичный или полный дефицит передачи сигналов PRLR в передней доле гипофиза может привести к гиперплазии гипофиза и возможному развитию пролактиномы, как это наблюдается TG ^{Δ1–9-G129R-hPRL} и мыши PRLRKO, соответственно.

Образец цитирования: Ferraris J, Zárate S, Jaita G, Boutillon F, Bernadet M, Auffret J, et al. (2014) Пролактин вызывает апоптоз лактотропов у самок грызунов. PLoS ONE 9 (5): e97383. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0097383

Редактор: Мария Г. Кастро, Медицинский факультет Мичиганского университета, Соединенные Штаты Америки

Поступила: 16 января 2014 г .; Одобрена: 16 апреля 2014 г .; Опубликовано: 23 мая 2014 г.

Авторские права: © 2014 Ferraris et al.Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Финансирование: Эта работа была поддержана PICT 092 и PICT 0088 Agencia Nacional de Promoción de Ciencia y Técnica (ANPCYT) http://www. agencia.mincyt.gob.ar/frontend/agencia/fondo/foncyt, Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas (CONICET) (PIP 2010-2012) www.conicet.gov.ar и Университет Буэнос-Айреса (UBACYT M057) www.uba.ar, Аргентина; Проект INSERM-CONICET при международном сотрудничестве 2009-2010 гг. Www.conicet.gov.ar, Аргентина и Франция; Ассоциация международных исследований рака (грант AICR № 05-0603) http://www.aicr.org.uk/CurrentProjects.stm, Национальный институт Санте и де ла Recherche Médicale и Парижский университет Декарта, Франция. Феррарис Химена получил стипендии от ANPCyT (Аргентина), Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas (CONICET) (Аргентина) и Bourse Doctorale Universitaire de Mobilité от Парижского университета Декарта (Франция).Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что никаких конкурирующих интересов не существует.

Введение

Пролактин (ПРЛ) — это гормон, секретируемый в основном лактотропами передней доли гипофиза. Этот гормон участвует в нескольких физиологических функциях, включая маммопоэз, лактогенез и репродукцию [1], хотя он также участвует в развитии различных периферических опухолей.При раке груди и простаты, где было продемонстрировано местное производство ПРЛ, предполагается, что его пролиферативный потенциал посредством аутокринных / паракринных механизмов способствует развитию и прогрессированию опухоли [2], [3], [4], [5], [ 6], [7].

Пролактиномы — это доброкачественные опухоли, которые составляют примерно одну треть опухолей гипофиза [2]. Одной из основных характеристик пролактином является то, что они редко подвергаются злокачественной трансформации или местной инвазивности [2]. Было высказано предположение, что пролактиномы имеют моноклональное происхождение и что изменения в регуляции клеточного цикла приводят к размножению исходной мутированной клетки [8], [9]. Хотя в этих аденомах экспрессируется несколько онкогенов, а различные мутации связаны с семейными случаями опухолей передней доли гипофиза, механизмы, приводящие к спорадическому образованию аденомы, наиболее частому проявлению патологии в этой железе, в настоящее время неизвестны [2], [ 8], [9]. Учитывая, что передняя доля гипофиза является железой со значительной пластичностью [10], изменения в механизмах, которые физиологически регулируют обмен клеток передней доли гипофиза, могут быть вовлечены в патогенез опухолей гипофиза.Поскольку все эндокринные клетки гипофиза, в том числе лактотропы, экспрессируют рецепторы пролактина (PRLR) [11], [12], предполагается, что PRL участвует в регуляции функций передней доли гипофиза, включая гомеостаз тканей. Следовательно, изменения передачи сигналов PRLR могут играть роль в развитии опухоли передней доли гипофиза.

В соответствии с эффектами, описанными для ПРЛ в большинстве его тканей-мишеней [6], [13], [14], [15], [16], [17], [18], первоначально было предложено, чтобы этот гормон может оказывать трофическое действие на клетки передней доли гипофиза [19], [20], [21], [22]. Однако исследования с использованием мышей с нокаутом PRLR (PRLRKO) впоследствии показали, что PRL фактически оказывает противоположный эффект на лактотропы, поскольку у этих мышей развиваются аденомы гипофиза [23]. Используя специфический антагонист PRLR, способный частично блокировать передачу сигналов PRLR в биологических системах, где экспрессируются как лиганд, так и рецептор, мы недавно продемонстрировали, что в отличие от того, что происходит в большинстве других тканей, PRL индуцировал апоптоз и уменьшал пролиферацию клеток передней доли гипофиза самцов крыс, действует через аутокринный / паракринный механизм [24].

Однако у женщин регуляция гомеостаза гипофиза — более сложный процесс, который остается не охарактеризованным. Передняя доля гипофиза самок грызунов подвергается постоянному ремоделированию в течение каждого эстрального цикла. Кроме того, при определенных условиях, таких как беременность и кормление грудью, он также реагирует на определенные физиологические потребности [10], [25], [26]. Оборот клеток передней доли гипофиза у самок крыс составляет около 3% в день [10]. Во время каждого эстрального цикла пик пролиферации приходится именно на эструс [27], [28], [29], тогда как самый высокий уровень апоптоза наблюдается во время проэструса [30], [31].Этот оборот клеток — это жестко регулируемый процесс, в котором несколько факторов, например эстрадиол [25], [32], дофамин [33], [34] и ПРЛ 16 кДа [35], как было показано, участвуют. Интересно, что во второй половине проэструса, т.е. когда скорость апоптоза наиболее высока, наблюдается сопутствующий пик сывороточного ПРЛ в ответ на высокие уровни эстрогенов в крови [36]. Мы предполагаем, что всплеск высвобождения ПРЛ в проэструсе участвует в обновлении клеток передней доли гипофиза, которое происходит во время эстрального цикла.

PRLR выражается в виде различных изоформ, генерируемых альтернативным сплайсингом. Они включают одну длинную (PRLR _long ) и одну короткую (PRLR _short ) изоформы у крыс, а также одну длинную и три короткие (S1, S2 и S3) изоформы у мышей [2]. Длинная и короткая изоформы различаются по полипептидной цепи внутриклеточного домена; следовательно, все они способны связывать PRL в равной степени, но проявляют разные способности запускать канонические внутриклеточные сигнальные пути PRLR [4], [37], [38].Хотя изоформы PRLR обычно коэкспрессируются в одной и той же ткани [38], [39], одна из изоформ часто преобладает над другими, в зависимости от ткани и физиологического контекста [37], [39]. Например, в яичнике мыши наиболее широко экспрессируется изоформа PRLR _long , за которой следуют изоформы S2 и S3 PRLR _short [40]. Кроме того, соотношение экспрессии PRLR _long и PRLR _short варьирует в течение эстрального цикла, как показано в яичнике крысы [41].Трансгенные мыши, экспрессирующие только PRLR _short , обнаруживают нарушение развития фолликулов и желтого тела [42], [43], тогда как мыши, экспрессирующие только эндогенный PRLR _long , имеют нормальное фолликулярное, но аномальное развитие желтого тела. Это предполагает, что экспрессия обеих изоформ PRLR необходима для физиологического завершения этого процесса [41].

Что касается гипофиза, то у крыс сообщалось об экспрессии длинных и коротких изоформ, причем наиболее распространенным был PRLR _long .В гипофизе мышей-самцов преобладающей формой также является PRLR _long [24]. В гипофизе самок мышей экспрессию PRLR изучали на препуберальных мышах, где преобладала короткая изоформа [44]. Сообщалось об экспрессии четырех изоформ PRLR у зрелых самок мышей [45]. Однако данные об экспрессии PRLR у циклических самок мышей отсутствуют, что делает невозможным определение действительного участия передачи сигналов PRLR в гомеостазе гипофиза во время каждого эстрального цикла.Действительно, ПРЛ может саморегулировать свое действие на переднюю долю гипофиза, модулируя свою собственную экспрессию, собственную секрецию [46] и / или специфичную для изоформы экспрессию своего рецептора, как описано во множестве других тканей [37], [39].

Целью настоящего исследования было изучить роль PRL в регуляции клеточного обмена передней доли гипофиза и экспрессии PRLR в передней доле гипофиза у женщин, ведущих цикл. С этой целью мы разработали серию экспериментов in vivo с участием нормальных крыс / мышей, а также две модели генетически модифицированных мышей, в которых передача сигналов PRLR подавлена ​​или полностью отменена.

Материалы и методы

Лекарства и реактивы

Все лекарства, среды и добавки были получены от Sigma (Сент-Луис, Миссури, США), за исключением фетальной телячьей сыворотки (Natocor, Кордова, Аргентина), амфотерицина B, незаменимых аминокислот и гентамицина (Invitrogen, Карлсбад, Калифорния, США), все реагенты для мечения концевых никаций дезоксиуридинтрифосфата, опосредованные терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазой (TUNEL) (Roche Molecular Biochemicals, Mannheim, Germany) и реагенты, описанные ниже.

Животные

Мышей и крыс содержали в контролируемых условиях освещения (12-часовые циклы свет-темнота) и температуры (20–22 ° C) и кормили ad libitum.

Этические заявления

Это исследование было одобрено Региональным комитетом по исследованию животных, Иль-де-Франс, Парижским университетом Декарта (номер разрешения: P2.VG.120.09) и Комитетом по уходу за животными Школы медицины, Университет Буэноса (CICUAL), Университет Буэнос-Айреса, идентификатор разрешения: Res.(CD) № 2831/10.

In vivo обработка самок крыс

взрослых самок крыс линии Wistar (200–220 г) подвергали овариэктомии (OVX) под кетамином (100 мг / кг, внутрибрюшинно) и ксилазином (10 мг / кг, внутрибрюшинно) и кетопрофеном (5 мг / кг) для обезболивания, 2 недели перед лечением.

крысам OVX вводили овечий PRL (oPRL) (1 мг / кг, внутрибрюшинно) или носитель (NaCl 0,9%). Эта доза ПРЛ приводит к концентрации в сыворотке ~ 700 нг / мл через 30 мин и ~ 500 нг / мл через 1 час после внутрибрюшинного введения.администрация [47]. Крысам совместно вводили бромдезоксиуридин (BrdU, 50 мг / кг) [24] и умерщвляли через 6 часов.

В других экспериментах крысам вводили антагонист допаминовых рецепторов D2 (D2R) сульпирид (5 мг / кг, внутрибрюшинно) [48] и BrdU (50 мг / кг) и убивали через 6 часов.

Передние доли гипофиза были удалены через несколько минут после декапитации. Клетки диспергировали и фиксировали. Для этой процедуры передние доли гипофиза промывали модифицированной средой Дульбекко Игла (DMEM), содержащей 3 мг / мл бычьего сывороточного альбумина (DMEM-BSA).Затем передние гипофизы разрезали на небольшие фрагменты и ферментативно диспергировали путем последовательных инкубаций в DMEM-BSA, содержащей 0,75% трипсина, 10% адсорбированной углем фетальной телячьей сыворотки (FCS) и 45 ед / мл дезоксирибонуклеазы типа I (ДНКазы). Наконец, клетки диспергировали экструзией с помощью пипетки Пастера в буфере Кребса без Ca ²⁺ и Mg ²⁺ . Диспергированные клетки промывали и ресуспендировали в DMEM с 10% FCS. Во всех процедурах жизнеспособность клеток, оцениваемая по исключению трипанового синего, составляла более 85%. Клетки фиксировали ледяным 70% этанолом в PBS в течение ночи при -20 ° C [35].

Мыши PRLRKO

Чтобы оценить роль передачи сигналов PRLR в контроле обновления клеток передней доли гипофиза во время эстрального цикла, мы использовали мышей PRLRKO, у которых передача сигналов PRLR полностью отменена из-за отсутствия экспрессии PRLR. Эти мыши были созданы на генетическом фоне C57BL / 6, как описано ранее [49]. Использовали мышей в возрасте от двух до трех месяцев, поскольку в этом возрасте у них не наблюдается увеличения гипофиза [49], и, следовательно, они имеют консервативные популяции клеток передней доли гипофиза.Самкам мышей PRLRKO и однопометникам дикого типа (WT) вводили BrdU (50 мг / кг, внутрибрюшинно) за 24 ч до эвтаназии. Животных умерщвляли путем смещения шейных позвонков во время диэструса или проэструса, что определялось ежедневными вагинальными мазками. Гипитарии удаляли в течение нескольких минут, взвешивали и обрабатывали для анализа TUNEL, обнаружения включения BrdU и коиммуноокрашивания PRL.

Трансгенные мыши, экспрессирующие чистый антагонист PRLR Δ1–9-G129R-hPRL

Для оценки роли PRL в контроле экспрессии PRLR мы использовали трансгенных самок мышей, у которых системная экспрессия чистого антагониста PRLR Δ1–9-G129R-hPRL нарушает передачу сигналов PRLR (TG ^{Δ1–9-G129R-hPRL} мышей ).Этих мышей были созданы на фоне BALB / c-J, как описано ранее [7]. Поскольку у молодых, но не старых самок мышей TG изменился эстральный цикл [50], мы использовали 12-месячных самок мышей TG ^{Δ1–9-G129R-hPRL} и однопометников WT, которых умерщвляли во время проэструса или диэструса, затем удаляли гипофизы. как описано выше. После удаления промежуточной доли нейрохирургии передние гипофизы обрабатывали для выделения РНК.

Обнаружение включения BrdU методом проточной цитометрии (FACS)

У крыс включение BrdU было обнаружено с помощью FACS.После фиксации в ледяном 70% этаноле осторожным встряхиванием клетки центрифугировали и инкубировали в растворе, содержащем 1% параформальдегид (PFA), 0,01% Tween-20, 1 ч при 20 ° C. Затем клетки инкубировали с ДНКазой I 100 ед / мл, разведенной в 0,15 М NaCl, MgCl ₂ 4,2 М pH 5 в течение 25 мин при 37 ° C, центрифугировали и инкубировали с антителом против BrdU, конъюгированным с флуоресцеином (FITC). или соответствующий изотипический контроль (BD Bioscience, Сан-Хосе, Калифорния, США) в течение 40 мин при 20 ° C. Клетки промывали PBS и инкубировали с 1% PFA в течение 15 мин.После центрифугирования клетки ресуспендировали в PBS до анализа FACS. Интенсивность флуоресценции ≥6000 закрытых клеток / пробирку анализировали с помощью FACS с использованием FACScan (BD Bioscience, Сан-Хосе, Калифорния, США). Анализ BrdU-положительных клеток проводили с использованием программного обеспечения WinMDI 98.

Анализ клеточного цикла с помощью FACS

После фиксации в ледяном 70% этаноле клетки передней доли гипофиза от OVX или обработанных-OVX крыс центрифугировали и ДНК окрашивали йодидом пропидия (PI, 50 мкг / мл) в PBS, содержащем рибонуклеазу (10 мкг / мл) для 20 мин при 37 ° C [24], [35]. После центрифугирования иммуноокрашивание лактотропов проводили с использованием антисыворотки морских свинок, направленной против ПРЛ крыс (д-р А. Парлоу, Национальная программа по гормонам и гипофизу, Торранс, Калифорния, США) (1-2000, 1 час при 37 ° C), промытые в PBS, а затем инкубировали с FITC-конъюгированным антителом против морской свинки (Chemicon International, Temecula, CA, USA) (1–75, 40 мин при 37 ° C). Для изотипических контролей клетки инкубировали с сывороткой морской свинки вместо антисыворотки к ПРЛ [51]. Клетки промывали, ресуспендировали в PBS и анализировали с помощью FACS.Интенсивность флуоресценции ≥10 000 клеток / пробирку анализировали с помощью FACScan.

Клетки с интенсивностью окрашивания PI ниже пика G0 / G1 считались гиподиплоидными. Анализ содержания ДНК и определение ПРЛ-положительных клеток выполняли с помощью программного обеспечения WinMDI 98. Анализ гиподиплоидии и клеточного цикла у лактотропов проводили с выделением PRL-положительной популяции. Определение клеток в Sub G0 / G1 (гиподиплоидные клетки), G0 / G1, S и G2 / M-фазах клеточного цикла проводили с использованием WinMDI 98 и Cylcherd 1.2 программы [24], [35].

TUNEL анализ и обнаружение инкорпорации BrdU в передних отделах гипофиза

Питуитарии самок мышей PRLRKO и WT удаляли сразу после эвтаназии, взвешивали, фиксировали в 4% PFA в PBS (pH 7,4) в течение 4 часов и заливали парафином. Срезы (4 мкм) депарафинизировали в ксилоле и регидратировали в градуированном этаноле. Извлечение антигена проводили с помощью микроволнового излучения. Для анализа TUNEL разрывы цепей ДНК метили дигоксигенин-дезоксиуридинтрифосфатом с использованием терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазы (0.18 Ед / мкл) согласно протоколу производителя. После инкубации в PBS с 10% овечьей сывороткой в ​​течение 90 минут срезы инкубировали с антителом антидигоксигенин-FITC (1-10) для обнаружения включения нуклеотидов в 3′-ОН конец поврежденной ДНК [24], [52].

Для обнаружения включения BrdU предметные стекла проницались с помощью PBS-Triton X-100 0,1% в течение 17 мин при комнатной температуре. После инкубации с 3% BSA в PBS-Triton в течение 30 мин срезы инкубировали с антителом против BrdU в растворе ДНКазы (GE Healthcare, Little Chalfont, Buckinghamshire, UK) в соответствии с протоколом производителя [24].Срезы промывали и инкубировали с вторичным антителом против мышиного FITC (Chemicon International, Temecula, CA, USA) 1-200 в PBS-Triton 0,5% с 1% лошадиной сывороткой.

Чтобы идентифицировать TUNEL-положительные или BrdU-положительные лактотропы, после промывания с помощью PBS-Triton 0,5% слайды инкубировали с 10% козьей сывороткой в ​​PBS-Triton 0,5% в течение 90 минут с последующим введением антисыворотки против PRL мыши (Dr A.Parlow, Национальная программа по гормонам и гипофизу) 1∶200 в PBS-Triton 0,5% в течение ночи. После промывания предметные стекла инкубировали с вторичным антителом против кролика, конъюгированным с родамином (Chemicon).Срезы заполняли Vectashield (Vector Laboratories, Inc., Burlingame, CA, USA), содержащим 4,6 диамидино-2-фенилиндолдигидрохлорид (DAPI) для окрашивания ДНК, и визуализировали в флуоресцентном световом микроскопе (Axiophot). Поскольку количество TUNEL-положительных или BrdU-положительных клеток в срезах из исследований in vivo было очень низким, апоптоз и пролиферация были выражены как количество TUNEL-положительных клеток / поле, BrdU-положительных клеток / поле, TUNEL-положительных. PRL-положительные клетки / поле (TUNEL-положительные лактотропы), BrdU-положительные PRL-положительные клетки / поле (BrdU-положительные лактотропы) или TUNEL-положительные PRL-отрицательные клетки / поле (TUNEL-положительные нелактотропные клетки) и BrdU-положительный PRL отрицательные клетки / поле (BrdU-положительные нелактотропные клетки), как описано ранее [24], [52].Клетки из промежуточной доли нейро были исключены из подсчета. TUNEL-положительные или BrdU-положительные клетки передней доли гипофиза подсчитывали в 30-40 полях (x 400) срезов передней доли гипофиза от каждой мыши. Среднее значение TUNEL-положительных клеток или TUNEL-положительных лактотропов / поле, или BrdU-положительных клеток, или BrdU-положительных лактотропов / поле от каждой мыши рассматривалось как индивидуальное значение [24], [52].

Экстракция РНК и ПЦР в реальном времени

Передние гипофиза самок мышей TG и WT удаляли, промывали раствором RNAeasy (Qiagen Inc., Санта-Кларита, Калифорния, США) и сразу замораживали в жидком азоте. РНК экстрагировали с помощью набора RNAeasy Micro Kit (Qiagen) в соответствии с протоколом производителя. Вкратце, замороженные передние гипофизы гомогенизировали с использованием холодной ступки и пестика и помещали в 350 мкл RTL-лизисного буфера (Qiagen), содержащего β-меркаптоэтанол, повторно гомогенизировали с помощью иглы и центрифугировали. Супернатант промывали 70% этанолом, центрифугировали и переносили на спин-колонку RNAeasy (Qiagen). РНК собирали с 14 мкл воды, свободной от РНКазы, и хранили при -80 ° C.Обратную транскрипцию выполняли с использованием обратной транскриптазы SuperScript II в соответствии с протоколом производителя. Сто двадцать пять нг общей РНК подвергали обратной транскрипции. После инкубации в течение 5 минут при 65 ° C с 1 мкл олиго (dT) и 1 мкл смеси dNTP, образцы РНК инкубировали в течение 2 минут при 42 ° C со смесью, содержащей DTT и РНКазу OUT (Invitrogen). После добавления 1 мкл SuperScript II RT (Invitrogen) образцы инкубировали в течение 50 минут при 42 ° C и реакцию инактивировали нагреванием (70 ° C в течение 15 минут).Наконец, образцы обрабатывали РНКазой H (Invitrogen) для удаления любой возможной РНК, комплементарной кДНК.

Для ПЦР в реальном времени мы использовали прямые праймеры, отображающие внеклеточный домен PRLR мыши (ECD), общий для всех изоформ, и обратный праймер, специфичный для внутриклеточных доменов (ICD) мышиного PRLR _{длинный} , S1, S2 или S3 PRLR _{короткий} изоформы (таблица 1) [24]; циклофилин использовали в качестве эталона, как описано ранее [24], [53]. Все праймеры были получены от Eurogentec (Льеж, Бельгия).

ПЦР в реальном времени проводили с использованием системы Applied Biosystems 7300 Real-Time PCR System. Для каждой реакции использовали 25 мкл раствора, содержащего 5 мкл кДНК, 0,25 мкл 20 мкМ прямого и обратного праймеров и 12,5 мкл Power SyberGreen PCR Master Mix (Applied Biosystems, Карлсбад, Калифорния, США). Все реакции проводили в двух экземплярах. Отрицательные контроли включали амплификацию РНК (без обратной транскрипции) и воды. Амплификацию инициировали 2-минутной предварительной инкубацией при 50 ° C, затем 40 циклов при 95 ° C в течение 30 секунд, 60 ° C в течение 1 минуты, 95 ° C в течение 15 секунд, 60 ° C в течение 30 секунд, завершение 95 ° C в течение последних 15 с (плавление).Мы использовали метод 2 ^-ΔCt для определения эффекта экспериментального лечения (присутствие антагониста у трансгенных мышей или вариация эстрального цикла) на экспрессию кандидата гена внутреннего контроля. Экспрессия циклофилина не различалась у трансгенных мышей WT и TG или между разными стадиями эстрального цикла. Валидация метода 2 ^-ΔCt в наших экспериментах была проведена путем определения того, что эффективности амплификации изоформ PRLR _long , PRLR _short и циклофилина аналогичны, в соответствии с процедурой, опубликованной Livak and Schmittgen et al [54]. Линейность передачи сигналов ОТ-ПЦР в реальном времени определяли с помощью серийных разведений эталонной кДНК в широком диапазоне, и были обнаружены линейные корреляции между количеством кДНК и Ct в течение не менее 40 раундов ОТ-ПЦР в реальном времени. Уровни экспрессии нормализовали к экспрессии циклофилина мыши, выполняемой параллельно в качестве эндогенного контроля [54]. Данные ПЦР в реальном времени были проанализированы путем расчета значения 2 ^{— ΔCt} для каждой экспериментальной единицы, где Ct является пороговым номером цикла, а ΔCt — разницей между значениями Ct для общей или каждой изоформы PRLR и циклофилина [24].

Определение уровней ПРЛ в сыворотке с помощью радиоиммуноанализа (РИА)

Уровни ПРЛ

в сыворотке измеряли методом RIA с использованием реагентов, предоставленных Национальным институтом диабета, болезней пищеварения и почек, Национальной программой по гормонам и гипофизу (д-р А. Ф. Парлоу, Торранс, Калифорния). Результаты выражали в нанограммах на миллилитр в пересчете на PRL RP3 крысы. Коэффициенты вариации внутри и между исследованиями составили 6,9 и 11,6% соответственно [55].

Статистический анализ

Данные выражены как среднее ± стандартная ошибка среднего.Достоверность различий между средними значениями определяли с помощью теста Стьюдента t или двустороннего дисперсионного анализа с последующим критерием Тьюки. Различия считались достоверными, если р <0,05. Статистический анализ проводили с использованием программного обеспечения GraphPad Prism 6.

Результаты

Инъекции острого ПРЛ регулируют пролиферацию и апоптоз лактотропов самок крыс

У женщин, передвигающихся на велосипеде, клетки передней доли гипофиза подвергаются воздействию высоких уровней ПРЛ во второй половине дня проэструса, стадии эстрального цикла с самой высокой скоростью апоптоза и самой низкой скоростью пролиферации.Следовательно, чтобы изучить, влияет ли ПРЛ на пролиферацию или апоптоз клеток передней доли гипофиза, крысам OVX вводили oPRL и умерщвляли через 6 часов [47]. Овариэктомию выполняли, чтобы обеспечить низкие и стабильные уровни эндогенного ПРЛ в плазме и избежать воздействия гонадных стероидов на апоптоз и пролиферацию клеток передней доли гипофиза [32], [56], [57], [58], [59]. Острая обработка oPRL снижала скорость пролиферации клеток передней доли гипофиза, что определялось путем мониторинга BrdU-положительных клеток (рис.1). Напротив, апоптоз увеличивался с помощью oPRL, что определялось процентом клеток с содержанием гиподиплоидной ДНК (фиг. 2A). Анализ клеточного цикла показал, что этот эффект коррелировал с уменьшением количества клеток в фазе G2 / M без изменений процентного содержания клеток в фазе G0 / G1 или S (рис. 2 B – D). Чтобы исследовать, регулирует ли ПРЛ специфически обновление лактотропов, мы охарактеризовали прогрессию клеточного цикла и гиподиплоидное содержание ДНК в клетках, положительно окрашенных антителом против ПРЛ.Апоптоз лактотропа был выше у крыс, которым вводили oPRL, чем у контрольных животных OVX (фиг. 3A, G). Мы также наблюдали, что oPRL снижает процент лактотропов в G2 / M с пограничной значимостью (p = 0,053) (рис. 3D) без других изменений в прогрессии клеточного цикла в субпопуляции лактотропов (рис. 3 B, C). Проапоптотические и антипролиферативные эффекты oPRL не наблюдались в нелактотропной субпопуляции (рис. 3E – F и G).

Рисунок 1. ПРЛ снижает пролиферацию клеток передней доли гипофиза in vivo .

Крыс с удаленными яичниками (n = 4 крысы / группа) вводили oPRL (1 мг / кг, 6 часов) или физиологический раствор и BrdU (50 мг / кг, 6 часов). Скорость пролиферации определяли путем обнаружения включения BrdU и анализа FACS. Каждый столбец представляет собой среднее значение ± SEM процента BrdU-положительных клеток. * p <0,05 по сравнению с соответствующими контрольными (CTRL) животными, которым вводили носитель, тест Стьюдента t .

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0097383.g001

Рисунок 2.ПРЛ увеличивает апоптоз клеток передней доли гипофиза in vivo и снижает процент общего количества клеток передней доли гипофиза в G2 / M-фазе.

Крысам с удаленными яичниками (n = 12 крыс / группа) вводили oPRL (1 мг / кг, 6 ч) или физиологический раствор. A: Апоптоз определяли как процент гиподиплоидных клеток с использованием PI и FACS. Каждый столбец представляет собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего процента ячеек суб-G0 – G1. * p <0,05 по сравнению с соответствующими контрольными животными, которым вводили носитель, тест Стьюдента t .B – D: Клеточный цикл анализировали с помощью FACS с использованием PI. Каждый столбец представляет собой среднее значение ± SEM процента клеток в фазе G0 / G1 (B), клеток в фазе S (C) и ячеек в фазе G2 / M (D). * p <0,05 по сравнению с контрольными животными, которым вводили носитель, тест Стьюдента t . E: Типичные гистограммы, показывающие гиподиплоидию или клетки на каждой стадии клеточного цикла у животных, получавших CTRL и oPRL.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0097383.g002

Рисунок 3. ПРЛ увеличивает апоптоз лактотропа in vivo .

Лактотропы были идентифицированы с помощью иммуноокрашивания ПРЛ и проанализированы с помощью FACS. Анализ апоптоза и клеточного цикла проводили в PRL-положительной субпопуляции. A: Апоптоз определяли методом FACS с использованием PI. Каждый столбец представляет собой среднее значение ± SEM процента подячеек в G0 – G1. * p <0,05 по сравнению с животными CTRL, которым вводили носитель, тест Стьюдента t . B – D: Клеточный цикл анализировали с помощью FACS с использованием PI. Каждый столбец представляет собой среднее значение ± SEM процента клеток в фазе G0 / G1 (B), клеток в фазе S (C) и ячеек в фазе G2 / M (D) p = 0.05 для G2 / M в oPRL относительно CTRL, тест Стьюдента t . E – F: обработка oPRL не изменяла скорость апоптоза (E) или процент клеток в G2 / M в PRL-отрицательной субпопуляции. G: репрезентативные гистограммы, показывающие гиподиплоидию или клетки на каждой стадии клеточного цикла у животных, получавших CTRL и PRL.

https://doi. org/10.1371/journal.pone.0097383.g003

Эндогенный ПРЛ регулирует апоптоз и пролиферацию клеток передней доли гипофиза самок крыс

Помимо своего ингибирующего действия на секрецию ПРЛ, дофамин модулирует обмен клеток передней доли гипофиза, индуцируя апоптоз и уменьшая пролиферацию лактотропов [34], [60].Дофаминергические нейроны гипоталамуса экспрессируют ПРЛ, а вариации уровней ПРЛ в сыворотке вызывают изменения дофаминергического тонуса [60]. Поскольку введение ПРЛ может привести к увеличению дофамина, достигающего передней доли гипофиза [36], дофамин может участвовать в изменениях в обмене клеток передней доли гипофиза, вызванных инъекцией ПРЛ. Чтобы избежать этой возможности, мы индуцировали гиперпролактинемию у крыс OVX путем введения сульпирида, антагониста D2R. Как и ожидалось, введение сульпирида увеличивало сывороточные уровни ПРЛ до ~ 400 нг / мл (рис.4А). Подобно тому, что наблюдалось у крыс, которым вводили oPRL, введение сульпирида уменьшало включение BrdU (фиг. 4B) и увеличивало апоптоз клеток передней доли гипофиза (фиг. 4C). Эти результаты предполагают, что ПРЛ оказывает прямое антипролиферативное и проапоптотическое действие на клетки передней доли гипофиза, независимо от действия дофамина.

Рисунок 4. Сульпирид снижает пролиферацию клеток передней доли гипофиза in vivo .

Крысам с удаленными яичниками (n = 5–7 крыс / группа) вводили сульпирид (5 мг / кг, 6 часов) или физиологический раствор, а также BrdU (50 мг / кг, 6 часов).A: Лечение сульпиридом вызывало гиперпролактинемию у крыс OVX. В каждом столбце представлены уровни ПРЛ в сыворотке ± SEM у животных, получавших CTRL или сульпирид. * p <0,05 по сравнению с животными CTRL, которым вводили носитель, тест Student t . B: Скорость пролиферации, определенная путем обнаружения включения BrdU и FACS. Каждый столбец представляет собой среднее значение ± SEM процента BrdU-положительных клеток. * p <0,05 по сравнению с животными CTRL, которым вводили носитель, тест Student t . C: Апоптоз определяли с помощью FACS с использованием PI.Каждый столбец представляет собой среднее значение ± SEM процента клеток суб-G0-G1. ** p <0,01 по сравнению с животными CTRL, которым вводили носитель, тест Стьюдента t . D: Типичные гистограммы, показывающие гиподиплоидию у животных, получавших CTRL и сульпирид.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0097383.g004

Отсутствие передачи сигналов PRLR отменяет апоптоз клеток передней доли гипофиза во время эстрального цикла

У мышей [61], [62] и крыс [36] уровни ПРЛ в сыворотке относительно постоянны на протяжении всего эстрального цикла, за исключением проэструса, когда резкое увеличение секреции ПРЛ происходит в ответ на высокие уровни циркулирующих эстрогенов. [36].В то время индекс пролиферации у крыс самый низкий. Чтобы оценить, подразумевается ли антипролиферативный эффект PRL в контроле скорости пролиферации, которая происходит во время проэструса, мы изучили влияние передачи сигналов PRLR на пролиферацию клеток гипофиза у мышей WT и PRLRKO, умерщвленных во время диэструса или проэструса. Как сообщалось ранее, не наблюдалось различий в массе тела или гипофиза у мышей PRLRKO в возрасте 2–3 месяцев по сравнению с однопометными мышами дикого типа (рис. 5A, B) [23]. Пролиферацию оценивали по включению in vivo BrdU (24 ч) (рис.5). У мышей WT не было различий в пролиферативном индексе общих клеток передней доли гипофиза, лактотропных или нелактотропных клеток между диэструсом и проэструсом, хотя общая тенденция заключалась в уменьшении проэструса (Fig. 5C-E). У мышей PRLRKO мы снова не наблюдали значительных различий в пролиферации в различных популяциях клеток, но что интересно, тенденция заключалась в увеличении проэструса, противоположном тому, который наблюдается у мышей WT (Fig. 5C-E).

Рисунок 5. Пролиферация клеток передней доли гипофиза у мышей WT и PRLR KO во время проэструса или диэструса.

Мышам дикого типа и PRLRKO (6–10 животных в группе) вводили BrdU (50 мг / кг, 24 ч) и умерщвляли во время проэструса или диэструса. Пролиферацию определяли по включению BrdU в срезы тканей. A, B: масса тела (A) и масса гипофиза (B) мышей WT и PRLRKO, умерщвленных во время диэструса или проэструса, выраженные как среднее ± SEM, двусторонний дисперсионный анализ ANOVA. C: Каждый столбец представляет среду ± SEM для общего количества пролиферирующих клеток передней доли гипофиза (BrdU-положительные клетки / поле). Двусторонний дисперсионный анализ. D: Каждый столбец представляет среду ± SEM пролиферирующих лактотропов (BrdU-положительные PRL-положительные клетки / поле), двусторонний дисперсионный анализ.E: Каждый столбец представляет среду ± SEM пролиферирующих нелактотропных клеток (BrdU-положительные PRL-отрицательные клетки / поле). Двусторонний дисперсионный анализ. F: Типичные микрофотографии передней доли гипофиза мышей KO, умерщвленных во время проэструса. Стрелки указывают на BrdU-положительные лактотропы. Стрелки указывают на BrdU-положительные клетки.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0097383.g005

Пик проэструса циркулирующих уровней ПРЛ совпадает с наивысшей частотой апоптоза в передней доле гипофиза крысы [25]. Чтобы оценить, участвует ли проапоптотический эффект ПРЛ в обновлении клеток передней доли гипофиза, особенно во время проэструса, мы определили скорость апоптоза в передней доле гипофиза у мышей WT и PRLRKO, умерщвленных во время проэструса или диэструса (Рис. 6A – C). У мышей WT апоптоз был выше в проэструсе, чем в диэструсе (фиг. 6A). Когда передача сигналов PRLR была полностью отменена (то есть у мышей PRLRKO), количество апоптозных клеток передней доли гипофиза заметно уменьшилось по сравнению с мышами WT как во время диэструса, так и во время проэструса (рис.6А). Фактически, высокая скорость апоптоза всех клеток передней доли гипофиза и лактотропов, обычно наблюдаемая во время проэструса, отсутствовала у мышей PRLRKO (фиг. 6A, 6B). Напротив, никаких различий в скорости апоптоза нелактотропных клеток между диэструсом и проэструсом не наблюдалось (фиг. 6C). Взятые вместе, эти результаты предполагают, что i) основная субпопуляция, подразумеваемая в обороте клеток передней доли гипофиза у мышей во время проэструса, является субпопуляцией лактотропов, и ii) передача сигналов PRLR является основным регулятором апоптоза клеток, лежащим в основе этого процесса.

Рисунок 6. Апоптоз в лактотропных, но не в нелактотропных клетках варьирует в течение эстрального цикла и уменьшается у мышей PRLRKO.

Мышей дикого типа и PRLRKO (6–10 животных в группе) умерщвляли во время проэструса или диэструса. Апоптоз определяли с помощью анализа TUNEL на срезах ткани. A: Каждый столбец представляет среду ± SEM TUNEL-положительных клеток / поля. * p <0,05 по сравнению с WT диэструса, ∧p <0,01 по сравнению с WT диэструса, ∧∧p <0,01 по сравнению с WT проэструса. Двусторонний дисперсионный анализ с последующим тестом Тьюки.B: Каждый столбец представляет среду ± SEM апоптотических лактотропов (TUNEL-положительные PRL-положительные клетки / поле). * p <0,05 по сравнению с диэструсом, ∧∧p <0,01 по сравнению с WT проэструса. Двусторонний дисперсионный анализ с последующим тестом Тьюки. C: Каждый столбец представляет среду ± SEM апоптотических нелактотропных клеток (TUNEL-положительные PRL-отрицательные клетки / поле). ∧p <0,05 по сравнению с WT диэструса или WT проэструса. Двусторонний дисперсионный анализ с последующим тестом Тьюки. D: Типичные микрофотографии передней доли гипофиза мышей WT, умерщвленных во время проэструса.Стрелки указывают на TUNEL-положительный лактотроп.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0097383.g006

Пролактин регулирует экспрессию собственного рецептора во время эстрального цикла

Для дальнейшего изучения эффектов ПРЛ на контроль гомеостаза гипофизарных клеток во время проэструса мы определили профиль экспрессии изоформ PRLR в передних гипофизах самок мышей при возникновении апоптоза. С этой целью мы использовали трансгенных мышей, экспрессирующих чистый антагонист PRLR Δ1-9-G129R-hPRL, который конкурирует с эндогенным PRL за активацию PRLR [7], [24].В соответствии с предыдущими результатами с участием самцов мышей [24], мы наблюдали, что хроническая блокада передачи сигналов PRLR антагонистом PRLR приводила к увеличению веса гипофиза у самок мышей TG ^{Δ1–9-G129R-hPRL} по сравнению с однопометными мышами дикого типа (рис. 7B). ), тогда как масса тела не изменилась (рис. 7А).

Фиг. 7. Антагонизм PRLR увеличивает экспрессию длинной и короткой изоформ PRLR.

A, B: масса тела и масса гипофиза мышей WT и TG ^{Δ1–9-G129R-hPRL} , умерщвленных при диэструсе или проэструсе ∧p <0.05 по сравнению с соответствующим WT при диэструсе или проэструсе. Двусторонний дисперсионный анализ с последующим тестом Тьюки. C, D: Экспрессия изоформ PRLR в передней доле гипофиза мышей WT и TG ^{Δ1–9-G129R-hPRL} , умерщвленных во время диэструса или проэструса. ПЦР в реальном времени выполняли с использованием специфических праймеров для длинных и коротких (S1, S2, S3) изоформ PRLR. Короткая изоформа S1 не обнаружена. Каждый столбец представляет относительное приращение ± SEM по отношению к экспрессии PRLR _long (C) или PRLR _short (D) у контрольных животных (мыши WT при диэструсе) (n ≥ 5 животных / группа).* p <0,05 по сравнению с соответствующим диэструсом, ∧p <0,0,5 и ∧∧p <0,01 по сравнению с соответствующим WT на диэструсе. Двусторонний дисперсионный анализ с последующим тестом Тьюки.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0097383.g007

С помощью кПЦР, специфичной для изоформ, мы смогли обнаружить три изоформы PRLR в передней доле гипофиза как от WT, так и от TG ^{Δ1–9-G129R-hPRL} мышей (PRLR _long , PRLR _short S3 и, в гораздо меньшей степени, PRLR _short S2). Отношения экспрессии PRLR _{long /} PRLR _short в различных экспериментальных условиях (WT и TG ^{Δ1–9-G129R-hPRL} в проэструсе или диэструсе), которые были проанализированы в этом исследовании, показаны в таблице 2.У мышей WT преобладающая изоформа PRLR _long (в 36 раз выше короткой PRLR _{) экспрессируется при диэструсе. Экспрессия как PRLR long (фиг. 7C), так и PRLR short S3 (фиг. 7D) увеличивалась во время проэструса, но с гораздо более высокой амплитудой для последнего; в результате соотношение обеих изоформ упало почти до 1À1. У мышей TG ^{Δ1–9-G129R-hPRL} экспрессия PRLR long и PRLR short S3 была резко увеличена по сравнению с мышами WT во время диэструса (рис.7C, 7E), но снова PRLR long был очень преобладающим (57 раз). При проэструсе, в отличие от мышей WT, экспрессия PRLR long снижалась по сравнению с диэструсом, тогда как экспрессия PRLR short S3 не изменялась. Взятые вместе, эти результаты показывают, что экспрессия PRLR изменяется во время эстрального цикла специфическим для изоформ образом, что в конечном итоге влияет на соотношение длинных и коротких изоформ. Хроническая блокада передачи сигналов PRLR антагонистом изменяет регуляцию, специфичную для изоформ, которая обычно происходит во время эстрального цикла, что убедительно свидетельствует о том, что PRL модулирует экспрессию своего собственного рецептора в гипофизе.}

Обсуждение

Контроль клеточного обмена в передней доле гипофиза был тщательно изучен несколькими группами, включая нашу, с упором в основном на эндокринный эффект вышележащих нейромедиаторов и периферических гормонов / цитокинов, таких как дофамин [33], [34], эстрадиол [ 31], [32], [51], [63], TNF-α [56], [57], FasL [58], [59], TGF-β [48], [55] или IL-6 [ 64] и процитируем лишь некоторые из них. Однако аутокринная или паракринная регуляция обмена клеток гипофиза самими гормонами гипофиза изучена не так хорошо.Недавно было показано, что GH контролирует соматотропную функцию посредством внутрикринного механизма и что нарушение регуляции этого процесса участвует в развитии опухолей, секретирующих GH [65]. В передней доле гипофиза у женщин лактотропы составляют до 50% секретирующих гормоны клеток [36] и представляют собой популяцию с самой высокой пластичностью в железе, страдающую периодами пролиферации и апоптоза, которые жестко регулируются на протяжении эстрального цикла [10 ], [25]. Пролактин может действовать на клетки, продуцирующие ПРЛ, а также на соседние, не являющиеся лактотропами клетки, учитывая, что все они экспрессируют ПРЛ [11], [12], [21], [41].Фактически известно, что ПРЛ ингибирует собственный синтез и секрецию на уровне лактотропа [46]. Кроме того, мы недавно наблюдали, что ПРЛ контролирует обмен клеток передней доли гипофиза у самцов мышей посредством аутокринного / паракринного механизма [24]. В отличие от мужчин, регуляция функций клеток гипофиза во время полового цикла у грызунов зависит от кратковременного воздействия гормонов. По этой причине мы направили наши исследования на острые эффекты ПРЛ на обмен клеток передней доли гипофиза, чтобы определить, участвует ли этот гормон в контроле ремоделирования гипофиза.Мы обнаружили, что острая гиперпролактинемия, вызванная введением ПРЛ или антагонизмом к дофаминовым рецепторам, снижает пролиферацию клеток и увеличивает апоптоз, что указывает на то, что эти эффекты ПРЛ не зависят от допамина. Также мы обнаружили, что ПРЛ увеличивает скорость апоптоза и оказывает незначительное влияние на пролиферацию клеток, особенно у лактотропов. Другими словами, ПРЛ действует как антипролиферативный и проапоптотический аутокринный / паракринный фактор в гипофизе, особенно на лактотропные клетки, и этот эффект проявляется после кратковременной стимуляции, как это может происходить во время эстрального цикла.

Таким образом, мы исследовали, участвует ли проэструс PRL в регуляции пролиферации и апоптоза передней доли гипофиза во время эстрального цикла, используя модель мышей, в которой передача сигналов PRLR полностью отменена, то есть мыши PRLRKO. Животные дикого типа во время диэструса использовались в качестве контроля, поскольку на этой стадии цикла уровни ПРЛ низкие и, основываясь на предыдущих сообщениях на крысах [28], [30], мы ожидали найти базальные уровни пролиферации или апоптоза.

Хотя мы не наблюдали значительных различий в индексе пролиферации у мышей PRLRKO по сравнению с животными WT, сумма наших результатов, тем не менее, предполагает, что пик PRL также может способствовать снижению скорости пролиферации во время проэструса. Фактически, отсутствие значительного влияния на индекс пролиферации у мышей во время эстрального цикла может быть связано с выбором времени инъекции BrdU, который вводили за 24 часа до эвтаназии, то есть за день до ожидаемого проэструса или диэструса.Напротив, мы наблюдали, что скорость апоптоза в передней доле гипофиза у самок мышей была выше в период проэструса по сравнению с контрольными животными в период диэструса, что подтверждает наши ожидания. Глобальное снижение скорости апоптоза передней доли гипофиза и, кроме того, отсутствие различий в апоптозе между проэструсом и диэструсом, наблюдаемое у самок мышей PRLRKO, убедительно свидетельствует о том, что ПРЛ действует как проапоптотический сигнал во время эстрального цикла. Эти различия в скорости апоптоза не оказали заметного влияния на вес гипофиза (рис.5Б). Это неудивительно, поскольку в лучшем случае мы идентифицировали 1 или 2 апоптотических клетки на поле (рис. 5C, D), предполагая, что апоптоз должен иметь место в течение определенного количества времени, чтобы в конечном итоге повлиять на размер или вес гипофиза. Это подтверждается тем фактом, что гиперплазия гипофиза развивается у мышей PRLRKO в возрасте> 6 месяцев, несмотря на то, что значительное снижение апоптоза наблюдается уже в возрасте 2–3 месяцев (рис. 5C). Соответственно, вариации скорости апоптоза, происходящие во время эстрального цикла (4 дня), вероятно, недостаточно для влияния на вес гипофиза.В настоящем исследовании не было предпринято попыток определить абсолютное количество гипофизарных клеток в каждом состоянии. Таким образом, это исследование предоставляет первое доказательство того, что апоптотические и антипролиферативные эффекты ПРЛ участвуют в регуляции обмена клеток передней доли гипофиза во время эстрального цикла.

Ранее было показано, что у двойных мышей PRLRKO / D2RKO наблюдается более выраженная гиперплазия гипофиза и повышенный вес гипофиза по сравнению с одиночным аналогом D2RKO [23].Наши результаты могут объяснить, почему отмена передачи сигналов PRLR у мышей PRLKO или PRLRKO способствует гиперплазии гипофиза. У самок мышей PRLRKO гиперплазия гипофиза развивается с 6-месячного возраста, тогда как самцы мышей не показывают увеличения гипофиза до 18-месячного возраста [23]. У женщин скорость апоптоза и пролиферации резко и строго регулируется на каждой стадии эстрального цикла. Наши результаты показывают, что у самок мышей PRLRKO наблюдается прогрессирующий и накопительный эффект из-за отсутствия апоптотических и антипролиферативных действий PRL в каждом проэструсе.Эти результаты также могут объяснить, почему самки мышей PRLRKO развивают гиперплазию гипофиза раньше, чем самцы, хотя PRL также играет ключевую роль в регулировании ремоделирования гипофиза у самцов [24].

На основании представленных здесь данных о том, что ПРЛ, как и дофамин, регулирует гомеостаз передней доли гипофиза, контролируя пролиферацию и апоптоз клеток, наши результаты дополнительно подтверждают более раннюю гипотезу Шаффа и др. [23] о том, что дефицит этих двух отдельных путей приводит к дополнительным эффектам. о развитии опухолей гипофиза у двойных мышей PRLRKO / D2RKO.В соответствии с этой гипотезой мы также наблюдали, что хроническая блокада PRLR антагонистом Δ1-9-G129R-hPRL увеличивает вес гипофиза у самок мышей TG.

Основываясь на этих результатах, мы предлагаем общую модель, изображенную на рисунке 8. Во время проэструса высокие уровни циркулирующих эстрогенов повышают секрецию ПРЛ [36], которая, в свою очередь, вместе с самим эстрадиолом [32], [52] вызывает апоптоз клетки передней доли гипофиза. Кроме того, ПРЛ стимулирует высвобождение дофамина из дофаминергических нейронов гипоталамуса в портальные сосуды [66], [67].Дофамин, достигающий передней доли гипофиза, также может способствовать апоптозу [33], [34], наблюдаемому в железе на этой стадии эстрального цикла. Эстрадиол также увеличивает расщепление PRL в передней доле гипофиза на N-концевые фрагменты размером 16 кДа, которые, в свою очередь, вызывают апоптоз эстроген-зависимым образом [35] с помощью независимого от PRLR механизма [68].

Рис. 8. Предлагаемая модель модуляции апоптоза передней доли гипофиза во время эстрального цикла.

Во время проэструса всплеск циркулирующего эстрадиола (E2) (1) увеличивает секрецию ПРЛ (2), который вместе с самим E2 вызывает апоптоз клеток передней доли гипофиза (AP) (3, 3 ‘).ПРЛ стимулирует высвобождение гипоталамуса (4) дофамина (DA) (5), что также способствует апоптозу, наблюдаемому в железе на этой стадии эстрального цикла (6). ПП: Задний гипофиз.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0097383.g008

Молекулярные механизмы, с помощью которых ПРЛ регулирует гомеостаз гипофиза во время эстрального цикла, неизвестны. Поскольку разные изоформы PRLR обладают разными способностями активировать внутриклеточные сигнальные пути [4], [37], [38], конечные эффекты PRL зависят не только от количества, но и от типа изоформ рецепторов, экспрессируемых в тканях-мишенях.Таким образом, важно определить паттерн экспрессии PRLR, прежде чем двигаться дальше в исследованиях внутриклеточной передачи сигналов. В настоящем исследовании мы показываем, что передний гипофиз самок мышей экспрессирует короткие и длинные изоформы PRLR и что экспрессия обеих увеличивается в проэструсе. Это говорит о том, что экспрессия PRLR в передней доле гипофиза регулируется циркулирующими гормонами, уровни которых колеблются в течение эстрального цикла. Один из них — это сам ПРЛ, который может регулировать свои собственные функции, модулируя экспрессию своего рецептора.Соответственно, мы показали, что PRL ингибирует экспрессию своего рецептора, поскольку блокада PRLR у самок мышей приводит к повышенной экспрессии изоформ PRLR _long и PRLR _short , что напоминает то, что мы недавно сообщили для передней доли гипофиза у самцов [24]. Ранее сообщалось, что основной изоформой PRLR, экспрессируемой в передней доле гипофиза от препуберальных самок мышей, была PRLR _short , и что обработка PRL увеличивала экспрессию обеих изоформ рецептора [44].Отсутствие полового цикла у этих молодых животных могло объяснить расхождения с нашими данными. В другом исследовании сообщалось, что гиперпролактинемия, вызванная метоклопрамидом, не изменяет экспрессию PRLR в гипофизе ни у OVX, ни у интактных самок мышей [45]. Однако, поскольку в последнем исследовании не различали экспрессию PRLR на различных стадиях эстрального цикла, возможно, что уровни PRLR, о которых сообщалось, на самом деле представляют собой среднее значение на протяжении эстрального цикла, которое могло замаскировать эффект PRL, особенно во время проэструса. .

В проэструсе увеличение экспрессии PRLR _short намного превышает таковое для PRLR _long , что приводит к соотношению почти 1À1. Функциональный результат и физиологическое значение такой сложной регуляции экспрессии PRLR в настоящее время неизвестны. Фактически, переход от большого избытка PRLR _long (диэструс) к аналогичным количествам длинных и коротких изоформ (проэструс), по-видимому, участвует в проапоптотическом эффекте PRL при проэструсе. Хотя было показано, что ПРЛ проапоптотичен для других тканей или типов клеток (например,грамм. кератиноциты, хондроциты, клеточные линии, происходящие от миеломы человека) [50], апоптотический сигнальный механизм для PRLR пока не описан. Канонический сигнальный каскад PRLR, а именно каскад Jak2 / STAT5, как сообщается, в некоторых случаях приводит к проапоптотическим ответам за счет регуляции экспрессии белков семейства Bcl-2 [38], [69]. Однако, поскольку было показано, что PRLR _short оказывает доминирующий негативный эффект на активацию Jak2 / STAT5 с помощью PRLR _long [70], маловероятно, что увеличение экспрессии PRLR _short способствует такому механизму индукции апоптоза. при проэструсе.Ясно, что выяснение внутриклеточных механизмов, лежащих в основе проапоптотического эффекта ПРЛ во время проэструса, требует тщательного исследования во время репродуктивного цикла с использованием острой стимуляции ПРЛ и генетических моделей, используемых в этом исследовании; в настоящее время это исследуется в наших лабораториях.

Наши результаты свидетельствуют о том, что отсутствие проапоптотических и антипролиферативных эффектов, запускаемых PRLR, может играть роль в онкогенезе гипофиза. Действительно, сообщалось, что в пролактиномах человека снижена экспрессия PRLR [71] и что нефункциональная мутация гена PRLR может быть связана с наличием микроаденом [72].

В заключение, наши исследования показывают, что ПРЛ участвует в контроле обновления клеток передней доли гипофиза, поддерживая гомеостаз гипофиза на протяжении всего эстрального цикла. Следовательно, мы предполагаем, что хронический недостаток физиологического проапоптотического и антипролиферативного действия PRL и / или изменения в экспрессии PRLR могут способствовать изменениям в обновлении клеток передней доли гипофиза, что приводит к гиперплазии гипофиза и, в конечном итоге, к развитию опухоли.

Благодарности

Мы хотели бы поблагодарить Софи Берисси, Кристин Кайзер и персонал Центра животных на факультете Неккера, Пола Келли и Марианелу Кандольфи за полезные обсуждения, Мерседес Инсем и Кристину Депарчи из Института биомедицинских исследований и Пласиду Блас и Ариэля Бильордо. Laboratorio de Inmunogenética Клинической больницы «Хосе де Сан-Мартин» Университета Буэнос-Айреса за их компетентность.

Вклад авторов

Эксперимент задумал и разработал: JF DP VG NB JA SZ GJ AS. Выполнял эксперименты: JF SZ GJ JA MB FB. Проанализированы данные: JF DP VG. Предоставленные реагенты / материалы / инструменты анализа: VG NB AS DP. Написал статью: JF DP VG.

Список литературы

1. 1. Bole-Feysot C, Goffin V, Edery M, Binart N, Kelly PA (1998) Пролактин (PRL) и его рецептор: действия, пути передачи сигнала и фенотипы, наблюдаемые у мышей с нокаутом рецептора PRL.Endocr Rev 19: 225–268.
2. 2. Бен-Джонатан Н., ЛаПенсе CR, ЛаПенси Е.В. (2008) Что мы можем узнать от грызунов о пролактине у людей? Endocr Rev 29: 1–41.
3. 3. Фернандес I, Турен П., Гоффин В. (2010) Пролактин и опухолевый процесс человека. Дж. Нейроэндокринол 22: 771–777.
4. 4. Bernichtein S, Touraine P, Goffin V (2010) Новые концепции в биологии пролактина. J Endocrinol 206: 1–11.
5. 5. Гоффин В., Хоанг Д. Т., Богорад Р. Л., Невалайнен М. Т. (2011) Регулирование пролактина предстательной железы: женщина-игрок в мужской игре.Нат Рев Урол 8: 597–607.
6. 6. Clevenger CV, Furth PA, Hankinson SE, Schuler LA (2003) Роль пролактина в карциноме молочной железы. Endocr Rev 24: 1-27.
7. 7. Rouet V, Bogorad RL, Kayser C, Kessal K, Genestie C и др. (2010) Местный пролактин является мишенью для предотвращения распространения базальных / стволовых клеток в опухолях простаты. Proc Natl Acad Sci U S A 107: 15199–15204.
8. 8. Мелмед С. (2011) Патогенез опухолей гипофиза. Обзоры природы Эндокринология 7: 257–266.
9. 9. Двораковска Д., Гроссман А.Б. (2009) Патофизиология аденом гипофиза. Лучшая практика Res Clin Endocrinol Metab 23: 525–541.
10. 10. Candolfi M, Zaldivar V, Jaita G, Seilicovich A (2006) Обновление клеток передней доли гипофиза во время эстрального цикла. Front Horm Res 35: 9–21.
11. 11. Chiu S, Koos RD, Wise PM (1992) Обнаружение мРНК рецептора пролактина (PRL-R) в гипоталамусе и гипофизе крыс. Эндокринология 130: 1747–1749.
12. 12. Morel G, Ouhtit A, Kelly PA (1994) Иммунореактивность рецептора пролактина в передней доле гипофиза крысы. Нейроэндокринология 59: 78–84.
13. 13. Brockman JL, Schroeder MD, Schuler LA (2002) PRL активирует промотор циклина D1 через путь Jak2 / Stat. Мол эндокринол 16: 774–784.
14. 14. Shiu RP, Elsholtz HP, Tanaka T., Friesen HG, Gout PW и др. (1983) Рецептор-опосредованное митогенное действие пролактина в клеточной линии лимфомы крысы. Эндокринология 113: 159–165.
15. 15. Невалайнен М.Т., Valve EM, Инглтон П.М., Нурми М., Мартикайнен П.М. и др. (1997) Рецепторы пролактина и пролактина экспрессируются и функционируют в простате человека. Дж. Клин Инвест 99: 618–627.
16. 16. Бакли А.Р. (2001) Пролактин, фактор роста и выживания лимфоцитов. Волчанка 10: 684–690.
17. 17. DeVito WJ, Okulicz WC, Stone S, Avakian C (1992) Стимулированный пролактином митогенез культивируемых астроцитов. Эндокринология 130: 2549–2556.
18. 18. Huang C, Snider F, Cross JC (2009) Рецептор пролактина необходим для нормального гомеостаза глюкозы и модуляции массы бета-клеток во время беременности. Эндокринология 150: 1618–1626.
19. 19. Krown KA, Wang YF, Ho TW, Kelly PA, Walker AM (1992) Изоформа 2 пролактина как аутокринный фактор роста для клеток Gh4. Эндокринология 131: 595–602.
20. 20. Келли М.А., Рубинштейн М., Аса С.Л., Чжан Г., Саез С. и др. (1997) Гиперплазия лактотрофа гипофиза и хроническая гиперпролактинемия у мышей с дефицитом дофаминового рецептора D2.Нейрон 19: 103–113.
21. 21. Saiardi A, Bozzi Y, Baik JH, Borrelli E (1997) Антипролиферативная роль дофамина: потеря рецепторов D2 вызывает гормональную дисфункцию и гиперплазию гипофиза. Нейрон 19: 115–126.
22. 22. Cruz-Soto ME, Scheiber MD, Gregerson KA, Boivin GP, ​​Horseman ND (2002) Канцерогенез гипофиза у мышей с нарушенным геном пролактина. Эндокринология 143: 4429–4436.
23. 23. Schuff KG, Hentges ST, Kelly MA, Binart N, Kelly PA и др.(2002) Отсутствие передачи сигналов рецептора пролактина у мышей приводит к пролиферации лактотрофов и пролактиномам за счет дофамин-зависимых и независимых механизмов. Дж. Клин Инвест 110: 973–981.
24. 24. Феррарис Дж., Бутильон Ф., Бернадет М., Сейликович А., Гоффин В. и др. (2012) Антагонизм рецептора пролактина в передней доле гипофиза мыши: влияние на обмен клеток и экспрессию рецептора пролактина. Am J Physiol Endocrinol Metab 302: E356–364.
25. 25. Зарате С., Залдивар В., Джайта Г., Магри Л., Радл Д. и др.(2010) Роль эстрогенов в ремоделировании передней доли гипофиза во время эстрального цикла. Front Horm Res 38: 25–31.
26. 26. Чайлдс AJ (2006) Гонадотропы и лактотропы. В: Neill JD, Физиология репродукции: Elsiever.
27. 27. Нолан Л.А., Кавана Э., Лайтман С.Л., Леви А. (1998) Контроль популяции клеток передней доли гипофиза: обмен базальных клеток и эффекты адреналэктомии и лечения дексаметазоном. Дж. Нейроэндокринол 10: 207–215.
28. 28. Oishi Y, Okuda M, Takahashi H, Fujii T, Morii S (1993) Клеточная пролиферация в передней доле гипофиза нормальных взрослых крыс: влияние пола, эстрального цикла и циркадных изменений.Anat Rec 235: 111–120.
29. 29. Такахаши С., Окадзаки К., Кавашима С. (1984) Митотическая активность пролактиновых клеток в гипофизе самцов и самок крыс разного возраста. Исследования клеток и тканей 235: 497–502.
30. 30. Hashi A, Mazawa S, Kato J, Arita J (1995) Пентобарбитальная анестезия во время проэстрального полудня блокирует пролиферацию лактотрофов, происходящую во время течки у самок крыс. Эндокринология 136: 4665–4671.
31. 31. Залдивар В., Магри М.Л., Зарате С., Джайта Г., Эйджо Г. и др.(2009) Эстрадиол увеличивает соотношение Bax / Bcl-2 и вызывает апоптоз в передней доле гипофиза. Нейроэндокринология 90: 292–300.
32. 32. Зарате С., Джайта Дж., Залдивар В., Радл Д. Б., Эйджо Г. и др. (2009) Эстрогены оказывают быстрое апоптотическое действие на клетки передней доли гипофиза. Am J Physiol Endocrinol Metab 296: E664–671.
33. 33. Радл Д.Б., Феррарис Дж., Боти В., Сейликович А., Саркар Д.К. и др. (2011) Индуцированный дофамином апоптоз лактотропов опосредуется короткой изоформой рецептора D2.PLoS One 6: e18097.
34. 34. Радл Д.Б., Сарате С., Джайта Дж., Феррарис Дж., Залдивар В. и др. (2008) Апоптоз лактотрофов, вызванный активацией рецептора D2, зависит от эстрогена. Нейроэндокринология 88: 43–52.
35. 35. Феррарис Дж., Радл Д. Б., Сарате С., Джайта Дж., Эйджо Дж. И др. (2011) N-концевые фрагменты, производные от пролактина, вазоингибины, являются проапоптоптическими и антипролиферативными средствами в передней доле гипофиза. PLoS One 6: e21806.
36. 36. Freeman ME, Kanyicska B, Lerant A, Nagy G (2000) Пролактин: структура, функция и регуляция секреции.Physiol Rev 80: 1523–1631.
37. 37. Sangeeta Devi Y, Halperin J (2013) Репродуктивные действия пролактина, опосредованные короткими и длинными изоформами рецепторов. Mol Cell Endocrinol.
38. 38. Binart N, Bachelot A, Bouilly J (2010) Влияние изоформ рецепторов пролактина на воспроизводство. Тенденции метаболизма эндокринола 21: 362–368.
39. 39. Jabbour HN, Kelly PA (1997) Подтипы рецепторов пролактина: возможный режим тканеспецифической регуляции функции пролактина.Откровение 2: 14–18.
40. 40. Кларк Д.Л., Линцер Д.И. (1993) Изменения экспрессии рецептора пролактина во время беременности в яичнике мыши. Эндокринология 133: 224–232.
41. 41. Nagano M, Kelly PA (1994) Распределение тканей и регуляция экспрессии гена рецептора пролактина крысы. Количественный анализ методом полимеразной цепной реакции. J Biol Chem 269: 13337–13345.
42. 42. Binart N, Imbert-Bollore P, Baran N, Viglietta C, Kelly PA (2003) Короткая форма рецептора пролактина (PRL) способна спасти маммопоэз у гетерозиготных мышей с рецептором PRL.Мол эндокринол 17: 1066–1074.
43. 43. Bouilly J, Sonigo C, Auffret J, Gibori G, Binart N (2012) Механизмы передачи сигналов пролактина в яичниках. Эндокринол клеток Mol 356: 80–87.
44. 44. Шао Р., Нуту М., Вейдегард Б., Эгечиоглу Э., Фернандес-Родригес Дж. И др. (2008) Различия в рецепторе пролактина (PRLR) в фаллопиевых трубах мыши и человека: данные о множественных регуляторных механизмах, контролирующих экспрессию изоформы PRLR у мышей. Biol Reprod 79: 748–757.
45. 45.Amaral VC, Maciel GA, Carvalho KC, Marcondes RR, Soares JM Jr, et al .. (2013) Эффекты гиперпролактинемии, вызванной метоклопрамидом, на экспрессию рецепторов пролактина гипофиза и матки. Общая и сравнительная эндокринология.
46. 46. Devost D, Boutin JM (1999) Ауторегуляция гена пролактина крысы у лактотрофов. Mol Cell Endocrinol 158: 99–109.
47. 47. Ян Г.А., Даниэль Н., Жоливет Дж., Белэр Л., Боле-Фейсот С. и др. (1997) Изучение in vivo внутриклеточной передачи сигналов пролактина (ПРЛ) во время лактогенеза у крыс: путь JAK / STAT активируется ПРЛ в молочной железе, но не в печени.Biol Reprod 57: 894–900.
48. 48. Recouvreux MV, Guida MC, Rifkin DB, Becu-Villalobos D, Diaz-Torga G (2011) Активный и общий трансформирующий фактор роста-бета1 по-разному регулируются дофамином и эстрадиолом в гипофизе. Эндокринология 152: 2722–2730.
49. 49. Орманди С.Дж., Камю А., Барра Дж., Дамотт Д., Лукас Б. и др. (1997) Нулевая мутация гена рецептора пролактина вызывает множественные репродуктивные дефекты у мышей. Genes Dev 11: 167–178.
50. 50.Ferraris J, Bernichtein S, Pisera D, Goffin V (2013) Использование антагониста рецептора пролактина для лучшего понимания регуляции пролактина гомеостаза гипофиза. Нейроэндокринология.
51. 51. Сарате С., Джайта Дж., Феррарис Дж., Эйджо Дж., Магри М.Л. и др. (2012) Эстрогены индуцируют экспрессию альфа-изоформ мембран-ассоциированных рецепторов эстрогена в лактотропах. PLoS One 7: e41299.
52. 52. Писера Д., Кандольфи М., Наварра С., Феррарис Дж., Залдивар В. и др. (2004) Эстрогены повышают чувствительность передней доли гипофиза к апоптозу.Am J Physiol Endocrinol Metab 287: E767–771.
53. 53. Сильвейра П., Каталано П.Н., Люкс-Лантос В., Либертун С. (2007) Влияние проэстральной среды на экспрессию рецепторов орексина и препроорексина в гипоталамусе и гипофизе крыс: действие Цетрореликса и нембутала. Am J Physiol Endocrinol Metab 292: E820–828.
54. 54. Ливак К.Дж., Шмиттген Т.Д. (2001) Анализ данных относительной экспрессии генов с использованием количественной ПЦР в реальном времени и метода 2 (-Delta Delta C (T)).Методы 25: 402–408.
55. 55. Recouvreux MV, Camilletti MA, Rifkin DB, Becu-Villalobos D, Diaz-Torga G (2012) Аналоги тромбоспондина-1 (TSP-1) ABT-510 и ABT-898 ингибируют рост пролактиномы и восстанавливают активный гипофизарный трансформирующий фактор роста-бета1 ( TGF-beta1). Эндокринология 153: 3861–3871.
56. 56. Candolfi M, Zaldivar V, De Laurentiis A, Jaita G, Pisera D, et al. (2002) TNF-альфа индуцирует апоптоз лактотропов самок крыс. Эндокринология 143: 3611–3617.
57. 57. Candolfi M, Jaita G, Zaldivar V, Zarate S, Ferrari L и др. (2005) Прогестерон противодействует разрешающему действию эстрадиола на апоптоз клеток передней доли гипофиза, вызванный фактором некроза опухоли альфа. Эндокринология 146: 736–743.
58. 58. Джайта Дж., Сарате С, Феррари Л, Радл Д, Феррарис Дж и др. (2011) Гонадные стероиды модулируют Fas-индуцированный апоптоз лактотропов и соматотропов. Эндокринная 39: 21–27.
59. 59. Джайта Г., Кандольфи М., Залдивар В., Зарате С., Феррари Л. и др.(2005) Эстрогены активируют апоптотический путь Fas / FasL у лактотропов. Эндокринология 146: 4737–4744.
60. 60. Бен-Джонатан Н., Хнаско Р. (2001) Дофамин как ингибитор пролактина (ПРЛ). Endocr Rev 22: 724–763.
61. 61. Flurkey K, Gee DM, Sinha YN, Wisner JR Jr, Finch CE (1982) Влияние возраста на лютеинизирующий гормон, прогестерон и пролактин у мышей C57BL / 6j с проэстральными и ациклическими формами. Биол Репрод 26: 835–846.
62. 62. Майкл С.Д. (1976) Пролактин плазмы и прогестерон во время эстрального цикла у мышей.Proc Soc Exp Biol Med 153: 254–257.
63. 63. Залдивар В., Магри М.Л., Зарате С., Джайта Г., Эйджо Г. и др. (2011) Эстрадиол увеличивает экспрессию TNF-альфа и рецептора TNF 1 в лактотропах. Нейроэндокринология 93: 106–113.
64. 64. Arzt E, Buric R, Stelzer G, Stalla J, Sauer J, et al. (1993) Участие интерлейкина в регуляции роста клеток передней доли гипофиза: эффекты IL-2 и IL-6. Эндокринология 132: 459–467.
65. 65. Чеснокова В., Чжоу С., Бен-Шломо А., Зонис С., Тани Ю. и др.(2013) Гормон роста является мишенью клеточного старения в гипофизарных и негипофизарных клетках. Proc Natl Acad Sci U S A 110: E3331–3339.
66. 66. Ма Ф.Й., Андерсон Г.М., Ганн Т.Д., Гоффин В., Граттан Д.Р. и др. (2005) Пролактин специфически активирует сигнальный преобразователь и активатор транскрипции 5b в нейроэндокринных дофаминергических нейронах. Эндокринология 146: 5112–5119.
67. 67. Ma FY, Grattan DR, Goffin V, Bunn SJ (2005) Регулируемая пролактином активность тирозингидроксилазы и экспрессия рибонуклеиновой кислоты-мессенджера в медиобазальных культурах гипоталамуса: дифференциальная роль специфических протеинкиназ.Эндокринология 146: 93–102.
68. 68. Клапп С., Аранда Дж., Гонсалес С., Езёрски М.С., Мартинес де ла Эскалера Г. (2006) Вазоингибины: эндогенные регуляторы ангиогенеза и сосудистой функции. Тенденции в эндокринологии и метаболизме 301–307.
69. 69. Станкевич Т.Р., Лаукс Ф.А., Шредер Э.К., Невалайнен М.Т., Тайлер К.Л. и др. (2012) Сигнальный преобразователь и активатор транскрипции-5 опосредует апоптоз нейронов, вызванный ингибированием активности Rac GTPase. J Biol Chem 287: 16835–16848.
70. 70. Berlanga JJ, Garcia-Ruiz JP, Perrot-Applanat M, Kelly PA, Edery M (1997) Короткая форма рецептора пролактина (PRL) подавляет индукцию PRL промотора гена бета-казеина. Мол эндокринол 11: 1449–1457.
71. 71. Jin L, Qian X, Kulig E, Scheithauer BW, Calle-Rodrigue R, et al. (1997) Рибонуклеиновая кислота, мессенджер рецептора пролактина в нормальных и неопластических тканях гипофиза человека. J Clin Endocrinol Metab 82: 963–968.
72. 72. Ньюи П.Дж., Горвин С.М., Клеланд С.Дж., Уилберг С.Б., Бридж М. и др.(2013) Мутантный рецептор пролактина и семейная гиперпролактинемия. N Engl J Med 369: 2012–2020.

(PDF) Гонадотропы и лактотропы

60. Коэн, Л. Е., и Радовик, С. (2002). Молекулярная основа

комбинированных дефицитов гормонов гипофиза Endocr. Ред. 23,

431–442.

61. Шэн, Х. З., Жаданов, А. Б., Мосинджер, А. Б., Фуджи, Т.,

Бертуцци, С., Гринберг, А., Ли, Э. Дж., Хуанг, С.П., Махон К. А.,

и Вестфаль Х. (1996). Спецификация клонов клеток гипофиза

геном гомеобокса LIM Lhx3. Science 278, 1004–1007.

62. Шенг, Х. З., Морияма, К., Ямасита, Т., Ли, Х., Поттер, С. С.,

Махон, К. А. и Вестфаль, Х. (1997). Многоступенчатый контроль

органогенеза гипофиза. Science 278, 1809–1812.

63. Трейер М. и Розенфельд М. Г. (1996). Гипоталамическая ось

гипофиза: совместное развитие двух органов.Curr. Мнение. Cell

Biol. 8, 833–842.

64. Эриксон, Дж., Норлин, С., Джессел, Т. М., и Эдлунд, Т. (1998).

Интегрированная передача сигналов FGF и BMP контролирует прогрессирование

дифференцировки клеток-предшественников и появление паттерна в

эмбриональной передней доле гипофиза. Разработка 125, 1005–1015.

65. Ча, К. Б., Дуглас, К. Р., Поток, М. С., Лян, Х., Джонс, С. Н.,

,

и Кампер, С. А. (2004). Передача сигналов WNT5A влияет на форму железы гипофиза

.Мех. Dev. 121, 183–194.

66. Treier, M., O’Connell, S., Gleiberman, A., Price, J., Szeto, DP,

Burgess, R., Chuang, PT., McMahon, AP, and Rosenfeld,

МГ (2001). Передача сигналов Hedgehog необходима для развития железы гипофиза

. Развитие 128, 377–366.

67. Трейер, М., Глейберман, А.С., О’Коннелл, С.М., Сзето, Д.П.,

МакМахон, Дж. А., МакМахон, А. П. и Розенфельд, М. Г.

(1998). Требования к многоступенчатой ​​передаче сигналов для органогенеза гипофиза

in vivo.Genes Dev. 12, 1691–1704.

68. Жан Д., Бернейр Г. и Грусс П. (1999). Six6 (Optx2) представляет собой

новый мышиный ген гомеобокса, родственный Six3, который разграничивает

презумптивную ось гипофиза / гипоталамуса и вентральный оптический стебель

. Мех. Dev. 84, 31–40.

69. Hermesz, E., Mackem, S., and Mahon, K.A. (1995). Rpx:

новый гомеобоксный ген, ограниченный передним отделом, прогрессивно активировал

в прехордальной пластинке, передней нервной пластинке и сумке Ратке

эмбриона мыши.Развитие 122, 41–52.

70. Томас П.К., Джонсон Б.В., Ратьен Дж. И Ратьен П.

(1995). Последовательность, геномная организация и экспрессия нового гена гомеобокса

Hesx1. J. Biol. Chem. 270, 3869–3875.

71. Куирк Дж. И Браун П. (2002). Гомеодоменный белок Hesx1

репрессирует транскрипцию в качестве мономера и противодействует активации транс-

определенных сайтов в качестве гомодимера. J. Mol. Эндокринол.

28, 193–205.

72. Сзето Д. П., Райан А. К., О’Коннелл С. М. и Розенфельд М. Г.

(1996). P-OTX: гомеодоменный фактор

, взаимодействующий с PIT-1, экспрессируемый во время развития передней доли гипофиза. Proc.

Нац. Акад. Sci. США 93, 7706–7710.

73. Lanctot, C., Gauthier, Y., and Drouin, J. (1999). Гипофиз

гомеобокс 1 (Ptx1) дифференциально экспрессируется во время развития гипофиза

. Эндокринология 140, 1416–1422.

74.Tremblay, J. J., Lanctot, C., and Drouin, J. (1988). Пан-

активатор транскрипции гипофиза, Ptx1 (гипофизарный гомеобокс 1),

действует в синергии с SF-1 и Pit1 и является вышестоящим регулятором

гена Lim-гомеодомена Lim3 / Lhx3. Мол.

Эндокринол. 12, 428–441.

75. Tremblay, J. J., Marcil, A., Gauthier, Y., and Drouin, J.

(1999). Ptx1 регулирует активность SF-1 посредством взаимодействия, которое

имитирует роль лиганд-связывающего домена.EMBO J. 18,

3431–3441.

76. Tremblay, J. J., and Drouin, J. (1999). Egr-1 является нижестоящим эффектором

GnRH и синергизирует за счет прямого взаимодействия с

Ptx и SF-1 для усиления транскрипции β-гена лютеинизирующего гормона

. Мол. Клетка. Биол. 19, 2567–2576.

77. Гейдж П. Дж. И Кампер С. А. (1977). Гипофизарный гомеобокс 2,

, новый член семейства генов гомеобокса

, связанных с бикоидом, является потенциальным регулятором формирования передней структуры.

Hum. Мол. Genet. 6, 457–464.

78. Сзето, Д.П., Родригез-Эстабан, К., Райан, А.К., О’Коннелл,

С.М., Лю, Ф., Киусси, К., Глейберман, А.С., Изписуа-Бельмонте,

JC, и Розенфельд, MG (1999). Роль связанного с Bicoid гомеодоменного фактора

Pitx1 в спецификации морфогена задней конечности-

esis и развития гипофиза. Genes Dev. 13, 484–494.

79. Гейдж П. Дж., Сух Х. и Кампер С. А. (1999). Требуемая дозировка —

Pitx2 для развития множества органов.

Развитие 126, 4643–4651.

80. Жаданов А. Б., Бертуцци С., Тайра М., Давид И. Б. и

Вестфаль Х. (1995). Паттерн экспрессии гена гомеобокса Lhx3 класса LIM

мыши в подмножествах нервной и нейро-

эндокринных тканей. Dev. Дин. 202, 354–364.

81. Мбикай М., Тадрос Х., Сейдах Н. Г. и Симпсон Э. М.

(1995). Картирование сцепления гена LIM-гомеопротеина

LIM3 (локус lhx3) с хромосомой 2 мыши.Мамм. Геном 6,

818–819.

82. Бах И., Родс С. Дж., Пирс Р. В., Хайнцель Т., Глосс Б.,

Скалли К. М., Савченко П. Э. и Розенфельд М. Г. (1995).

P-Lim, фактор гомеодомена LIM, экспрессируется в течение

коммитов гипофизарного органа и клеток и синергизирует с

Pit-1. Proc. Natl. Акад. Sci. США 92, 2720–2724.

83. Нетчин, И. Собриер, М.-Л. Круде, Х., Шнабель, Д., Мэгни, М.,

Маркос, Э., Дурье, Б., Каше, В., Моерс, А., Гуссенс, М.,

,

Грутерс, А., и Амселем, С. (2000). Мутации в Lhx3

приводят к новому синдрому, который проявляется комбинированной недостаточностью гормона гипофиза

. Nat. Genet. 25, 182–186.

84. Флак, К., Деладоуи, Дж., Рутисхаузер, К., Эбл, А., Марти, У.,

Ву, В., и Маллис, П. Е. (1998). Фенотипическая изменчивость в семейном комбинированном дефиците гормона гипофиза

, вызванном мутацией гена

PROP1, приводящей к замене

Arg → Cys в кодоне 120 (R120C).J. Clin. Эндокринол. Метаб.

83, 3727–3734.

85. Андерсен Б., Пирс Р. В., Дженн К., Сорсон М., Лин С. К.,

Бартке А. и Розенфельд М. Г. (1995). Ген карлика Эймса

необходим для активации гена Pit-1. Dev. Биол. 172, 495–503.

86. Сорсон, М. В., Ву, В., Дасен, Дж. С., Флинн, С. Е., Норман,

Диджей, О’Коннелл, С. М., Гуковски, И., Каррьер, К., Райан, АК,

Миллер , А.П., Ву, Л., Глейберман, А.С., Андерсен Б.,

Бимер, В. Г. и Розенфельд, М. Г. (1996). Гипофизарное происхождение

Пророк определил гомеодоменный фактор ямы-1

дефектный в карликовости Эймса. Nature 384, 327–333.

87. Wu, W., Cogan, JD, Pfaffle, RW, Dasen, JS, Frisch, H.

O’Connell, SM, Flynn, SE, Brown, MR, Mullis, PE,

Parks, JS , Филлипс, Дж. А., и Розенфельд, М. Г. (1998).

Мутации в PROP1 вызывают семейную комбинированную недостаточность гормона

гипофиза.Nat. Genet. 18, 147–149.

88. Долле П., Кастрилло Дж. Л., Тейл Л. Э., Деринк Т., Эллисман М.,

и Карин М. (1990). Экспрессия белка GHR-1 в гипофизах мышей

коррелирует как во времени, так и в пространстве с началом активности гена гормона роста

. Cell 60, 809–820.

89. Симмонс, Д. М., Восс, Дж. У., Ингрэхэм, Х. А., Холлоуэй, Дж. М.,

Бройд, Р. С., Розенфельд, М. Г. и Суонсон, Л. В. (1990).

Фенотипы клеток гипофиза включают специфичную для клеток мРНК Pit-1

трансляцию и синергетические взаимодействия с другими классами факторов транскрипции

.Genes Dev. 4, 695–711.

90. Родс, С. Дж., Чен, Р., ДиМаттиа, Г. Э., Скалли, К. М., Калла,

,

К. А., Лин, С. К., Ю, В. К. и Розенфельд, М. Г. (1993). Тканеспецифический энхансер

придает Pit-1-зависимый морфоген

индуцибельности и ауторегуляции гена pit-1. Genes Dev.

7, 913–932.

91. Розенфельд, М. Г., Бриата, П., Дасен, Дж., Глейберман, А. С.,

Киусси, К., Лин, К., О’Коннелл, С. М., Райан, А., Сзето, Д. П.,

и Трейер, М. (2000). Многоступенчатая передача сигналов и транскрипционные требования

для органогенеза гипофиза in vivo. Недавняя прог.

Horm. Res. 55, 1–13.

92. Япон М. А., Рубинштейн М. и Лоу М. Дж. (1994). In situ

гибридизационный анализ гена гормона передней доли гипофиза

1564 / ГЛАВА 29

Протеом человека в гипофизе

Гипофиз (также называемый гипофизом) — это гормональная железа двойного эмбрионального происхождения: передняя эндокринная железа и задняя нейрональная железа.Передняя доля делится на три области: pars distalis, pars tuberalis и pars intermedia. Эти структуры состоят в основном из эпителиальных клеток, продуцирующих гормоны (соматотропы, кортикотропы, тиреотропы, гонадотропы и лактотропы), которые хранят гормоны и другие молекулы в секреторных гранулах, которые затем попадают в кровоток и способствуют дальнейшему воздействию в периферических тканях. Задняя доля состоит в основном из немиелинизированных аксонов секреторных нейрональных клеток гипоталамуса, супраоптических и паравентрикулярных ядер гипоталамуса, а также питуицитов, типа глиальных клеток, которые поддерживают хранение и высвобождение гормонов.Нейрогипофизарные гормоны, содержащие антидиуретические гормоны и окситоцин, перемещаются по аксонам от нейронов гипоталамуса к нервным окончаниям в задней доле гипофиза, особенно к нервной части — основной структуре задней железы. Анализ транскриптома показывает, что 75% (n = 14719) всех белков человека (n = 19670) экспрессируются в гипофизе, и 353 из этих генов демонстрируют повышенную экспрессию в гипофизе по сравнению с другими типами тканей.

• 353 повышенных гена
• 26 обогащенных генов
• 111 групп обогащенных генов
• Гипофиз имеет наибольшую групповую экспрессию генов, общих с мозгом
• Передняя доля гипофиза включает пять линий специализированных эндокринных клеток

Рисунок 1.Схематический рисунок гипофиза и его положение под гипоталамусом.

Транскриптом гипофиза

Анализ транскриптома гипофиза может быть визуализирован в отношении специфичности и распределения транскрибируемых молекул мРНК (рис. 1). Специфичность показывает количество генов с повышенной или не повышенной экспрессией в гипофизе по сравнению с другими тканями. Повышенное выражение включает три подкатегории типа повышенного выражения:

• Ткань обогащена: уровень мРНК в гипофизе по крайней мере в четыре раза выше по сравнению с любыми другими тканями.
• Обогащенная группа: по крайней мере, в четыре раза выше средний уровень мРНК в группе из 2-5 тканей по сравнению с любой другой тканью.
• Улучшенная ткань: по крайней мере, в четыре раза выше уровень мРНК в гипофизе по сравнению со средним уровнем во всех других тканях.

Распределение, с другой стороны, визуализирует, сколько генов имеют или не имеют обнаруживаемых уровней (NX≥1) транскрибированных молекул мРНК в гипофизе по сравнению с другими тканями. Как видно из Таблицы 1, все гены с повышенным уровнем гипофиза классифицируются как:

• Обнаружен в одиночном: обнаружен в отдельной ткани
• Обнаружен в некоторых: Обнаружен более чем в одной, но менее чем в одной трети тканей
• Обнаружен во многих: Обнаружен по крайней мере в трети, но не во всех тканях
• Обнаружен во всех: Обнаружен во всех тканях

Рисунок 1.(A) Распределение всех генов по пяти категориям на основе специфичности транскриптов в гипофизе, а также во всех других тканях. (B) Распределение всех генов по шести категориям на основе обнаружения транскриптов (NX? 1) в гипофизе, а также во всех других тканях.

Как показано на рисунке 1, 353 гена демонстрируют некоторый уровень повышенной экспрессии в гипофизе по сравнению с другими тканями. Три категории генов с повышенной экспрессией в гипофизе по сравнению с другими органами показаны в таблице 1.В таблице 2 определены 12 генов с наибольшим обогащением в гипофизе.

Таблица 1. Количество генов в подразделяемых категориях повышенной экспрессии в гипофизе.

		Распространение в 37 тканях
		Обнаружено в одиночку	Обнаружено в некоторых	Обнаружено во многих	Обнаружено во всех	Всего
Специфичность	Обогащенная ткань	2	16	8	0	26
	Групповое обогащение	0	56	55	0	111
	Улучшенная ткань	0	63	133	20	216
	Всего	2	135	196	20	353

Таблица 2.12 генов с самым высоким уровнем экспрессии в гипофизе. «Тканевое распределение» описывает обнаружение транскрипта (NX? 1) в гипофизе, а также во всех других тканях. «мРНК (ткань)» показывает уровень транскрипта в гипофизе в виде значений NX. «Оценка тканевой специфичности (TS)» соответствует кратному изменению между уровнем экспрессии в гипофизе и ткани со вторым по величине уровнем экспрессии.

Джин	Описание	Распределение тканей	мРНК (ткань)	Оценка тканевой специфичности
ФШБ	субъединица бета фолликулостимулирующего гормона	Обнаружен в одиночном	70.7	90
PRL	пролактин	Обнаружен в некоторых	1739,5	81
ТШБ	тиреотропный гормон бета	Обнаружен в некоторых	192,4	77
ПОУ1Ф1	ПОУ гомеобокс 1 класса 1	Обнаружен в некоторых	138,8	49
POMC	проопиомеланокортин	Обнаружен в некоторых	811.1	36
GHRHR	Рецептор рилизинг-гормона гормона роста	Обнаружен в некоторых	108,9	36
АВПР1Б	рецептор аргинина вазопрессина 1B	Обнаружен в некоторых	52,8	23
GPR50	G-рецептор, связанный с белком 50	Обнаружен в некоторых	64.9	21
GNRHR	Рецептор рилизинг-гормона гонадотропина	Обнаружен в некоторых	56,6	14
LHB	бета-полипептид лютеинизирующего гормона	Обнаружен в некоторых	301,4	13
LHX3	Гомеобокс LIM 3	Обнаружен в некоторых	33,4	13
IGSF1	Член суперсемейства иммуноглобулинов 1	Обнаружено во многих	138.7	9

Повышенная экспрессия белков в гипофизе

Углубленный анализ повышенных генов в гипофизе с использованием профилирования белков на основе антител позволил нам создать карту того, где соответствующие белки экспрессируются в переднем (адено) гипофизе.

Белки и гормоны аденогипофиза

Секреция гормона передней доли гипофиза находится под влиянием гормонов, высвобождающих гормоны гипоталамуса, и стимулирует высвобождение нескольких различных гормонов.

Гипоталамический тиреотропин-рилизинг-гормон связывает рецептор тиреотропин-рилизинг-гормона (TRHR), который, в свою очередь, стимулирует тиреотропные клетки к высвобождению тиреотропного гормона (TSHB). Сходным образом секреция проопиомеланокортина (ПОМК) кортикотропами стимулируется связыванием кортикотропин-рилизинг-гормона (CRH) с рецептором (CRHR1). POMC является предшественником АКТГ, опиоидных пептидов и альфа-МСГ. Кроме того, высвобождение фолликулостимулирующего гормона (FSHB) и лютеинизирующего гормона (LHB) зависит от стимуляции рецептора гонадотропин-рилизинг-гормона (GNRHR) гипоталамическим гонадотропин-высвобождающим гормоном (GNRh2).

TRHR
TSHB

CRHR1
POMC

GNRHR
ФСХБ
LHB

Пролактин (ПРЛ) — это секретируемый гормон передней доли гипофиза, который действует как регулятор роста многих тканей и необходим для стимуляции лактации.Ген (AVPR1B) кодирует G-связанный рецептор аргининового вазопрессина. Рецептор AVPR1B экспрессируется в передней доле гипофиза и участвует в высвобождении АКТГ. Другой белок, галанин (GAL), представляет собой физиологически активный нейропептид, который участвует в ноцицепции, питании и энергетическом гомеостазе, осмотической регуляции и водном балансе. Иммунореактивность галанина может наблюдаться не только в гипофизе, но и в гипоталамусе.

PRL
AVPR1B
GAL

Белки, участвующие в дифференцировке аденогипофизарных клеток по типу

Клеточная дифференцировка передней доли гипофиза зависит от конкретных факторов транскрипции.Считается, что PROP1 в основном участвует в дифференцировке гонадотропов, а также соматотропов и лактотропов. T-Pit (член семейства T-box TBX19) регулирует клон POMC и кортикотрофы. В то время как фактор транскрипции Pit-1, кодируемый геном POU1F1, определяет клон лактотропов, соматотропов и тиреотропов. Маркеры происхождения различных факторов транскрипции полезны при классификации нейроэндокринных опухолей гипофиза.

PROP1
TBX19
POU1F1

Экспрессия гена разделяется между гипофизом и другими тканями

В гипофизе экспрессируется 111 генов, обогащенных группами.Обогащенные группы гены определяются как гены, показывающие в 4 раза более высокий средний уровень экспрессии мРНК в группе из 2-5 тканей, включая гипофиз, по сравнению со всеми другими тканями.

Чтобы проиллюстрировать связь ткани гипофиза с другими типами тканей, был создан сетевой график, отображающий количество генов с общей экспрессией для разных типов тканей.

Рис. 2. Интерактивный сетевой график обогащенных и группированных генов гипофиза, связанных с их соответствующими обогащенными тканями (серые круги).Красные узлы представляют количество генов, обогащенных гипофизом, а оранжевые узлы представляют количество генов, обогащенных группой. Размеры красных и оранжевых узлов связаны с количеством генов, отображаемых в узле. На каждый узел можно щелкнуть, и в результате отображается список всех обогащенных генов, связанных с выделенными краями. Сеть ограничена групповыми обогащенными генами в комбинациях до 3-х тканей, но полученные списки показывают полный набор групповых обогащенных генов в конкретной ткани.

В гипофизе экспрессируется 111 генов, обогащенных группами, и большая часть этой экспрессии совпадает с мозгом. Нейросекреторный белок (VGF), который показывает сходство последовательностей с семейством секретогранинов / хромогранинов, является группой, обогащенной гипофизом и тканью мозга. Точная функция белка VGF еще полностью не изучена, однако есть свидетельства того, что белок участвует в гомеостазе жидкости организма, регулируя высвобождение вазопрессина.

VGF — гипофиз
VGF — кора головного мозга

Гипофиз также разделяет многие белки с надпочечниками и другими эндокринными тканями.Нейроэндокринный белок секретогранин 2, кодируемый геном (SCG2), входит в группу, обогащенную надпочечниками, мозгом и гипофизом. Секретогранин 2 играет важную роль в упаковке и сортировке гормонов и нейропептидов в секреторные пузырьки.

SCG2 — гипофиз
SCG2 — надпочечник

SCG2 — кора головного мозга
SCG2 — гипоталамус

Ген NPTX2 кодирует нейрональный белок петраксин, синаптический белок семейства нейрональных петраксинов.(NPTX2) — это группа, обогащенная гипофизом, надпочечниками, мозгом, семенниками и поджелудочной железой. Считается, что этот белок участвует в формировании возбуждающих синапсов, и исследования показали, что повышающая регуляция этого белка может быть связана с патологией болезни Паркинсона.

NPTX2 — гипофиз
NPTX2 — гиппокамп

NPTX2 — поджелудочная железа
NPTX2 — яичко
NPTX2 — надпочечник

Гликопротеиновые гормоны гипофиза: лютеинизирующий гормон (LHB), фолликулостимулирующий гормон (FSHB), тироид-стимулирующий гормон (TSHB) и хорионический гонадотропин плаценты состоит из альфа- и бета-субъединиц.Альфа-субъединица для этих белков кодируется геном CGA и входит в группу, обогащенную гипофизом и плацентой.

CGA — гипофиз
CGA — плацента

Стандартная установка в Tissue Atlas основана на методе Tissue Micro array (TMA), что позволяет экономить ценный тканевый материал, а также реагенты и обеспечивает широкое представление тканей для профилирования белков. В дополнение к стандартной настройке, расширенное профилирование ткани в гипофизе выполняется для выбранных белков, чтобы дать более полное представление о том, где эти белки экспрессируются.Полный список генов, используемых для определения профиля белков в образцах гипофиза, приведен в таблице 3.

Таблица 3. Следующие 58 генов были проанализированы в гипофизе.

Гипофиз или гипофиз (Gr. hypo , ниже, + physis , рост) представляет собой небольшую вырабатывающую гормоны железу двойного эмбрионального происхождения, которая имеет диаметр около 1 см и вес около 0,5 г. Гипофиз находится в полости клиновидной кости (турецкое седло), под третьим желудочком мозга.Двойное происхождение гипофиза происходит из-за того, что железа частично является эктодермой полости рта, а частично — нервной тканью. На ранних сроках беременности «петля» эктодермальной ткани возникает из-за нёба (так называемый мешок Ратке) и соединяется вместе с «петлей» промежуточного мозга развивающегося мозга. Функции двух частей остаются разделенными: передняя и задняя доли, также называемые аденогипофизом и нейрогипофизом, соответственно.

Гипофиз играет решающую роль в физиологии человека, и вместе с гипоталамусом железа образует связующее звено между нервной и эндокринной системами, контролируя функции щитовидной железы, надпочечников и гонад.Гипофиз также регулирует рост, лактацию и сохранение воды.

Передние железы состоят из эпителиальных клеток, вырабатывающих различные гормоны:

Тип клеток и сродство к окрашиванию		Вырабатываемый гормон
Соматотропные клетки (ацидофильные)		Гормон роста
Маммотропные / лактотропные клетки (ацидофильные)		Пролактин
Гонадотропные клетки (базофильные)		Фолликулостимулирующий гормон и лютеинизирующий гормон
Тиротропные клетки (базофильные)		Тиреотропный гормон
Кортикотропные клетки (базофильные)		Кортикотропин (АКТГ)
Меланотропы (базофильные)		Альфа Меланоцитостимулирующий гормон

Задний гипофиз состоит в основном из немиелинизированных аксонов секреторных нейрональных клеток гипоталамуса, расположенных в супраоптическом и перивентрикулярном ядрах гипоталамуса.Аксоны образуют гипоталамо-гипофизарный тракт, а их терминалы заканчиваются в задней доле. Нейроны выделяют нейросекреторное соединение, которое в основном содержит окситоцин или вазопрессин. Эти аксоны окружают питуициты, которые представляют собой глиальные клетки, которые поддерживают хранение и высвобождение гормонов.

Uhlén M et al., Тканевая карта протеома человека. Science (2015)
PubMed: 25613900 DOI: 10.1126 / science.1260419

Yu NY et al., Дополнительная характеристика ткани путем интеграции профилей транскриптомов из Атласа белков человека и консорциума FANTOM5. Nucleic Acids Res. (2015)
PubMed: 26117540 DOI: 10.1093 / nar / gkv608

Fagerberg L et al., Анализ тканеспецифической экспрессии человека путем полногеномной интеграции транскриптомики и протеомики на основе антител. Протеомика клеток Mol. (2014)
PubMed: 24309898 DOI: 10.1074 / mcp.M113.035600

Sjöstedt E et al., Специфическое антитело для обнаружения фактора транскрипции T-Pit: надежный маркер дифференцировки кортикотрофных клеток и инструмент для улучшения классификации нейроэндокринных опухолей гипофиза. Acta Neuropathol. (2017)
PubMed: 28823042 DOI: 10.1007 / s00401-017-1768-9

Sjöstedt E et al., Интеграция транскриптомики и протеомики на основе антител для исследования белков, экспрессируемых в специализированных тканях. J Proteome Res. (2018)
PubMed: 30272454 DOI: 10.1021 / acs.jproteome.8b00406

Пульсирующий выброс гормона как окно в мозговой контроль …: Эндокринолог

Неоспоримым физиологическим признаком секреции гормона передней доли гипофиза является пульсирующий режим передачи сигналов. Временной пульсирующий характер высвобождения гормона передней доли гипофиза обеспечивается эпизодичностью нейрональной активации в центрах контроля гипоталамуса, которые передают прерывистый стимулирующий и / или тормозной сигнал реагирующим клеткам передней доли гипофиза.Передний гипофиз, в свою очередь, отвечает выбросами гормонов в кровоток и, таким образом, управляет удаленными тканями-мишенями уникальным, организованным во времени образом. В случае оси гонадотропов (ЛГ и ФСГ) у мужчин и женщин и у детей полового созревания, прерывистость стимуляции гонадотропных клеток гипоталамическим гонадолиберином является критическим фактором устойчивой физиологической функции и абсолютной предпосылкой репродуктивной способности. Более того, множество патофизиологических нарушений в различных клинических состояниях может отмечаться нарушением согласованного пульсирующего высвобождения гонадотропных гормонов.Точно так же глубокие изменения в импульсном режиме секреции GH происходят на протяжении всей жизни человека и характеризуются разительными гендерными различиями. Более того, как и ЛГ, пульсирующий сигнал ГР существенно изменяется в зависимости от возраста (включая изменения в течение первого дня жизни и в подростковом, юношеском и старшем возрасте), различий в составе тела, степени физической подготовки, изменениях сна и питательных веществ. потребление и патологические нарушения функции почек и печени, среди других состояний.Другие нейроэндокринные оси, такие как кортикотропная (АКТГ) и лактотропная системы, также демонстрируют отчетливую физиологическую регуляцию всплеск-подобного режима секреции гормонов и демонстрируют поразительные нарушения в условиях болезни. Важно отметить, что, поскольку частота и амплитуда выброса гормонов секреторных гормонов совместно контролируются гипоталамическими (нейронными) эффекторными путями и системной отрицательной и положительной обратной связью, понимание нейроэндокринной патофизиологии предлагает уникальное понимание регуляции мозгом передней доли гипофиза и восприимчивости гипофиза. на обратные воздействия периферических тканей-мишеней.Здесь я делаю обзор некоторых важных недавних концепций и разработок в нейроэндокринологии, уделяя особое внимание физиологической регуляции и патофизиологическому нарушению пульсирующего режима секреции ЛГ у девочек, мальчиков, женщин и мужчин

(C) Lippincott-Raven Publishers.

Гистология-Мир! Банк тестов для гистологии-эндокринная 3a

Инструкции: Для каждого вопроса гистологии выберите один лучший ответ. Этот банк тестов гистологии также полезен для вопросов по гистологии на USMLE (шаг 1 USMLE).

1.
Какой гормон пролактин?
а. Белок
б. Пептид
c. Стероид
d. Катехоламин
е. Ничего из вышеперечисленного

Ответ:

Гормоны могут иметь различную структуру. Гормоны, которые являются белками, включают инсулин и пролактин. Пептидные цепи — это короткие цепи аминокислот. Примерами гормонов, которые представляют собой пептидные цепи, являются антидиуретический гормон и окситоцин. Стероидные гормоны — производные холестерина.Стероидные гормоны включают тестостерон и эстрадиол. Норэпинефрин и адреналин — катехоламины.

2.
Откуда секретируются тропические гормоны?
а. Pars intermedia
б. Парс тубералис
c. Инфундибулум
d. Аденогипофиз
е. Нейрогипофиз

Ответ: d

Гипофиз называют главной железой. Воронка соединяет гипофиз с гипоталамусом. Гипофиз можно подразделить на аденогипофиз и нейрогипофиз.Аденогипофиз можно подразделить на дистальную часть, промежуточную часть и туберальную часть. Аденогипофиз (точнее, дистальный отдел аденогипофиза) секретирует тропные гормоны. Тропные гормоны влияют на клеточную активность своего органа-мишени. Нейрогипофиз секретирует два гормона: окситоцин и антидиуретический гормон.

3.
Что из перечисленного не является частью нейрогипофиза?
а. Среднее возвышение
б.Дистальный парс
c. Нервный парс
d. Инфундибулярная ножка
е. Все вышеперечисленное входит в состав нейрогипофиза

.

Ответ: b

Гипофиз можно подразделить на аденогипофиз и нейрогипофиз. Аденогипофиз можно подразделить на дистальную часть, промежуточную часть и туберальную часть. Дистальная часть гипофиза — это передняя доля гипофиза. Нейрогипофиз можно далее подразделить на нервную часть, воронкообразную ножку и срединное возвышение.Нервная часть — это задняя доля.

4.
Какой тип клеток выделяет MSH?
а. Лактотропные клетки
б. Тиреотропные клетки
c. Соматотропные клетки
d. Кортикотропные клетки
е. Гонадотропные клетки

Ответ: d

Есть несколько типов клеток дистальной части гипофиза. Лактотропные клетки секретируют пролактин. Тиреотропные клетки секретируют тиреотропный гормон (ТТГ).Соматотропные клетки секретируют гормон роста. Кортикотропные клетки секретируют адренокортикотропный гормон (АКТГ) и меланоцит-стимулирующий гормон (МСГ). Гонадотропные клетки секретируют фолликулостимулирующий гормон (ФСГ) и лютеинизирующий гормон (ЛГ).

5.
Какие из следующих клеток можно классифицировать как ацидофилы?
а. Кортикотропные клетки
б. Тиреотропные клетки
c. Гонадотропные клетки
d. Ничего из вышеперечисленного
е. Все вышеперечисленное

Ответ: d

Клетки дистальной части гипофиза (передней доли гипофиза) можно классифицировать как ацидофилы или базофилы в зависимости от их сродства к кислотным или основным красителям соответственно.

Ацидофилы представляют собой соматотропные клетки и лактотропные клетки. Таким образом, гормон роста и пролактин секретируются ацидофильными клетками.

Базофилы — это гонадотропные клетки, кортикотропные клетки и тиреотропные клетки. Таким образом, базофилы секретируют ФСГ, ЛГ, АКТГ и ТТГ. Подсказка гистологии от Сары Беллхэм: Есть две мнемоники, которые можно использовать, думая об ацидофилах и базофилах передней доли гипофиза. «GPA» (гормон роста и пролактин секретируются ацидофилами). «B-FLAT» (базофилы секретируют ФСГ, ЛГ, АКТГ и ТТГ).

6.
Какая железа выделяет адреналин?
а. Поджелудочная железа
б. Щитовидная железа
c. Шишковидная железа
d. Надпочечник (кора)
е. Надпочечник (мозговое вещество)

Ответ: e

Эндокринная часть поджелудочной железы выделяет инсулин, глюкагон и соматостатин.Щитовидная железа выделяет гормоны щитовидной железы (Т3 и Т4) и кальцитонин. Шишковидная железа выделяет мелатонин. Кора надпочечников выделяет различные кортикостероиды. Он выделяет минералокортикоиды (например, альдостерон), глюкокортикоиды (например, кортизол) и половые стероиды. Адреналин и норэпинефрин выделяются мозговым веществом надпочечников.

7.
Какая железа выделяет кортизол?
а. Поджелудочная железа
б. Щитовидная железа
c. Шишковидная железа
d.Надпочечник (кора)
е. Надпочечник (мозговое вещество)

Ответ: d

Эндокринная часть поджелудочной железы выделяет инсулин, глюкагон и соматостатин. Щитовидная железа выделяет гормоны щитовидной железы (Т3 и Т4) и кальцитонин. Шишковидная железа выделяет мелатонин. Кора надпочечников выделяет различные кортикостероиды. Он выделяет минералокортикоиды (например, альдостерон), глюкокортикоиды (например, кортизол) и половые стероиды. Адреналин и норэпинефрин выделяются мозговым веществом надпочечников.

8.
Какой тип клеток находится в мозговом веществе надпочечников?
а. Основная ячейка
б. Оксифильная ячейка
c. Парафолликулярные клетки
d. Фолликулярные клетки
е. Хромаффинные клетки

Ответ: e

В паращитовидной железе есть два типа клеток: основные клетки и оксифильные клетки. Основные ячейки также называются главными ячейками. Основные клетки преобладают. Оксифильные клетки также обнаруживаются в паращитовидной железе; однако они не так распространены, как основные клетки.

В щитовидной железе есть два типа клеток: фолликулярные клетки и парафолликулярные клетки. Фолликулярные клетки выделяют и хранят гормон щитовидной железы. Парафолликулярные клетки щитовидной железы также называют С-клетками. Они выделяют кальцитонин.

Клетки мозгового вещества надпочечников — хромаффинные клетки.

9.
Откуда секретируется панкреатический полипептид?
а. Альфа-клетки
б. Бета-клетки
c. Гамма-клетки
d.Дельта-ячейки
е. Acini

Ответ: c

Поджелудочная железа является эндокринным и экзокринным органом.

Эндокринная часть поджелудочной железы расположена на островках Лангерганса. Внутри островков есть несколько типов клеток. Альфа-клетки секретируют глюкагон. Бета-клетки секретируют инсулин. Дельта-клетки секретируют соматостатин. Гамма-клетки секретируют полипептид поджелудочной железы.

Ацинусы — экзокринная часть поджелудочной железы.

10.
Что из перечисленного является средним слоем коры надпочечников?
а. Хромаффинные клетки
б. Zona reticularis
c. Зона гломерулоса
d. Зона фасцикулата
е. Ничего из вышеперечисленного

Ответ: d

Надпочечник состоит из коры надпочечников и мозгового вещества надпочечников.

Слои коры надпочечников, от самого внешнего до самого внутреннего: клубочковая зона, фасцикуляционная зона и сетчатая оболочка.Соответствующие основные продукты: минералокортикоды, глюкокортикоиды и половые стероиды.

Клетки мозгового вещества надпочечников — хромаффинные клетки. Они выделяют катехоламины (адреналин и норэпинефрин).

Гистологический совет от Сары Беллхэм: мнемоника для запоминания слоев коры надпочечников и их соответствующих продуктов — «Найди Рекса; займись хорошим сексом» (glomerulosa, fasciculata, reticularis) (минералокортикоид, глюкокортикоид, половые стероиды) .