Пептиды ghrp: GHRP-2 5мг (1флакон) купить в Москве по цене 635 руб.

GH (GHRP), представляют собой синтетические пептиды, которые, подобно GHRH, действуют непосредственно на соматотрофов гипофиза, стимулируя высвобождение GH.Высвобождение гормона роста (GH) стимулируется множеством синтетических стимуляторов секреции, из которых наиболее тщательно изучен гексапептид, высвобождающий гормон роста (GHRP-6); считается, что он действует как на гипофиз, так и на гипоталамус.

Описание

Синтетический пептид-6, высвобождающий гормон роста, представляет собой одиночную негликозилированную полипептидную цепь, содержащую 6 аминокислот, имеющую молекулярную массу 873 Дальтон и молекулярную формулу C ₄₆ H ₅₆ N ₁₂ O ₆ .

Внешний вид

Стерильный фильтрованный белый лиофилизированный (лиофилизированный) порошок.

Состав

Пептид GHRP-6 лиофилизировали без добавок.

Растворимость

Рекомендуется восстановить лиофилизированный GHRP-6 в стерильном 18 МОм-см вод.ст. не менее 100 мкг / мл, который затем можно разбавить другими водными растворами.

Стабильность

Лиофилизированный пептид, высвобождающий гормон роста-6, хотя он стабилен при комнатной температуре в течение 3 недель, его следует хранить высушенным при температуре ниже -18 ° C. После восстановления GHRP-6 следует хранить при 4 ° C в течение 2-7 дней и для будущего использования при температуре ниже -18 ° C. Для длительного хранения рекомендуется добавить белок-носитель (0,1% HSA или BSA).
Пожалуйста, не допускайте циклов замораживания-оттаивания.

Чистота

Больше 98.0%, как определено анализом с помощью RP-HPLC.

Аминокислотная последовательность

His-D-Trp-Ala-Trp-D-Phe-Lys-Nh3.

Паспорт безопасности

Использование

ProSpec предназначена ТОЛЬКО для ЛАБОРАТОРНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ. Продукт нельзя использовать в качестве лекарств, сельскохозяйственных или пестицидных продуктов, пищевых добавок или бытовой химии.

Пептид, высвобождающий гормон роста-2 (GHRP-2), как и грелин, увеличивает потребление пищи у здоровых мужчин.

J Clin Endocrinol Metab. Авторская рукопись; доступно в PMC 2010 18 февраля.

Опубликован в окончательной редакции как:

PMCID: PMC2824650

NIHMSID: NIHMS176333

Бландин Лаферрер

Центр исследований ожирения, Амстердамский центр им. , NY 10025

Cynthia Abraham

Центр исследования ожирения, Больничный центр Святого Луки Рузвельта, 1090 Amsterdam Avenue, New York, NY 10025

Colleen D.Russell

Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Св. Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, Нью-Йорк, Нью-Йорк 10025

Сирил Й. Бауэрс

Центр медицинских наук Университета Тьюлейн, Новый Орлеан, Луизиана 70112

Бландин Лаферрер, Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Святого Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, Нью-Йорк, штат Нью-Йорк 10025;

Abstract

GHRP-2 — синтетический агонист грелина, недавно открытого кишечного пептида, который связывается с рецептором, стимулирующим секрецию гормона роста (GH).Было показано, что грелин обладает двумя основными эффектами: он стимулирует секрецию гормона роста и начало аппетита / приема пищи. GHRP-2 был тщательно изучен на предмет его полезности в качестве стимулятора секреции гормона роста (GHS). Исследования на животных показали его влияние на прием пищи. Однако неизвестно, может ли GHRP-2 стимулировать аппетит у людей при остром введении. Мы подкожно вводили 7 худым, здоровым мужчинам GHRP-2 (1 мкг / кг / ч) или физиологический раствор в течение 270 минут, а затем измерили их потребление в неограниченном количестве, в форме шведского стола.Подобно тому, что сообщалось при введении грелина, наши субъекты ели на 35,9 ± 10,9% больше при введении GHRP-2 по сравнению с физиологическим раствором, причем каждый субъект увеличивал свое потребление даже в расчете на кг массы тела (136,0 ± 13,0 кДж / кг против 101,3 ± 10,5 кДж / кг, p = 0,008). Макроэлементный состав потребляемой пищи не отличался в зависимости от условий. Как и ожидалось, сывороточные уровни GH значительно выросли во время инфузии GHRP-2 (AUC 5550 ± 1090 мкг / л / 240 мин против 412 ± 161 мкг / л / 240 мин, p = 0,003). Эти данные впервые демонстрируют, что GHRP-2, как и грелин, увеличивает потребление пищи, что позволяет предположить, что GHRP-2 является ценным инструментом для исследования влияния грелина на пищевое поведение людей.

Введение

Грелин, недавно идентифицированный пептид, секретируемый эндокринными клетками желудка (1), вызвал большой интерес благодаря своим двойным эффектам. Этот эндогенный лиганд рецептора, стимулирующего секрецию гормона роста (GHS-R), который был клонирован в 1996 г. (2), регулирует высвобождение гормона роста (GH) (3). Грелин также играет роль в регулировании приема пищи и энергетического баланса. При центральном или периферическом введении грызунам грелин увеличивает потребление пищи и массу тела (4,5).Интересно, что его влияние на потребление пищи не зависит от секреции GH (4,6-8) и, по-видимому, опосредуется через нейроны NPY / Agouti, связанные с геном белка (AGRP) в дугообразном ядре гипоталамуса (9,10). Недавно было показано, что периферическое введение грелина стимулирует прием пищи у стройных, здоровых мужчин и женщин (11) и у онкологических больных (12).

Данные показывают, что циркулирующий грелин также участвует в регуляции приема пищи. Уровни грелина повышаются в ожидании еды (13) и подавляются при приеме пищи (13, 14), но основные механизмы неизвестны.Связанное с приемом пищи подавление грелина пропорционально содержанию углеводов (СНО) в пище, но, по-видимому, не связано напрямую с глюкозой или инсулином (14,15), хотя введение инсулина снижает уровень грелина (16).

Уровни грелина в сыворотке крови зависят от энергетического баланса. Уровень грелина повышается при анорексии (17) и снижается при ожирении (18). Таким образом, не исключено, что грелин может играть важную роль в поведении при приеме пищи, а также, возможно, при хроническом переедании или недоедании (19).Из-за своего двойного действия грелин может быть важным гормональным сигналом нутритивного статуса для соматотропной оси, играя роль в интеграции энергетического баланса с процессом роста (20).

Грелин недоступен для долгосрочных исследований на людях в США, однако синтетический агонист GHS-R GHRP-2 (DalaDßNalAlaTrpDPheLysNH ₂ ) доступен для клинических исследований. GHRP-2 принадлежит к семейству GHS, обнаруженных в 1980-х годах и широко изученных на предмет их влияния на высвобождение GH (21).Несмотря на очень разный химический состав природного грелина и синтетического СГС, все больше и больше доказательств подтверждают, что они обладают одинаковым биологическим действием. Как и грелин, СГС увеличивают потребление пищи и массу тела у грызунов (22). Было показано, что GHRP-2 повышает рейтинг аппетита у детей с идиопатическим GH, постоянно получающих пероральный GHRP-2 (23).

Целью этого исследования было выяснить, стимулирует ли GHRP-2 прием пищи у здоровых людей. Подобно исследованию Wren et al.(11), которые использовали грелин, мы протестировали влияние кратковременной подкожной (п / к) инфузии GHRP-2 на потребление пищи во время шведского стола.

Методы

Субъекты

Семь худых мужчин (возраст 26,0 ± 1,6 года, ИМТ 21,5 ± 1,7 кг / м) ² , масса жира 14,4 ± 1,1% по антропометрическим данным, вес стабильный, здоровый, без лекарств, без лекарств В исследовании принимали участие курящие, не соблюдающие диету, без каких-либо расстройств пищевого поведения.Обзорный совет больницы Св. Луки / Рузвельта одобрил протокол исследования, и до включения в исследование было получено информированное письменное согласие.Сеанс скрининга включал полный медицинский осмотр, стандартные лабораторные анализы, тест на вкус и пробный обед. Испытуемые должны были оценить свое пристрастие к еде на «5». или более в среднем (по шкале от 0 до 7) и должны были съесть не менее 2090 кДж во время скринингового пробного завтрака.

Дизайн исследования

Субъектов изучали после ночного голодания в течение двух дней подряд, разделенных как минимум неделей. Рандомизированным двойным слепым методом GHRP-2 (1 мкг / кг / ч) или плацебо вводили на протяжении всего эксперимента (включая время еды) через подкожный катетер, прикрепленный к помпе (Minimed 508).Кровь собирали для последующего измерения гормонов через внутривенный катетер, помещенный в предплечье, и отбирали пробы каждые 30 минут до начала приема пищи. Шведский стол включал в себя несколько блюд, которые подавались в избытке, чтобы удовлетворить любой аппетит. Во время еды в лаборатории за испытуемыми наблюдали с помощью камеры, чтобы гарантировать их безопасность и чтобы они не избавлялись от пищи никаким другим способом, кроме еды. Фиксированный стандартный тестовый завтрак давали через 120 минут после начала инфузии, а обед ad libitum предлагали через 240 минут.Завтрак состоял из 1,5 английских маффинов, 5 г сливочного масла и 125 мл яблочного сока (1254 кДж, 65% СНО, 4% белка, 31% жира). Перед обедом «шведский стол» испытуемые слушали записанную на пленку инструкцию «есть столько, сколько они хотят». Во время обеда «шведский стол» подавались макароны, булочки, горох и морковь, печенье с шоколадной крошкой, яблочный соус, куриные наггетсы и филе в панировке, а также вода. Пища взвешивалась до и после еды и подсчитывалась калорийность. После еды настой прекращали.Визуальные аналоговые шкалы (от 0 «совсем нет» до 150 мм «чрезвычайно») для оценки голода и степени насыщения применялись до начала инфузии, до и после завтрака, а также до и после завершения обеденного приема пищи. Положение меток на шкале 150 мм измерялось в миллиметрах слепым исследователем.

Анализы

Концентрации гормона роста в сыворотке измеряли в двух экземплярах с помощью радиоизотопного набора для количественного определения гормона роста от Nichols Institute Diagnostic (Сан-Хуан, Калифорния).Чувствительность анализа составляла 0,2 мкг / л, а медианные коэффициенты вариации внутри и между анализами составляли 2,9% и 7,5% соответственно. Уровни кортизола в сыворотке измеряли радиоиммуноанализом (набор от DSL, Webster, TX). Чувствительность анализа составила 0,11 нг / дл. Средняя вариация внутри и между исследованиями составила 3,8% и 5,9% соответственно. Сбор крови у одного субъекта был неполным, поэтому приводятся данные по шести субъектам.

Статистика

Сравнение GHRP-2 и плацебо проводилось с помощью парного t-критерия для всех переменных.Гормональный ответ оценивали как площадь под кривой (AUC), измеренную трапециевидным методом. Для уровня значимости использовалось значение p 0,05. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего, если не указано иное. Для статистического анализа использовалась версия SPSS 11.5.

Результаты

О побочных эффектах инфузии не сообщалось. Прием пищи во время «шведского стола» увеличился на 35,9 ± 10,9% (от 12 до 95%) с GHRP-2 по сравнению с плацебо. Каждый субъект ответил на инфузию GHRP-2 увеличением потребления пищи, независимо от количества еды, съеденной во время контрольного эксперимента с физиологическим раствором ().Общее количество съеденных калорий было больше с GHRP-2, чем с плацебо (9409 ± 1229 кДж против 7118 ± 1078 кДж, p = 0,004), как и количество съеденных кДж на кг массы тела (136 ± 13 кДж / кг против 101 ± 10 кДж / кг, p = 0,008). Испытуемые ели больше CHO (58 ± 14 г, p = 0,006), белка (17 ± 4 г, p = 0,005) и жира (38 ± 10 г, p = 0,008) с GHRP-2, чем плацебо, и полученная пропорция калорий от каждого питательного вещества не отличался в двух условиях (результаты не показаны). Продолжительность приема пищи ad libitum была такой же, как с GHRP-2, так и без него (30 ± 8 мин vs.32 ± 6 мин, p = 0,667). Таким образом, потребление пищи за интервал (количество калорий, потребляемых во время еды, деленное на продолжительность приема пищи) было больше, но не значительно, с GHRP-2, чем с плацебо (322 ± 33 кДж / мин против 276 ± 38 кДж / мин, р = 0,179). Основываясь на ВАШ, исходные оценки голода и сытости не различались в зависимости от состояния. Однако во время инфузии GHRP-2 субъекты чувствовали себя более голодными (112,6 ± 7,5 мм против 89,7 ± 12,2, p = 0,013) перед обедом и демонстрировали тенденцию к увеличению сытости после обеда (134,1 ± 6,0 мм против 118.6 ± 10,3 мм, p = 0,054).

Индивидуальные изменения в потреблении энергии от шведского стола, график на вставке показывает среднее ± средн.

Уровни hGH значительно увеличились во время инфузии GHRP-2, достигнув плато 36,4 ± 7,0 мкг / л через 60 минут после начала инфузии. Уровни GH были значительно выше во время инфузии GHRP-2 (AUC 5550 ± 1090 мкг / л / 240 мин по сравнению с 412 ± 161 мкг / л / 240 мин, p = 0,003) (). Уровни кортизола в сыворотке крови временно повышались при приеме GHRP-2 по сравнению с плацебо (результаты не показаны).

Инфузия GHRP-2 (1 мкг / кг / ч) и физиологического раствора начиналась в 0 мин, а завтрак подавался через 120 мин.

Обсуждение

Это первые данные, демонстрирующие, что периферическое введение GHRP-2 увеличивает потребление пищи людьми. Эффект GHRP-2 устойчив и вызывал увеличение потребления пищи у всех испытуемых. Субъекты сообщили, что испытывали чувство голода при приеме GHRP-2. Величина влияния GHRP-2 на потребление пищи (+ 35%) сравнима с эффектом грелина, который, как было ранее показано, увеличивает потребление пищи на 28% у здоровых субъектов (11) и на 31% у больных раком (12).Эффект 1 мкг / кг / ч GHRP-2 сравним с эффектом грелина (5 пмоль / кг / мин) не только на прием пищи, но и на высвобождение GH. В исследовании Wren (5) (также у здоровых поджарых субъектов) грелин поднял GH до аналогичных уровней (около 35 мкг / л). Следовательно, грелин или его миметик GHRP-2 при периферическом введении способен вызывать значительные острые изменения аналогичной степени как в уровне GH, так и в поведении при приеме пищи.

Гормональное регулирование приема пищи можно разделить на долгосрочные сигналы накопления жира (лептин и инсулин) и краткосрочные сигналы начала приема пищи и насыщения (грелин, CCK и PYY).Грелин, хотя в основном секретируется в желудке, считается, что он действует центрально на нейроны NPY-AGRP дугообразного ядра (9,10). Механизм и количество циркулирующего периферического грелина, достигающего этих нейронов гипоталамуса, неясны. У грызунов как центральное, так и периферическое введение грелина (4) или GHS (s) (21,22) стимулируют прием пищи. Имеющиеся данные свидетельствуют о том, что спонтанное изменение концентрации эндогенного сывороточного грелина может играть роль в продолжительности перерыва между приемами пищи, повторении голода и последующем размере еды (24).Постпрандиальное подавление грелина пропорционально размеру еды, но не предсказывает промежуток между приемами пищи (25). Исследования, основанные на утренних уровнях грелина в сыворотке крови натощак, не обнаружили положительной (25) или отрицательной (26) зависимости между уровнями грелина в плазме натощак и потреблением пищи ad libitum. Неясно, являются ли уровни общего грелина натощак (н-октаноил плюс дезоктаноил) лучшим маркером для последующего приема пищи. Кроме того, интегрированное 24-часовое высвобождение грелина может быть лучшим предиктором краткосрочного энергетического баланса / приема пищи (27), так же как интегрированные 24-часовые уровни лептина являются лучшим показателем дневного потребления пищи и секреции инсулина (28), чем утреннее голодание. уровни лептина.Как наши данные с GHRP-2, так и другие с грелином (11,12) показывают, что периферическое вливание этих орексигенных пептидов может вызвать сильное резкое изменение в поведении людей при приеме пищи. Это предполагает, хотя и не доказывает, возможную роль периферического циркулирующего грелина в регуляции приема пищи (13, 25). Однако маловероятно, что простые изменения сывороточного уровня одного грелина определяют величину или тип последующих эффектов через активацию центральных и периферических рецепторов (29).

Как сообщалось ранее (30), подкожная инфузия GHRP-2 в течение 270 минут является безопасной. Соответственно, не сообщалось о побочных эффектах во время 30-дневной подкожной непрерывной инфузии GHRP-2 (30) или 12-месячного перорального введения препарата детям (23).

Два исследования показали, что хроническое введение GHRP-2 маленьким детям с различной степенью дефицита GH вызывает стойкое повышение скорости линейного роста (23,31). Это предполагает возможность того, что острый эффект GHRP-2 на потребление пищи, наблюдаемый в нашем исследовании, мог бы привести к состоянию положительного энергетического баланса, если бы GHRP-2 вводился хронически.Тщательно разработанные и оптимизированные хронические исследования, включая подробный мониторинг состава тела и приема пищи, помогут продемонстрировать долгосрочное влияние СГС на потребление пищи и массу тела. Хотя GHRP-2 значительно увеличивал GH, маловероятно, судя по результатам одного rhGH, что это увеличение уровней GH является ответственным за резкие изменения в потреблении пищи в этом исследовании. Кроме того, гипоталамический путь и механизм, с помощью которого GHS усиливают потребление пищи, отчетливо отличаются от тех, с помощью которых GHS усиливают секрецию GH (4,7,33,34).Кроме того, стимуляция приема пищи грелином или GHS сохраняется у крыс с дефицитом GH (10).

В большинстве опубликованных на данный момент отчетов биоактивная молекула грелина не измерялась в плазме человека и вводились большие фармакологические, а не физиологические дозы грелина. Другие соответствующие будущие цели для лучшего понимания физиологии и патофизиологии системы грелина у людей потребуют более конкретных и частых измерений уровней грелина в плазме, а также определения того, насколько близко фармакологические и физиологические действия грелина параллельны друг другу.GHRP-2, как и грелин, является полезным инструментом для клинических исследований, помогающим понять сложность регуляции поведения человека при приеме пищи.

Выражение признательности

NIH DK 02572-01 и GCRC RR 00645 и 05096, ORC 26687. Мы благодарим MINIMED за предоставление нам инфузионного насоса и всех расходных материалов.

Информация для авторов

Бландин Лаферрер, Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Св. Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, Нью-Йорк, Нью-Йорк 10025.

Синтия Абрахам, Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Св. Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, Нью-Йорк , NY 10025.

Коллин Д. Рассел, Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Св. Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, Нью-Йорк, Нью-Йорк 10025.

Сирил Я. Бауэрс, Центр медицинских наук Тулейнского университета, Новый Орлеан, Луизиана 70112.

Ссылки

Пептид, высвобождающий гормон роста 2 (GHRP-2), как и грелин, увеличивает потребление пищи у здоровых мужчин

J Clin Endocrinol Metab.Авторская рукопись; доступно в PMC 2010 18 февраля.

Опубликован в окончательной редакции как:

PMCID: PMC2824650

NIHMSID: NIHMS176333

Бландин Лаферрер

Исследовательский центр ожирения, Амстердамский центр им. Рузвельта, Сент-Люк, 1090 , NY 10025

Cynthia Abraham

Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Св. Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, Нью-Йорк, Нью-Йорк 10025

Коллин Д. Рассел

Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Св. Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, New York, NY 10025

Cyril Y.Bowers

Центр медицинских наук Тулейнского университета, Новый Орлеан, Луизиана 70112

Бландин Лаферрер, Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Св. Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, Нью-Йорк, Нью-Йорк 10025;

Abstract

GHRP-2 — синтетический агонист грелина, недавно открытого кишечного пептида, который связывается с рецептором, стимулирующим секрецию гормона роста (GH). Было показано, что грелин обладает двумя основными эффектами: он стимулирует секрецию гормона роста и начало аппетита / приема пищи.GHRP-2 был тщательно изучен на предмет его полезности в качестве стимулятора секреции гормона роста (GHS). Исследования на животных показали его влияние на прием пищи. Однако неизвестно, может ли GHRP-2 стимулировать аппетит у людей при остром введении. Мы подкожно вводили 7 худым, здоровым мужчинам GHRP-2 (1 мкг / кг / ч) или физиологический раствор в течение 270 минут, а затем измерили их потребление в неограниченном количестве, в форме шведского стола. Подобно тому, что сообщалось при введении грелина, наши субъекты ели на 35,9 ± 10,9% больше при введении GHRP-2 по сравнению сфизиологический раствор, при этом каждый субъект увеличивал свое потребление даже в расчете на кг массы тела (136,0 ± 13,0 кДж / кг против 101,3 ± 10,5 кДж / кг, p = 0,008). Макроэлементный состав потребляемой пищи не отличался в зависимости от условий. Как и ожидалось, сывороточные уровни GH значительно выросли во время инфузии GHRP-2 (AUC 5550 ± 1090 мкг / л / 240 мин против 412 ± 161 мкг / л / 240 мин, p = 0,003). Эти данные впервые демонстрируют, что GHRP-2, как и грелин, увеличивает потребление пищи, что позволяет предположить, что GHRP-2 является ценным инструментом для исследования влияния грелина на пищевое поведение людей.

Введение

Грелин, недавно идентифицированный пептид, секретируемый эндокринными клетками желудка (1), вызвал большой интерес благодаря своим двойным эффектам. Этот эндогенный лиганд рецептора, стимулирующего секрецию гормона роста (GHS-R), который был клонирован в 1996 г. (2), регулирует высвобождение гормона роста (GH) (3). Грелин также играет роль в регулировании приема пищи и энергетического баланса. При центральном или периферическом введении грызунам грелин увеличивает потребление пищи и массу тела (4,5).Интересно, что его влияние на потребление пищи не зависит от секреции GH (4,6-8) и, по-видимому, опосредуется через нейроны NPY / Agouti, связанные с геном белка (AGRP) в дугообразном ядре гипоталамуса (9,10). Недавно было показано, что периферическое введение грелина стимулирует прием пищи у стройных, здоровых мужчин и женщин (11) и у онкологических больных (12).

Данные показывают, что циркулирующий грелин также участвует в регуляции приема пищи. Уровни грелина повышаются в ожидании еды (13) и подавляются при приеме пищи (13, 14), но основные механизмы неизвестны.Связанное с приемом пищи подавление грелина пропорционально содержанию углеводов (СНО) в пище, но, по-видимому, не связано напрямую с глюкозой или инсулином (14,15), хотя введение инсулина снижает уровень грелина (16).

Уровни грелина в сыворотке крови зависят от энергетического баланса. Уровень грелина повышается при анорексии (17) и снижается при ожирении (18). Таким образом, не исключено, что грелин может играть важную роль в поведении при приеме пищи, а также, возможно, при хроническом переедании или недоедании (19).Из-за своего двойного действия грелин может быть важным гормональным сигналом нутритивного статуса для соматотропной оси, играя роль в интеграции энергетического баланса с процессом роста (20).

Грелин недоступен для долгосрочных исследований на людях в США, однако синтетический агонист GHS-R GHRP-2 (DalaDßNalAlaTrpDPheLysNH ₂ ) доступен для клинических исследований. GHRP-2 принадлежит к семейству GHS, обнаруженных в 1980-х годах и широко изученных на предмет их влияния на высвобождение GH (21).Несмотря на очень разный химический состав природного грелина и синтетического СГС, все больше и больше доказательств подтверждают, что они обладают одинаковым биологическим действием. Как и грелин, СГС увеличивают потребление пищи и массу тела у грызунов (22). Было показано, что GHRP-2 повышает рейтинг аппетита у детей с идиопатическим GH, постоянно получающих пероральный GHRP-2 (23).

Целью этого исследования было выяснить, стимулирует ли GHRP-2 прием пищи у здоровых людей. Подобно исследованию Wren et al.(11), которые использовали грелин, мы протестировали влияние кратковременной подкожной (п / к) инфузии GHRP-2 на потребление пищи во время шведского стола.

Методы

Субъекты

Семь худых мужчин (возраст 26,0 ± 1,6 года, ИМТ 21,5 ± 1,7 кг / м) ² , масса жира 14,4 ± 1,1% по антропометрическим данным, вес стабильный, здоровый, без лекарств, без лекарств В исследовании принимали участие курящие, не соблюдающие диету, без каких-либо расстройств пищевого поведения.Обзорный совет больницы Св. Луки / Рузвельта одобрил протокол исследования, и до включения в исследование было получено информированное письменное согласие.Сеанс скрининга включал полный медицинский осмотр, стандартные лабораторные анализы, тест на вкус и пробный обед. Испытуемые должны были оценить свое пристрастие к еде на «5». или более в среднем (по шкале от 0 до 7) и должны были съесть не менее 2090 кДж во время скринингового пробного завтрака.

Дизайн исследования

Субъектов изучали после ночного голодания в течение двух дней подряд, разделенных как минимум неделей. Рандомизированным двойным слепым методом GHRP-2 (1 мкг / кг / ч) или плацебо вводили на протяжении всего эксперимента (включая время еды) через подкожный катетер, прикрепленный к помпе (Minimed 508).Кровь собирали для последующего измерения гормонов через внутривенный катетер, помещенный в предплечье, и отбирали пробы каждые 30 минут до начала приема пищи. Шведский стол включал в себя несколько блюд, которые подавались в избытке, чтобы удовлетворить любой аппетит. Во время еды в лаборатории за испытуемыми наблюдали с помощью камеры, чтобы гарантировать их безопасность и чтобы они не избавлялись от пищи никаким другим способом, кроме еды. Фиксированный стандартный тестовый завтрак давали через 120 минут после начала инфузии, а обед ad libitum предлагали через 240 минут.Завтрак состоял из 1,5 английских маффинов, 5 г сливочного масла и 125 мл яблочного сока (1254 кДж, 65% СНО, 4% белка, 31% жира). Перед обедом «шведский стол» испытуемые слушали записанную на пленку инструкцию «есть столько, сколько они хотят». Во время обеда «шведский стол» подавались макароны, булочки, горох и морковь, печенье с шоколадной крошкой, яблочный соус, куриные наггетсы и филе в панировке, а также вода. Пища взвешивалась до и после еды и подсчитывалась калорийность. После еды настой прекращали.Визуальные аналоговые шкалы (от 0 «совсем нет» до 150 мм «чрезвычайно») для оценки голода и степени насыщения применялись до начала инфузии, до и после завтрака, а также до и после завершения обеденного приема пищи. Положение меток на шкале 150 мм измерялось в миллиметрах слепым исследователем.

Анализы

Концентрации гормона роста в сыворотке измеряли в двух экземплярах с помощью радиоизотопного набора для количественного определения гормона роста от Nichols Institute Diagnostic (Сан-Хуан, Калифорния).Чувствительность анализа составляла 0,2 мкг / л, а медианные коэффициенты вариации внутри и между анализами составляли 2,9% и 7,5% соответственно. Уровни кортизола в сыворотке измеряли радиоиммуноанализом (набор от DSL, Webster, TX). Чувствительность анализа составила 0,11 нг / дл. Средняя вариация внутри и между исследованиями составила 3,8% и 5,9% соответственно. Сбор крови у одного субъекта был неполным, поэтому приводятся данные по шести субъектам.

Статистика

Сравнение GHRP-2 и плацебо проводилось с помощью парного t-критерия для всех переменных.Гормональный ответ оценивали как площадь под кривой (AUC), измеренную трапециевидным методом. Для уровня значимости использовалось значение p 0,05. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего, если не указано иное. Для статистического анализа использовалась версия SPSS 11.5.

Результаты

О побочных эффектах инфузии не сообщалось. Прием пищи во время «шведского стола» увеличился на 35,9 ± 10,9% (от 12 до 95%) с GHRP-2 по сравнению с плацебо. Каждый субъект ответил на инфузию GHRP-2 увеличением потребления пищи, независимо от количества еды, съеденной во время контрольного эксперимента с физиологическим раствором ().Общее количество съеденных калорий было больше с GHRP-2, чем с плацебо (9409 ± 1229 кДж против 7118 ± 1078 кДж, p = 0,004), как и количество съеденных кДж на кг массы тела (136 ± 13 кДж / кг против 101 ± 10 кДж / кг, p = 0,008). Испытуемые ели больше CHO (58 ± 14 г, p = 0,006), белка (17 ± 4 г, p = 0,005) и жира (38 ± 10 г, p = 0,008) с GHRP-2, чем плацебо, и полученная пропорция калорий от каждого питательного вещества не отличался в двух условиях (результаты не показаны). Продолжительность приема пищи ad libitum была такой же, как с GHRP-2, так и без него (30 ± 8 мин vs.32 ± 6 мин, p = 0,667). Таким образом, потребление пищи за интервал (количество калорий, потребляемых во время еды, деленное на продолжительность приема пищи) было больше, но не значительно, с GHRP-2, чем с плацебо (322 ± 33 кДж / мин против 276 ± 38 кДж / мин, р = 0,179). Основываясь на ВАШ, исходные оценки голода и сытости не различались в зависимости от состояния. Однако во время инфузии GHRP-2 субъекты чувствовали себя более голодными (112,6 ± 7,5 мм против 89,7 ± 12,2, p = 0,013) перед обедом и демонстрировали тенденцию к увеличению сытости после обеда (134,1 ± 6,0 мм против 118.6 ± 10,3 мм, p = 0,054).

Индивидуальные изменения в потреблении энергии от шведского стола, график на вставке показывает среднее ± средн.

Уровни hGH значительно увеличились во время инфузии GHRP-2, достигнув плато 36,4 ± 7,0 мкг / л через 60 минут после начала инфузии. Уровни GH были значительно выше во время инфузии GHRP-2 (AUC 5550 ± 1090 мкг / л / 240 мин по сравнению с 412 ± 161 мкг / л / 240 мин, p = 0,003) (). Уровни кортизола в сыворотке крови временно повышались при приеме GHRP-2 по сравнению с плацебо (результаты не показаны).

Инфузия GHRP-2 (1 мкг / кг / ч) и физиологического раствора начиналась в 0 мин, а завтрак подавался через 120 мин.

Обсуждение

Это первые данные, демонстрирующие, что периферическое введение GHRP-2 увеличивает потребление пищи людьми. Эффект GHRP-2 устойчив и вызывал увеличение потребления пищи у всех испытуемых. Субъекты сообщили, что испытывали чувство голода при приеме GHRP-2. Величина влияния GHRP-2 на потребление пищи (+ 35%) сравнима с эффектом грелина, который, как было ранее показано, увеличивает потребление пищи на 28% у здоровых субъектов (11) и на 31% у больных раком (12).Эффект 1 мкг / кг / ч GHRP-2 сравним с эффектом грелина (5 пмоль / кг / мин) не только на прием пищи, но и на высвобождение GH. В исследовании Wren (5) (также у здоровых поджарых субъектов) грелин поднял GH до аналогичных уровней (около 35 мкг / л). Следовательно, грелин или его миметик GHRP-2 при периферическом введении способен вызывать значительные острые изменения аналогичной степени как в уровне GH, так и в поведении при приеме пищи.

Гормональное регулирование приема пищи можно разделить на долгосрочные сигналы накопления жира (лептин и инсулин) и краткосрочные сигналы начала приема пищи и насыщения (грелин, CCK и PYY).Грелин, хотя в основном секретируется в желудке, считается, что он действует центрально на нейроны NPY-AGRP дугообразного ядра (9,10). Механизм и количество циркулирующего периферического грелина, достигающего этих нейронов гипоталамуса, неясны. У грызунов как центральное, так и периферическое введение грелина (4) или GHS (s) (21,22) стимулируют прием пищи. Имеющиеся данные свидетельствуют о том, что спонтанное изменение концентрации эндогенного сывороточного грелина может играть роль в продолжительности перерыва между приемами пищи, повторении голода и последующем размере еды (24).Постпрандиальное подавление грелина пропорционально размеру еды, но не предсказывает промежуток между приемами пищи (25). Исследования, основанные на утренних уровнях грелина в сыворотке крови натощак, не обнаружили положительной (25) или отрицательной (26) зависимости между уровнями грелина в плазме натощак и потреблением пищи ad libitum. Неясно, являются ли уровни общего грелина натощак (н-октаноил плюс дезоктаноил) лучшим маркером для последующего приема пищи. Кроме того, интегрированное 24-часовое высвобождение грелина может быть лучшим предиктором краткосрочного энергетического баланса / приема пищи (27), так же как интегрированные 24-часовые уровни лептина являются лучшим показателем дневного потребления пищи и секреции инсулина (28), чем утреннее голодание. уровни лептина.Как наши данные с GHRP-2, так и другие с грелином (11,12) показывают, что периферическое вливание этих орексигенных пептидов может вызвать сильное резкое изменение в поведении людей при приеме пищи. Это предполагает, хотя и не доказывает, возможную роль периферического циркулирующего грелина в регуляции приема пищи (13, 25). Однако маловероятно, что простые изменения сывороточного уровня одного грелина определяют величину или тип последующих эффектов через активацию центральных и периферических рецепторов (29).

Как сообщалось ранее (30), подкожная инфузия GHRP-2 в течение 270 минут является безопасной. Соответственно, не сообщалось о побочных эффектах во время 30-дневной подкожной непрерывной инфузии GHRP-2 (30) или 12-месячного перорального введения препарата детям (23).

Два исследования показали, что хроническое введение GHRP-2 маленьким детям с различной степенью дефицита GH вызывает стойкое повышение скорости линейного роста (23,31). Это предполагает возможность того, что острый эффект GHRP-2 на потребление пищи, наблюдаемый в нашем исследовании, мог бы привести к состоянию положительного энергетического баланса, если бы GHRP-2 вводился хронически.Тщательно разработанные и оптимизированные хронические исследования, включая подробный мониторинг состава тела и приема пищи, помогут продемонстрировать долгосрочное влияние СГС на потребление пищи и массу тела. Хотя GHRP-2 значительно увеличивал GH, маловероятно, судя по результатам одного rhGH, что это увеличение уровней GH является ответственным за резкие изменения в потреблении пищи в этом исследовании. Кроме того, гипоталамический путь и механизм, с помощью которого GHS усиливают потребление пищи, отчетливо отличаются от тех, с помощью которых GHS усиливают секрецию GH (4,7,33,34).Кроме того, стимуляция приема пищи грелином или GHS сохраняется у крыс с дефицитом GH (10).

В большинстве опубликованных на данный момент отчетов биоактивная молекула грелина не измерялась в плазме человека и вводились большие фармакологические, а не физиологические дозы грелина. Другие соответствующие будущие цели для лучшего понимания физиологии и патофизиологии системы грелина у людей потребуют более конкретных и частых измерений уровней грелина в плазме, а также определения того, насколько близко фармакологические и физиологические действия грелина параллельны друг другу.GHRP-2, как и грелин, является полезным инструментом для клинических исследований, помогающим понять сложность регуляции поведения человека при приеме пищи.

Выражение признательности

NIH DK 02572-01 и GCRC RR 00645 и 05096, ORC 26687. Мы благодарим MINIMED за предоставление нам инфузионного насоса и всех расходных материалов.

Информация для авторов

Бландин Лаферрер, Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Св. Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, Нью-Йорк, Нью-Йорк 10025.

Синтия Абрахам, Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Св. Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, Нью-Йорк , NY 10025.

Коллин Д. Рассел, Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Св. Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, Нью-Йорк, Нью-Йорк 10025.

Сирил Я. Бауэрс, Центр медицинских наук Тулейнского университета, Новый Орлеан, Луизиана 70112.

Ссылки

Пептид, высвобождающий гормон роста 2 (GHRP-2), как и грелин, увеличивает потребление пищи у здоровых мужчин

J Clin Endocrinol Metab.Авторская рукопись; доступно в PMC 2010 18 февраля.

Опубликован в окончательной редакции как:

PMCID: PMC2824650

NIHMSID: NIHMS176333

Бландин Лаферрер

Исследовательский центр ожирения, Амстердамский центр им. Рузвельта, Сент-Люк, 1090 , NY 10025

Cynthia Abraham

Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Св. Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, Нью-Йорк, Нью-Йорк 10025

Коллин Д. Рассел

Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Св. Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, New York, NY 10025

Cyril Y.Bowers

Центр медицинских наук Тулейнского университета, Новый Орлеан, Луизиана 70112

Бландин Лаферрер, Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Св. Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, Нью-Йорк, Нью-Йорк 10025;

Abstract

GHRP-2 — синтетический агонист грелина, недавно открытого кишечного пептида, который связывается с рецептором, стимулирующим секрецию гормона роста (GH). Было показано, что грелин обладает двумя основными эффектами: он стимулирует секрецию гормона роста и начало аппетита / приема пищи.GHRP-2 был тщательно изучен на предмет его полезности в качестве стимулятора секреции гормона роста (GHS). Исследования на животных показали его влияние на прием пищи. Однако неизвестно, может ли GHRP-2 стимулировать аппетит у людей при остром введении. Мы подкожно вводили 7 худым, здоровым мужчинам GHRP-2 (1 мкг / кг / ч) или физиологический раствор в течение 270 минут, а затем измерили их потребление в неограниченном количестве, в форме шведского стола. Подобно тому, что сообщалось при введении грелина, наши субъекты ели на 35,9 ± 10,9% больше при введении GHRP-2 по сравнению сфизиологический раствор, при этом каждый субъект увеличивал свое потребление даже в расчете на кг массы тела (136,0 ± 13,0 кДж / кг против 101,3 ± 10,5 кДж / кг, p = 0,008). Макроэлементный состав потребляемой пищи не отличался в зависимости от условий. Как и ожидалось, сывороточные уровни GH значительно выросли во время инфузии GHRP-2 (AUC 5550 ± 1090 мкг / л / 240 мин против 412 ± 161 мкг / л / 240 мин, p = 0,003). Эти данные впервые демонстрируют, что GHRP-2, как и грелин, увеличивает потребление пищи, что позволяет предположить, что GHRP-2 является ценным инструментом для исследования влияния грелина на пищевое поведение людей.

Введение

Грелин, недавно идентифицированный пептид, секретируемый эндокринными клетками желудка (1), вызвал большой интерес благодаря своим двойным эффектам. Этот эндогенный лиганд рецептора, стимулирующего секрецию гормона роста (GHS-R), который был клонирован в 1996 г. (2), регулирует высвобождение гормона роста (GH) (3). Грелин также играет роль в регулировании приема пищи и энергетического баланса. При центральном или периферическом введении грызунам грелин увеличивает потребление пищи и массу тела (4,5).Интересно, что его влияние на потребление пищи не зависит от секреции GH (4,6-8) и, по-видимому, опосредуется через нейроны NPY / Agouti, связанные с геном белка (AGRP) в дугообразном ядре гипоталамуса (9,10). Недавно было показано, что периферическое введение грелина стимулирует прием пищи у стройных, здоровых мужчин и женщин (11) и у онкологических больных (12).

Данные показывают, что циркулирующий грелин также участвует в регуляции приема пищи. Уровни грелина повышаются в ожидании еды (13) и подавляются при приеме пищи (13, 14), но основные механизмы неизвестны.Связанное с приемом пищи подавление грелина пропорционально содержанию углеводов (СНО) в пище, но, по-видимому, не связано напрямую с глюкозой или инсулином (14,15), хотя введение инсулина снижает уровень грелина (16).

Уровни грелина в сыворотке крови зависят от энергетического баланса. Уровень грелина повышается при анорексии (17) и снижается при ожирении (18). Таким образом, не исключено, что грелин может играть важную роль в поведении при приеме пищи, а также, возможно, при хроническом переедании или недоедании (19).Из-за своего двойного действия грелин может быть важным гормональным сигналом нутритивного статуса для соматотропной оси, играя роль в интеграции энергетического баланса с процессом роста (20).

Грелин недоступен для долгосрочных исследований на людях в США, однако синтетический агонист GHS-R GHRP-2 (DalaDßNalAlaTrpDPheLysNH ₂ ) доступен для клинических исследований. GHRP-2 принадлежит к семейству GHS, обнаруженных в 1980-х годах и широко изученных на предмет их влияния на высвобождение GH (21).Несмотря на очень разный химический состав природного грелина и синтетического СГС, все больше и больше доказательств подтверждают, что они обладают одинаковым биологическим действием. Как и грелин, СГС увеличивают потребление пищи и массу тела у грызунов (22). Было показано, что GHRP-2 повышает рейтинг аппетита у детей с идиопатическим GH, постоянно получающих пероральный GHRP-2 (23).

Целью этого исследования было выяснить, стимулирует ли GHRP-2 прием пищи у здоровых людей. Подобно исследованию Wren et al.(11), которые использовали грелин, мы протестировали влияние кратковременной подкожной (п / к) инфузии GHRP-2 на потребление пищи во время шведского стола.

Методы

Субъекты

Семь худых мужчин (возраст 26,0 ± 1,6 года, ИМТ 21,5 ± 1,7 кг / м) ² , масса жира 14,4 ± 1,1% по антропометрическим данным, вес стабильный, здоровый, без лекарств, без лекарств В исследовании принимали участие курящие, не соблюдающие диету, без каких-либо расстройств пищевого поведения.Обзорный совет больницы Св. Луки / Рузвельта одобрил протокол исследования, и до включения в исследование было получено информированное письменное согласие.Сеанс скрининга включал полный медицинский осмотр, стандартные лабораторные анализы, тест на вкус и пробный обед. Испытуемые должны были оценить свое пристрастие к еде на «5». или более в среднем (по шкале от 0 до 7) и должны были съесть не менее 2090 кДж во время скринингового пробного завтрака.

Дизайн исследования

Субъектов изучали после ночного голодания в течение двух дней подряд, разделенных как минимум неделей. Рандомизированным двойным слепым методом GHRP-2 (1 мкг / кг / ч) или плацебо вводили на протяжении всего эксперимента (включая время еды) через подкожный катетер, прикрепленный к помпе (Minimed 508).Кровь собирали для последующего измерения гормонов через внутривенный катетер, помещенный в предплечье, и отбирали пробы каждые 30 минут до начала приема пищи. Шведский стол включал в себя несколько блюд, которые подавались в избытке, чтобы удовлетворить любой аппетит. Во время еды в лаборатории за испытуемыми наблюдали с помощью камеры, чтобы гарантировать их безопасность и чтобы они не избавлялись от пищи никаким другим способом, кроме еды. Фиксированный стандартный тестовый завтрак давали через 120 минут после начала инфузии, а обед ad libitum предлагали через 240 минут.Завтрак состоял из 1,5 английских маффинов, 5 г сливочного масла и 125 мл яблочного сока (1254 кДж, 65% СНО, 4% белка, 31% жира). Перед обедом «шведский стол» испытуемые слушали записанную на пленку инструкцию «есть столько, сколько они хотят». Во время обеда «шведский стол» подавались макароны, булочки, горох и морковь, печенье с шоколадной крошкой, яблочный соус, куриные наггетсы и филе в панировке, а также вода. Пища взвешивалась до и после еды и подсчитывалась калорийность. После еды настой прекращали.Визуальные аналоговые шкалы (от 0 «совсем нет» до 150 мм «чрезвычайно») для оценки голода и степени насыщения применялись до начала инфузии, до и после завтрака, а также до и после завершения обеденного приема пищи. Положение меток на шкале 150 мм измерялось в миллиметрах слепым исследователем.

Анализы

Концентрации гормона роста в сыворотке измеряли в двух экземплярах с помощью радиоизотопного набора для количественного определения гормона роста от Nichols Institute Diagnostic (Сан-Хуан, Калифорния).Чувствительность анализа составляла 0,2 мкг / л, а медианные коэффициенты вариации внутри и между анализами составляли 2,9% и 7,5% соответственно. Уровни кортизола в сыворотке измеряли радиоиммуноанализом (набор от DSL, Webster, TX). Чувствительность анализа составила 0,11 нг / дл. Средняя вариация внутри и между исследованиями составила 3,8% и 5,9% соответственно. Сбор крови у одного субъекта был неполным, поэтому приводятся данные по шести субъектам.

Статистика

Сравнение GHRP-2 и плацебо проводилось с помощью парного t-критерия для всех переменных.Гормональный ответ оценивали как площадь под кривой (AUC), измеренную трапециевидным методом. Для уровня значимости использовалось значение p 0,05. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего, если не указано иное. Для статистического анализа использовалась версия SPSS 11.5.

Результаты

О побочных эффектах инфузии не сообщалось. Прием пищи во время «шведского стола» увеличился на 35,9 ± 10,9% (от 12 до 95%) с GHRP-2 по сравнению с плацебо. Каждый субъект ответил на инфузию GHRP-2 увеличением потребления пищи, независимо от количества еды, съеденной во время контрольного эксперимента с физиологическим раствором ().Общее количество съеденных калорий было больше с GHRP-2, чем с плацебо (9409 ± 1229 кДж против 7118 ± 1078 кДж, p = 0,004), как и количество съеденных кДж на кг массы тела (136 ± 13 кДж / кг против 101 ± 10 кДж / кг, p = 0,008). Испытуемые ели больше CHO (58 ± 14 г, p = 0,006), белка (17 ± 4 г, p = 0,005) и жира (38 ± 10 г, p = 0,008) с GHRP-2, чем плацебо, и полученная пропорция калорий от каждого питательного вещества не отличался в двух условиях (результаты не показаны). Продолжительность приема пищи ad libitum была такой же, как с GHRP-2, так и без него (30 ± 8 мин vs.32 ± 6 мин, p = 0,667). Таким образом, потребление пищи за интервал (количество калорий, потребляемых во время еды, деленное на продолжительность приема пищи) было больше, но не значительно, с GHRP-2, чем с плацебо (322 ± 33 кДж / мин против 276 ± 38 кДж / мин, р = 0,179). Основываясь на ВАШ, исходные оценки голода и сытости не различались в зависимости от состояния. Однако во время инфузии GHRP-2 субъекты чувствовали себя более голодными (112,6 ± 7,5 мм против 89,7 ± 12,2, p = 0,013) перед обедом и демонстрировали тенденцию к увеличению сытости после обеда (134,1 ± 6,0 мм против 118.6 ± 10,3 мм, p = 0,054).

Индивидуальные изменения в потреблении энергии от шведского стола, график на вставке показывает среднее ± средн.

Уровни hGH значительно увеличились во время инфузии GHRP-2, достигнув плато 36,4 ± 7,0 мкг / л через 60 минут после начала инфузии. Уровни GH были значительно выше во время инфузии GHRP-2 (AUC 5550 ± 1090 мкг / л / 240 мин по сравнению с 412 ± 161 мкг / л / 240 мин, p = 0,003) (). Уровни кортизола в сыворотке крови временно повышались при приеме GHRP-2 по сравнению с плацебо (результаты не показаны).

Инфузия GHRP-2 (1 мкг / кг / ч) и физиологического раствора начиналась в 0 мин, а завтрак подавался через 120 мин.

Обсуждение

Это первые данные, демонстрирующие, что периферическое введение GHRP-2 увеличивает потребление пищи людьми. Эффект GHRP-2 устойчив и вызывал увеличение потребления пищи у всех испытуемых. Субъекты сообщили, что испытывали чувство голода при приеме GHRP-2. Величина влияния GHRP-2 на потребление пищи (+ 35%) сравнима с эффектом грелина, который, как было ранее показано, увеличивает потребление пищи на 28% у здоровых субъектов (11) и на 31% у больных раком (12).Эффект 1 мкг / кг / ч GHRP-2 сравним с эффектом грелина (5 пмоль / кг / мин) не только на прием пищи, но и на высвобождение GH. В исследовании Wren (5) (также у здоровых поджарых субъектов) грелин поднял GH до аналогичных уровней (около 35 мкг / л). Следовательно, грелин или его миметик GHRP-2 при периферическом введении способен вызывать значительные острые изменения аналогичной степени как в уровне GH, так и в поведении при приеме пищи.

Гормональное регулирование приема пищи можно разделить на долгосрочные сигналы накопления жира (лептин и инсулин) и краткосрочные сигналы начала приема пищи и насыщения (грелин, CCK и PYY).Грелин, хотя в основном секретируется в желудке, считается, что он действует центрально на нейроны NPY-AGRP дугообразного ядра (9,10). Механизм и количество циркулирующего периферического грелина, достигающего этих нейронов гипоталамуса, неясны. У грызунов как центральное, так и периферическое введение грелина (4) или GHS (s) (21,22) стимулируют прием пищи. Имеющиеся данные свидетельствуют о том, что спонтанное изменение концентрации эндогенного сывороточного грелина может играть роль в продолжительности перерыва между приемами пищи, повторении голода и последующем размере еды (24).Постпрандиальное подавление грелина пропорционально размеру еды, но не предсказывает промежуток между приемами пищи (25). Исследования, основанные на утренних уровнях грелина в сыворотке крови натощак, не обнаружили положительной (25) или отрицательной (26) зависимости между уровнями грелина в плазме натощак и потреблением пищи ad libitum. Неясно, являются ли уровни общего грелина натощак (н-октаноил плюс дезоктаноил) лучшим маркером для последующего приема пищи. Кроме того, интегрированное 24-часовое высвобождение грелина может быть лучшим предиктором краткосрочного энергетического баланса / приема пищи (27), так же как интегрированные 24-часовые уровни лептина являются лучшим показателем дневного потребления пищи и секреции инсулина (28), чем утреннее голодание. уровни лептина.Как наши данные с GHRP-2, так и другие с грелином (11,12) показывают, что периферическое вливание этих орексигенных пептидов может вызвать сильное резкое изменение в поведении людей при приеме пищи. Это предполагает, хотя и не доказывает, возможную роль периферического циркулирующего грелина в регуляции приема пищи (13, 25). Однако маловероятно, что простые изменения сывороточного уровня одного грелина определяют величину или тип последующих эффектов через активацию центральных и периферических рецепторов (29).

Как сообщалось ранее (30), подкожная инфузия GHRP-2 в течение 270 минут является безопасной. Соответственно, не сообщалось о побочных эффектах во время 30-дневной подкожной непрерывной инфузии GHRP-2 (30) или 12-месячного перорального введения препарата детям (23).

Два исследования показали, что хроническое введение GHRP-2 маленьким детям с различной степенью дефицита GH вызывает стойкое повышение скорости линейного роста (23,31). Это предполагает возможность того, что острый эффект GHRP-2 на потребление пищи, наблюдаемый в нашем исследовании, мог бы привести к состоянию положительного энергетического баланса, если бы GHRP-2 вводился хронически.Тщательно разработанные и оптимизированные хронические исследования, включая подробный мониторинг состава тела и приема пищи, помогут продемонстрировать долгосрочное влияние СГС на потребление пищи и массу тела. Хотя GHRP-2 значительно увеличивал GH, маловероятно, судя по результатам одного rhGH, что это увеличение уровней GH является ответственным за резкие изменения в потреблении пищи в этом исследовании. Кроме того, гипоталамический путь и механизм, с помощью которого GHS усиливают потребление пищи, отчетливо отличаются от тех, с помощью которых GHS усиливают секрецию GH (4,7,33,34).Кроме того, стимуляция приема пищи грелином или GHS сохраняется у крыс с дефицитом GH (10).

В большинстве опубликованных на данный момент отчетов биоактивная молекула грелина не измерялась в плазме человека и вводились большие фармакологические, а не физиологические дозы грелина. Другие соответствующие будущие цели для лучшего понимания физиологии и патофизиологии системы грелина у людей потребуют более конкретных и частых измерений уровней грелина в плазме, а также определения того, насколько близко фармакологические и физиологические действия грелина параллельны друг другу.GHRP-2, как и грелин, является полезным инструментом для клинических исследований, помогающим понять сложность регуляции поведения человека при приеме пищи.

Выражение признательности

NIH DK 02572-01 и GCRC RR 00645 и 05096, ORC 26687. Мы благодарим MINIMED за предоставление нам инфузионного насоса и всех расходных материалов.

Информация для авторов

Бландин Лаферрер, Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Св. Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, Нью-Йорк, Нью-Йорк 10025.

Синтия Абрахам, Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Св. Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, Нью-Йорк , NY 10025.

Коллин Д. Рассел, Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Св. Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, Нью-Йорк, Нью-Йорк 10025.

Сирил Я. Бауэрс, Центр медицинских наук Тулейнского университета, Новый Орлеан, Луизиана 70112.

Ссылки

Пептид, высвобождающий гормон роста 2 (GHRP-2), как и грелин, увеличивает потребление пищи у здоровых мужчин

J Clin Endocrinol Metab.Авторская рукопись; доступно в PMC 2010 18 февраля.

Опубликован в окончательной редакции как:

PMCID: PMC2824650

NIHMSID: NIHMS176333

Бландин Лаферрер

Исследовательский центр ожирения, Амстердамский центр им. Рузвельта, Сент-Люк, 1090 , NY 10025

Cynthia Abraham

Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Св. Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, Нью-Йорк, Нью-Йорк 10025

Коллин Д. Рассел

Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Св. Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, New York, NY 10025

Cyril Y.Bowers

Центр медицинских наук Тулейнского университета, Новый Орлеан, Луизиана 70112

Бландин Лаферрер, Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Св. Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, Нью-Йорк, Нью-Йорк 10025;

Abstract

GHRP-2 — синтетический агонист грелина, недавно открытого кишечного пептида, который связывается с рецептором, стимулирующим секрецию гормона роста (GH). Было показано, что грелин обладает двумя основными эффектами: он стимулирует секрецию гормона роста и начало аппетита / приема пищи.GHRP-2 был тщательно изучен на предмет его полезности в качестве стимулятора секреции гормона роста (GHS). Исследования на животных показали его влияние на прием пищи. Однако неизвестно, может ли GHRP-2 стимулировать аппетит у людей при остром введении. Мы подкожно вводили 7 худым, здоровым мужчинам GHRP-2 (1 мкг / кг / ч) или физиологический раствор в течение 270 минут, а затем измерили их потребление в неограниченном количестве, в форме шведского стола. Подобно тому, что сообщалось при введении грелина, наши субъекты ели на 35,9 ± 10,9% больше при введении GHRP-2 по сравнению сфизиологический раствор, при этом каждый субъект увеличивал свое потребление даже в расчете на кг массы тела (136,0 ± 13,0 кДж / кг против 101,3 ± 10,5 кДж / кг, p = 0,008). Макроэлементный состав потребляемой пищи не отличался в зависимости от условий. Как и ожидалось, сывороточные уровни GH значительно выросли во время инфузии GHRP-2 (AUC 5550 ± 1090 мкг / л / 240 мин против 412 ± 161 мкг / л / 240 мин, p = 0,003). Эти данные впервые демонстрируют, что GHRP-2, как и грелин, увеличивает потребление пищи, что позволяет предположить, что GHRP-2 является ценным инструментом для исследования влияния грелина на пищевое поведение людей.

Введение

Грелин, недавно идентифицированный пептид, секретируемый эндокринными клетками желудка (1), вызвал большой интерес благодаря своим двойным эффектам. Этот эндогенный лиганд рецептора, стимулирующего секрецию гормона роста (GHS-R), который был клонирован в 1996 г. (2), регулирует высвобождение гормона роста (GH) (3). Грелин также играет роль в регулировании приема пищи и энергетического баланса. При центральном или периферическом введении грызунам грелин увеличивает потребление пищи и массу тела (4,5).Интересно, что его влияние на потребление пищи не зависит от секреции GH (4,6-8) и, по-видимому, опосредуется через нейроны NPY / Agouti, связанные с геном белка (AGRP) в дугообразном ядре гипоталамуса (9,10). Недавно было показано, что периферическое введение грелина стимулирует прием пищи у стройных, здоровых мужчин и женщин (11) и у онкологических больных (12).

Данные показывают, что циркулирующий грелин также участвует в регуляции приема пищи. Уровни грелина повышаются в ожидании еды (13) и подавляются при приеме пищи (13, 14), но основные механизмы неизвестны.Связанное с приемом пищи подавление грелина пропорционально содержанию углеводов (СНО) в пище, но, по-видимому, не связано напрямую с глюкозой или инсулином (14,15), хотя введение инсулина снижает уровень грелина (16).

Уровни грелина в сыворотке крови зависят от энергетического баланса. Уровень грелина повышается при анорексии (17) и снижается при ожирении (18). Таким образом, не исключено, что грелин может играть важную роль в поведении при приеме пищи, а также, возможно, при хроническом переедании или недоедании (19).Из-за своего двойного действия грелин может быть важным гормональным сигналом нутритивного статуса для соматотропной оси, играя роль в интеграции энергетического баланса с процессом роста (20).

Грелин недоступен для долгосрочных исследований на людях в США, однако синтетический агонист GHS-R GHRP-2 (DalaDßNalAlaTrpDPheLysNH ₂ ) доступен для клинических исследований. GHRP-2 принадлежит к семейству GHS, обнаруженных в 1980-х годах и широко изученных на предмет их влияния на высвобождение GH (21).Несмотря на очень разный химический состав природного грелина и синтетического СГС, все больше и больше доказательств подтверждают, что они обладают одинаковым биологическим действием. Как и грелин, СГС увеличивают потребление пищи и массу тела у грызунов (22). Было показано, что GHRP-2 повышает рейтинг аппетита у детей с идиопатическим GH, постоянно получающих пероральный GHRP-2 (23).

Целью этого исследования было выяснить, стимулирует ли GHRP-2 прием пищи у здоровых людей. Подобно исследованию Wren et al.(11), которые использовали грелин, мы протестировали влияние кратковременной подкожной (п / к) инфузии GHRP-2 на потребление пищи во время шведского стола.

Методы

Субъекты

Семь худых мужчин (возраст 26,0 ± 1,6 года, ИМТ 21,5 ± 1,7 кг / м) ² , масса жира 14,4 ± 1,1% по антропометрическим данным, вес стабильный, здоровый, без лекарств, без лекарств В исследовании принимали участие курящие, не соблюдающие диету, без каких-либо расстройств пищевого поведения.Обзорный совет больницы Св. Луки / Рузвельта одобрил протокол исследования, и до включения в исследование было получено информированное письменное согласие.Сеанс скрининга включал полный медицинский осмотр, стандартные лабораторные анализы, тест на вкус и пробный обед. Испытуемые должны были оценить свое пристрастие к еде на «5». или более в среднем (по шкале от 0 до 7) и должны были съесть не менее 2090 кДж во время скринингового пробного завтрака.

Дизайн исследования

Субъектов изучали после ночного голодания в течение двух дней подряд, разделенных как минимум неделей. Рандомизированным двойным слепым методом GHRP-2 (1 мкг / кг / ч) или плацебо вводили на протяжении всего эксперимента (включая время еды) через подкожный катетер, прикрепленный к помпе (Minimed 508).Кровь собирали для последующего измерения гормонов через внутривенный катетер, помещенный в предплечье, и отбирали пробы каждые 30 минут до начала приема пищи. Шведский стол включал в себя несколько блюд, которые подавались в избытке, чтобы удовлетворить любой аппетит. Во время еды в лаборатории за испытуемыми наблюдали с помощью камеры, чтобы гарантировать их безопасность и чтобы они не избавлялись от пищи никаким другим способом, кроме еды. Фиксированный стандартный тестовый завтрак давали через 120 минут после начала инфузии, а обед ad libitum предлагали через 240 минут.Завтрак состоял из 1,5 английских маффинов, 5 г сливочного масла и 125 мл яблочного сока (1254 кДж, 65% СНО, 4% белка, 31% жира). Перед обедом «шведский стол» испытуемые слушали записанную на пленку инструкцию «есть столько, сколько они хотят». Во время обеда «шведский стол» подавались макароны, булочки, горох и морковь, печенье с шоколадной крошкой, яблочный соус, куриные наггетсы и филе в панировке, а также вода. Пища взвешивалась до и после еды и подсчитывалась калорийность. После еды настой прекращали.Визуальные аналоговые шкалы (от 0 «совсем нет» до 150 мм «чрезвычайно») для оценки голода и степени насыщения применялись до начала инфузии, до и после завтрака, а также до и после завершения обеденного приема пищи. Положение меток на шкале 150 мм измерялось в миллиметрах слепым исследователем.

Анализы

Концентрации гормона роста в сыворотке измеряли в двух экземплярах с помощью радиоизотопного набора для количественного определения гормона роста от Nichols Institute Diagnostic (Сан-Хуан, Калифорния).Чувствительность анализа составляла 0,2 мкг / л, а медианные коэффициенты вариации внутри и между анализами составляли 2,9% и 7,5% соответственно. Уровни кортизола в сыворотке измеряли радиоиммуноанализом (набор от DSL, Webster, TX). Чувствительность анализа составила 0,11 нг / дл. Средняя вариация внутри и между исследованиями составила 3,8% и 5,9% соответственно. Сбор крови у одного субъекта был неполным, поэтому приводятся данные по шести субъектам.

Статистика

Сравнение GHRP-2 и плацебо проводилось с помощью парного t-критерия для всех переменных.Гормональный ответ оценивали как площадь под кривой (AUC), измеренную трапециевидным методом. Для уровня значимости использовалось значение p 0,05. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего, если не указано иное. Для статистического анализа использовалась версия SPSS 11.5.

Результаты

О побочных эффектах инфузии не сообщалось. Прием пищи во время «шведского стола» увеличился на 35,9 ± 10,9% (от 12 до 95%) с GHRP-2 по сравнению с плацебо. Каждый субъект ответил на инфузию GHRP-2 увеличением потребления пищи, независимо от количества еды, съеденной во время контрольного эксперимента с физиологическим раствором ().Общее количество съеденных калорий было больше с GHRP-2, чем с плацебо (9409 ± 1229 кДж против 7118 ± 1078 кДж, p = 0,004), как и количество съеденных кДж на кг массы тела (136 ± 13 кДж / кг против 101 ± 10 кДж / кг, p = 0,008). Испытуемые ели больше CHO (58 ± 14 г, p = 0,006), белка (17 ± 4 г, p = 0,005) и жира (38 ± 10 г, p = 0,008) с GHRP-2, чем плацебо, и полученная пропорция калорий от каждого питательного вещества не отличался в двух условиях (результаты не показаны). Продолжительность приема пищи ad libitum была такой же, как с GHRP-2, так и без него (30 ± 8 мин vs.32 ± 6 мин, p = 0,667). Таким образом, потребление пищи за интервал (количество калорий, потребляемых во время еды, деленное на продолжительность приема пищи) было больше, но не значительно, с GHRP-2, чем с плацебо (322 ± 33 кДж / мин против 276 ± 38 кДж / мин, р = 0,179). Основываясь на ВАШ, исходные оценки голода и сытости не различались в зависимости от состояния. Однако во время инфузии GHRP-2 субъекты чувствовали себя более голодными (112,6 ± 7,5 мм против 89,7 ± 12,2, p = 0,013) перед обедом и демонстрировали тенденцию к увеличению сытости после обеда (134,1 ± 6,0 мм против 118.6 ± 10,3 мм, p = 0,054).

Индивидуальные изменения в потреблении энергии от шведского стола, график на вставке показывает среднее ± средн.

Уровни hGH значительно увеличились во время инфузии GHRP-2, достигнув плато 36,4 ± 7,0 мкг / л через 60 минут после начала инфузии. Уровни GH были значительно выше во время инфузии GHRP-2 (AUC 5550 ± 1090 мкг / л / 240 мин по сравнению с 412 ± 161 мкг / л / 240 мин, p = 0,003) (). Уровни кортизола в сыворотке крови временно повышались при приеме GHRP-2 по сравнению с плацебо (результаты не показаны).

Инфузия GHRP-2 (1 мкг / кг / ч) и физиологического раствора начиналась в 0 мин, а завтрак подавался через 120 мин.

Обсуждение

Это первые данные, демонстрирующие, что периферическое введение GHRP-2 увеличивает потребление пищи людьми. Эффект GHRP-2 устойчив и вызывал увеличение потребления пищи у всех испытуемых. Субъекты сообщили, что испытывали чувство голода при приеме GHRP-2. Величина влияния GHRP-2 на потребление пищи (+ 35%) сравнима с эффектом грелина, который, как было ранее показано, увеличивает потребление пищи на 28% у здоровых субъектов (11) и на 31% у больных раком (12).Эффект 1 мкг / кг / ч GHRP-2 сравним с эффектом грелина (5 пмоль / кг / мин) не только на прием пищи, но и на высвобождение GH. В исследовании Wren (5) (также у здоровых поджарых субъектов) грелин поднял GH до аналогичных уровней (около 35 мкг / л). Следовательно, грелин или его миметик GHRP-2 при периферическом введении способен вызывать значительные острые изменения аналогичной степени как в уровне GH, так и в поведении при приеме пищи.

Гормональное регулирование приема пищи можно разделить на долгосрочные сигналы накопления жира (лептин и инсулин) и краткосрочные сигналы начала приема пищи и насыщения (грелин, CCK и PYY).Грелин, хотя в основном секретируется в желудке, считается, что он действует центрально на нейроны NPY-AGRP дугообразного ядра (9,10). Механизм и количество циркулирующего периферического грелина, достигающего этих нейронов гипоталамуса, неясны. У грызунов как центральное, так и периферическое введение грелина (4) или GHS (s) (21,22) стимулируют прием пищи. Имеющиеся данные свидетельствуют о том, что спонтанное изменение концентрации эндогенного сывороточного грелина может играть роль в продолжительности перерыва между приемами пищи, повторении голода и последующем размере еды (24).Постпрандиальное подавление грелина пропорционально размеру еды, но не предсказывает промежуток между приемами пищи (25). Исследования, основанные на утренних уровнях грелина в сыворотке крови натощак, не обнаружили положительной (25) или отрицательной (26) зависимости между уровнями грелина в плазме натощак и потреблением пищи ad libitum. Неясно, являются ли уровни общего грелина натощак (н-октаноил плюс дезоктаноил) лучшим маркером для последующего приема пищи. Кроме того, интегрированное 24-часовое высвобождение грелина может быть лучшим предиктором краткосрочного энергетического баланса / приема пищи (27), так же как интегрированные 24-часовые уровни лептина являются лучшим показателем дневного потребления пищи и секреции инсулина (28), чем утреннее голодание. уровни лептина.Как наши данные с GHRP-2, так и другие с грелином (11,12) показывают, что периферическое вливание этих орексигенных пептидов может вызвать сильное резкое изменение в поведении людей при приеме пищи. Это предполагает, хотя и не доказывает, возможную роль периферического циркулирующего грелина в регуляции приема пищи (13, 25). Однако маловероятно, что простые изменения сывороточного уровня одного грелина определяют величину или тип последующих эффектов через активацию центральных и периферических рецепторов (29).

Как сообщалось ранее (30), подкожная инфузия GHRP-2 в течение 270 минут является безопасной. Соответственно, не сообщалось о побочных эффектах во время 30-дневной подкожной непрерывной инфузии GHRP-2 (30) или 12-месячного перорального введения препарата детям (23).

Два исследования показали, что хроническое введение GHRP-2 маленьким детям с различной степенью дефицита GH вызывает стойкое повышение скорости линейного роста (23,31). Это предполагает возможность того, что острый эффект GHRP-2 на потребление пищи, наблюдаемый в нашем исследовании, мог бы привести к состоянию положительного энергетического баланса, если бы GHRP-2 вводился хронически.Тщательно разработанные и оптимизированные хронические исследования, включая подробный мониторинг состава тела и приема пищи, помогут продемонстрировать долгосрочное влияние СГС на потребление пищи и массу тела. Хотя GHRP-2 значительно увеличивал GH, маловероятно, судя по результатам одного rhGH, что это увеличение уровней GH является ответственным за резкие изменения в потреблении пищи в этом исследовании. Кроме того, гипоталамический путь и механизм, с помощью которого GHS усиливают потребление пищи, отчетливо отличаются от тех, с помощью которых GHS усиливают секрецию GH (4,7,33,34).Кроме того, стимуляция приема пищи грелином или GHS сохраняется у крыс с дефицитом GH (10).

В большинстве опубликованных на данный момент отчетов биоактивная молекула грелина не измерялась в плазме человека и вводились большие фармакологические, а не физиологические дозы грелина. Другие соответствующие будущие цели для лучшего понимания физиологии и патофизиологии системы грелина у людей потребуют более конкретных и частых измерений уровней грелина в плазме, а также определения того, насколько близко фармакологические и физиологические действия грелина параллельны друг другу.GHRP-2, как и грелин, является полезным инструментом для клинических исследований, помогающим понять сложность регуляции поведения человека при приеме пищи.

Выражение признательности

NIH DK 02572-01 и GCRC RR 00645 и 05096, ORC 26687. Мы благодарим MINIMED за предоставление нам инфузионного насоса и всех расходных материалов.

Информация для авторов

Бландин Лаферрер, Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Св. Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, Нью-Йорк, Нью-Йорк 10025.

Синтия Абрахам, Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Св. Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, Нью-Йорк , NY 10025.

Коллин Д. Рассел, Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Св. Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, Нью-Йорк, Нью-Йорк 10025.

Сирил Я. Бауэрс, Центр медицинских наук Тулейнского университета, Новый Орлеан, Луизиана 70112.

Ссылки

Пептид, высвобождающий гормон роста 2 (GHRP-2), как и грелин, увеличивает потребление пищи у здоровых мужчин

J Clin Endocrinol Metab.Авторская рукопись; доступно в PMC 2010 18 февраля.

Опубликован в окончательной редакции как:

PMCID: PMC2824650

NIHMSID: NIHMS176333

Бландин Лаферрер

Исследовательский центр ожирения, Амстердамский центр им. Рузвельта, Сент-Люк, 1090 , NY 10025

Cynthia Abraham

Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Св. Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, Нью-Йорк, Нью-Йорк 10025

Коллин Д. Рассел

Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Св. Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, New York, NY 10025

Cyril Y.Bowers

Центр медицинских наук Тулейнского университета, Новый Орлеан, Луизиана 70112

Бландин Лаферрер, Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Св. Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, Нью-Йорк, Нью-Йорк 10025;

Abstract

GHRP-2 — синтетический агонист грелина, недавно открытого кишечного пептида, который связывается с рецептором, стимулирующим секрецию гормона роста (GH). Было показано, что грелин обладает двумя основными эффектами: он стимулирует секрецию гормона роста и начало аппетита / приема пищи.GHRP-2 был тщательно изучен на предмет его полезности в качестве стимулятора секреции гормона роста (GHS). Исследования на животных показали его влияние на прием пищи. Однако неизвестно, может ли GHRP-2 стимулировать аппетит у людей при остром введении. Мы подкожно вводили 7 худым, здоровым мужчинам GHRP-2 (1 мкг / кг / ч) или физиологический раствор в течение 270 минут, а затем измерили их потребление в неограниченном количестве, в форме шведского стола. Подобно тому, что сообщалось при введении грелина, наши субъекты ели на 35,9 ± 10,9% больше при введении GHRP-2 по сравнению сфизиологический раствор, при этом каждый субъект увеличивал свое потребление даже в расчете на кг массы тела (136,0 ± 13,0 кДж / кг против 101,3 ± 10,5 кДж / кг, p = 0,008). Макроэлементный состав потребляемой пищи не отличался в зависимости от условий. Как и ожидалось, сывороточные уровни GH значительно выросли во время инфузии GHRP-2 (AUC 5550 ± 1090 мкг / л / 240 мин против 412 ± 161 мкг / л / 240 мин, p = 0,003). Эти данные впервые демонстрируют, что GHRP-2, как и грелин, увеличивает потребление пищи, что позволяет предположить, что GHRP-2 является ценным инструментом для исследования влияния грелина на пищевое поведение людей.

Введение

Грелин, недавно идентифицированный пептид, секретируемый эндокринными клетками желудка (1), вызвал большой интерес благодаря своим двойным эффектам. Этот эндогенный лиганд рецептора, стимулирующего секрецию гормона роста (GHS-R), который был клонирован в 1996 г. (2), регулирует высвобождение гормона роста (GH) (3). Грелин также играет роль в регулировании приема пищи и энергетического баланса. При центральном или периферическом введении грызунам грелин увеличивает потребление пищи и массу тела (4,5).Интересно, что его влияние на потребление пищи не зависит от секреции GH (4,6-8) и, по-видимому, опосредуется через нейроны NPY / Agouti, связанные с геном белка (AGRP) в дугообразном ядре гипоталамуса (9,10). Недавно было показано, что периферическое введение грелина стимулирует прием пищи у стройных, здоровых мужчин и женщин (11) и у онкологических больных (12).

Данные показывают, что циркулирующий грелин также участвует в регуляции приема пищи. Уровни грелина повышаются в ожидании еды (13) и подавляются при приеме пищи (13, 14), но основные механизмы неизвестны.Связанное с приемом пищи подавление грелина пропорционально содержанию углеводов (СНО) в пище, но, по-видимому, не связано напрямую с глюкозой или инсулином (14,15), хотя введение инсулина снижает уровень грелина (16).

Уровни грелина в сыворотке крови зависят от энергетического баланса. Уровень грелина повышается при анорексии (17) и снижается при ожирении (18). Таким образом, не исключено, что грелин может играть важную роль в поведении при приеме пищи, а также, возможно, при хроническом переедании или недоедании (19).Из-за своего двойного действия грелин может быть важным гормональным сигналом нутритивного статуса для соматотропной оси, играя роль в интеграции энергетического баланса с процессом роста (20).

Грелин недоступен для долгосрочных исследований на людях в США, однако синтетический агонист GHS-R GHRP-2 (DalaDßNalAlaTrpDPheLysNH ₂ ) доступен для клинических исследований. GHRP-2 принадлежит к семейству GHS, обнаруженных в 1980-х годах и широко изученных на предмет их влияния на высвобождение GH (21).Несмотря на очень разный химический состав природного грелина и синтетического СГС, все больше и больше доказательств подтверждают, что они обладают одинаковым биологическим действием. Как и грелин, СГС увеличивают потребление пищи и массу тела у грызунов (22). Было показано, что GHRP-2 повышает рейтинг аппетита у детей с идиопатическим GH, постоянно получающих пероральный GHRP-2 (23).

Целью этого исследования было выяснить, стимулирует ли GHRP-2 прием пищи у здоровых людей. Подобно исследованию Wren et al.(11), которые использовали грелин, мы протестировали влияние кратковременной подкожной (п / к) инфузии GHRP-2 на потребление пищи во время шведского стола.

Методы

Субъекты

Семь худых мужчин (возраст 26,0 ± 1,6 года, ИМТ 21,5 ± 1,7 кг / м) ² , масса жира 14,4 ± 1,1% по антропометрическим данным, вес стабильный, здоровый, без лекарств, без лекарств В исследовании принимали участие курящие, не соблюдающие диету, без каких-либо расстройств пищевого поведения.Обзорный совет больницы Св. Луки / Рузвельта одобрил протокол исследования, и до включения в исследование было получено информированное письменное согласие.Сеанс скрининга включал полный медицинский осмотр, стандартные лабораторные анализы, тест на вкус и пробный обед. Испытуемые должны были оценить свое пристрастие к еде на «5». или более в среднем (по шкале от 0 до 7) и должны были съесть не менее 2090 кДж во время скринингового пробного завтрака.

Дизайн исследования

Субъектов изучали после ночного голодания в течение двух дней подряд, разделенных как минимум неделей. Рандомизированным двойным слепым методом GHRP-2 (1 мкг / кг / ч) или плацебо вводили на протяжении всего эксперимента (включая время еды) через подкожный катетер, прикрепленный к помпе (Minimed 508).Кровь собирали для последующего измерения гормонов через внутривенный катетер, помещенный в предплечье, и отбирали пробы каждые 30 минут до начала приема пищи. Шведский стол включал в себя несколько блюд, которые подавались в избытке, чтобы удовлетворить любой аппетит. Во время еды в лаборатории за испытуемыми наблюдали с помощью камеры, чтобы гарантировать их безопасность и чтобы они не избавлялись от пищи никаким другим способом, кроме еды. Фиксированный стандартный тестовый завтрак давали через 120 минут после начала инфузии, а обед ad libitum предлагали через 240 минут.Завтрак состоял из 1,5 английских маффинов, 5 г сливочного масла и 125 мл яблочного сока (1254 кДж, 65% СНО, 4% белка, 31% жира). Перед обедом «шведский стол» испытуемые слушали записанную на пленку инструкцию «есть столько, сколько они хотят». Во время обеда «шведский стол» подавались макароны, булочки, горох и морковь, печенье с шоколадной крошкой, яблочный соус, куриные наггетсы и филе в панировке, а также вода. Пища взвешивалась до и после еды и подсчитывалась калорийность. После еды настой прекращали.Визуальные аналоговые шкалы (от 0 «совсем нет» до 150 мм «чрезвычайно») для оценки голода и степени насыщения применялись до начала инфузии, до и после завтрака, а также до и после завершения обеденного приема пищи. Положение меток на шкале 150 мм измерялось в миллиметрах слепым исследователем.

Анализы

Концентрации гормона роста в сыворотке измеряли в двух экземплярах с помощью радиоизотопного набора для количественного определения гормона роста от Nichols Institute Diagnostic (Сан-Хуан, Калифорния).Чувствительность анализа составляла 0,2 мкг / л, а медианные коэффициенты вариации внутри и между анализами составляли 2,9% и 7,5% соответственно. Уровни кортизола в сыворотке измеряли радиоиммуноанализом (набор от DSL, Webster, TX). Чувствительность анализа составила 0,11 нг / дл. Средняя вариация внутри и между исследованиями составила 3,8% и 5,9% соответственно. Сбор крови у одного субъекта был неполным, поэтому приводятся данные по шести субъектам.

Статистика

Сравнение GHRP-2 и плацебо проводилось с помощью парного t-критерия для всех переменных.Гормональный ответ оценивали как площадь под кривой (AUC), измеренную трапециевидным методом. Для уровня значимости использовалось значение p 0,05. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего, если не указано иное. Для статистического анализа использовалась версия SPSS 11.5.

Результаты

О побочных эффектах инфузии не сообщалось. Прием пищи во время «шведского стола» увеличился на 35,9 ± 10,9% (от 12 до 95%) с GHRP-2 по сравнению с плацебо. Каждый субъект ответил на инфузию GHRP-2 увеличением потребления пищи, независимо от количества еды, съеденной во время контрольного эксперимента с физиологическим раствором ().Общее количество съеденных калорий было больше с GHRP-2, чем с плацебо (9409 ± 1229 кДж против 7118 ± 1078 кДж, p = 0,004), как и количество съеденных кДж на кг массы тела (136 ± 13 кДж / кг против 101 ± 10 кДж / кг, p = 0,008). Испытуемые ели больше CHO (58 ± 14 г, p = 0,006), белка (17 ± 4 г, p = 0,005) и жира (38 ± 10 г, p = 0,008) с GHRP-2, чем плацебо, и полученная пропорция калорий от каждого питательного вещества не отличался в двух условиях (результаты не показаны). Продолжительность приема пищи ad libitum была такой же, как с GHRP-2, так и без него (30 ± 8 мин vs.32 ± 6 мин, p = 0,667). Таким образом, потребление пищи за интервал (количество калорий, потребляемых во время еды, деленное на продолжительность приема пищи) было больше, но не значительно, с GHRP-2, чем с плацебо (322 ± 33 кДж / мин против 276 ± 38 кДж / мин, р = 0,179). Основываясь на ВАШ, исходные оценки голода и сытости не различались в зависимости от состояния. Однако во время инфузии GHRP-2 субъекты чувствовали себя более голодными (112,6 ± 7,5 мм против 89,7 ± 12,2, p = 0,013) перед обедом и демонстрировали тенденцию к увеличению сытости после обеда (134,1 ± 6,0 мм против 118.6 ± 10,3 мм, p = 0,054).

Индивидуальные изменения в потреблении энергии от шведского стола, график на вставке показывает среднее ± средн.

Уровни hGH значительно увеличились во время инфузии GHRP-2, достигнув плато 36,4 ± 7,0 мкг / л через 60 минут после начала инфузии. Уровни GH были значительно выше во время инфузии GHRP-2 (AUC 5550 ± 1090 мкг / л / 240 мин по сравнению с 412 ± 161 мкг / л / 240 мин, p = 0,003) (). Уровни кортизола в сыворотке крови временно повышались при приеме GHRP-2 по сравнению с плацебо (результаты не показаны).

Инфузия GHRP-2 (1 мкг / кг / ч) и физиологического раствора начиналась в 0 мин, а завтрак подавался через 120 мин.

Обсуждение

Это первые данные, демонстрирующие, что периферическое введение GHRP-2 увеличивает потребление пищи людьми. Эффект GHRP-2 устойчив и вызывал увеличение потребления пищи у всех испытуемых. Субъекты сообщили, что испытывали чувство голода при приеме GHRP-2. Величина влияния GHRP-2 на потребление пищи (+ 35%) сравнима с эффектом грелина, который, как было ранее показано, увеличивает потребление пищи на 28% у здоровых субъектов (11) и на 31% у больных раком (12).Эффект 1 мкг / кг / ч GHRP-2 сравним с эффектом грелина (5 пмоль / кг / мин) не только на прием пищи, но и на высвобождение GH. В исследовании Wren (5) (также у здоровых поджарых субъектов) грелин поднял GH до аналогичных уровней (около 35 мкг / л). Следовательно, грелин или его миметик GHRP-2 при периферическом введении способен вызывать значительные острые изменения аналогичной степени как в уровне GH, так и в поведении при приеме пищи.

Гормональное регулирование приема пищи можно разделить на долгосрочные сигналы накопления жира (лептин и инсулин) и краткосрочные сигналы начала приема пищи и насыщения (грелин, CCK и PYY).Грелин, хотя в основном секретируется в желудке, считается, что он действует центрально на нейроны NPY-AGRP дугообразного ядра (9,10). Механизм и количество циркулирующего периферического грелина, достигающего этих нейронов гипоталамуса, неясны. У грызунов как центральное, так и периферическое введение грелина (4) или GHS (s) (21,22) стимулируют прием пищи. Имеющиеся данные свидетельствуют о том, что спонтанное изменение концентрации эндогенного сывороточного грелина может играть роль в продолжительности перерыва между приемами пищи, повторении голода и последующем размере еды (24).Постпрандиальное подавление грелина пропорционально размеру еды, но не предсказывает промежуток между приемами пищи (25). Исследования, основанные на утренних уровнях грелина в сыворотке крови натощак, не обнаружили положительной (25) или отрицательной (26) зависимости между уровнями грелина в плазме натощак и потреблением пищи ad libitum. Неясно, являются ли уровни общего грелина натощак (н-октаноил плюс дезоктаноил) лучшим маркером для последующего приема пищи. Кроме того, интегрированное 24-часовое высвобождение грелина может быть лучшим предиктором краткосрочного энергетического баланса / приема пищи (27), так же как интегрированные 24-часовые уровни лептина являются лучшим показателем дневного потребления пищи и секреции инсулина (28), чем утреннее голодание. уровни лептина.Как наши данные с GHRP-2, так и другие с грелином (11,12) показывают, что периферическое вливание этих орексигенных пептидов может вызвать сильное резкое изменение в поведении людей при приеме пищи. Это предполагает, хотя и не доказывает, возможную роль периферического циркулирующего грелина в регуляции приема пищи (13, 25). Однако маловероятно, что простые изменения сывороточного уровня одного грелина определяют величину или тип последующих эффектов через активацию центральных и периферических рецепторов (29).

Как сообщалось ранее (30), подкожная инфузия GHRP-2 в течение 270 минут является безопасной. Соответственно, не сообщалось о побочных эффектах во время 30-дневной подкожной непрерывной инфузии GHRP-2 (30) или 12-месячного перорального введения препарата детям (23).

Два исследования показали, что хроническое введение GHRP-2 маленьким детям с различной степенью дефицита GH вызывает стойкое повышение скорости линейного роста (23,31). Это предполагает возможность того, что острый эффект GHRP-2 на потребление пищи, наблюдаемый в нашем исследовании, мог бы привести к состоянию положительного энергетического баланса, если бы GHRP-2 вводился хронически.Тщательно разработанные и оптимизированные хронические исследования, включая подробный мониторинг состава тела и приема пищи, помогут продемонстрировать долгосрочное влияние СГС на потребление пищи и массу тела. Хотя GHRP-2 значительно увеличивал GH, маловероятно, судя по результатам одного rhGH, что это увеличение уровней GH является ответственным за резкие изменения в потреблении пищи в этом исследовании. Кроме того, гипоталамический путь и механизм, с помощью которого GHS усиливают потребление пищи, отчетливо отличаются от тех, с помощью которых GHS усиливают секрецию GH (4,7,33,34).Кроме того, стимуляция приема пищи грелином или GHS сохраняется у крыс с дефицитом GH (10).

В большинстве опубликованных на данный момент отчетов биоактивная молекула грелина не измерялась в плазме человека и вводились большие фармакологические, а не физиологические дозы грелина. Другие соответствующие будущие цели для лучшего понимания физиологии и патофизиологии системы грелина у людей потребуют более конкретных и частых измерений уровней грелина в плазме, а также определения того, насколько близко фармакологические и физиологические действия грелина параллельны друг другу.GHRP-2, как и грелин, является полезным инструментом для клинических исследований, помогающим понять сложность регуляции поведения человека при приеме пищи.

Выражение признательности

NIH DK 02572-01 и GCRC RR 00645 и 05096, ORC 26687. Мы благодарим MINIMED за предоставление нам инфузионного насоса и всех расходных материалов.

Информация для авторов

Бландин Лаферрер, Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Св. Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, Нью-Йорк, Нью-Йорк 10025.

Синтия Абрахам, Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Св. Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, Нью-Йорк , NY 10025.

Коллин Д. Рассел, Исследовательский центр ожирения, Больничный центр Св. Луки Рузвельта, 1090 Амстердам-авеню, Нью-Йорк, Нью-Йорк 10025.

Сирил Я. Бауэрс, Центр медицинских наук Тулейнского университета, Новый Орлеан, Луизиана 70112.

Ссылки

Центр эстетической медицины, антивозрастного и оздоровительного лечения

Преимущества пептидов, высвобождающих гормон роста (GHRP)

(GHRP) стимулирует высвобождение гормона роста из передней доли гипофиза.Это железа размером с горошину, находящаяся в основании мозга, которая отвечает за регулирование эндокринной функции организма.

К различным функциям гипофиза относятся:

Регулирование роста тела

Регуляция функции щитовидной железы

Обезболивающее

Регулировка температуры

GHRP не влияет на выработку гормона роста, они фактически работают вместе с гормоном роста для улучшения функций организма

Как работает GHRP?

Когда они вводятся, в мозг посылается избирательный импульс, который стимулирует гипоталамус и переднюю долю гипофиза для выработки гормонов роста.Как только этот импульс отправляется, клетки направляются непосредственно к мышце, чтобы поддержать развитие, избегая при этом любого возможного роста костей или хрящей. Когда вводятся пептиды, они увеличивают синтез клеток, повышают уровень секреции инсулина тканями поджелудочной железы и повышают уровень грелина в желудке, что помогает высвобождать гормон роста и контролировать чувство голода. Все эти функции способствуют сжиганию жира, перемещению питательных веществ и наращиванию чистой мышечной массы.

Один из наиболее популярных GHRP — Ипаморелин

Преимущества Ипаморелина

Ипаморелин завоевывает популярность среди культуристов как наиболее эффективный пептид, высвобождающий гормон роста.Хотя все еще необходимы дополнительные клинические исследования, некоторые из преимуществ Ипаморелина включают:

Уменьшение жировых отложений

Повышение мышечной силы и массы

Кости укрепленные

Восстановленные суставы и связки

Качество кожи улучшено

Повышение энергии и жизнеспособности

Следует подчеркнуть, что ипаморелин не только самый эффективный, но и самый безопасный и селективный стимулятор гормона роста.