Содержание белка в протеине: Выбираем протеин. Состав, содержание белка, уловки продавцов

Качество пшеницы. Как повысить протеин?

Введение. 1/8

• Белок является одним из наиболее важных аспектов качества пшеницы. Это обусловлено главным образом выбранным сортом и доступным запасом азота.

• Погода и почвенные условия также влияют на содержание белка.

• В целом, мука высокого качества требует уровня белка не менее 11,5%.

• Индивидуальное внесение удобрения — самый мощный рычаг для доведения содержания белка до желаемого уровня.

Перераспределение азота. 2/8

• Для производства белков растению необходим азот. Белок накапливается в конце вегетационного цикла.

• Примерно 80% азота в зернах поглощается до цветения, и только около 20% поглощается после цветения.

• Таким образом, наличие азота во время созревания колосков влияет на конечное содержание белка.

Максимальный дефицит азота. 3/8

• Урожай увеличивается с подачей азота, пока агрономический оптимум не будет достигнут. Содержание белка увеличивается даже за пределами агрономического оптимума. Однако избыток азота накапливается в почве, и его следует избегать.

• Высокая эффективность поглощения азота улучшает доступность азота для растения и, следовательно, снижает необходимость дополнительного применения. Дробное применение и использование аммиачной селитры — первый выбор, чтобы максимизировать эффективность поглощения.

Перевод на графике.

• Yield (q/ha) – Урожайность (ц/га)
• Residual N in the soil (kg/ha) – Остаточный азот в почве (кг/га)
• Agronomic optimum – Агрономический оптимум
• Protein content (% DM) – Содержание белка (%)
• N application (kg/ha) – Применение азота (кг/га)

Позднее внесение. 4/8

• Позднее применение облегчает перенос азота в колоски и, таким образом, увеличивает содержание белка. Схема показывает, как время последнего применения 60 кг азота влияет на выход и белок. Раннее применение на этапе 39 сравнивается с поздним применением на этапе 51.

• Выбрав дату и показатель последнего применения, можно достичь целевого баланса урожайности / белка.

Перевод на графике.

• Yield (dt/ha) – Урожайность (ц/га)
• Protein content (% DM) – Содержание белка (%)

Адекватная форма азота. 5/8

• Аммиачная селитра дает меньшие потери, чем карбамидно-аммиачная смесь (КАС) или мочевина, и обеспечивает лучшую эффективность поглощения азота. Поэтому это адекватный выбор для достижения высокого содержания белка.

• Это особенно актуально для критически позднего применения. При общей подаче азота 210 кг на гектар в трех применениях существенно зависит, предоставляется ли последнее внесение 85 кг / га в виде мочевинного удобрения или в виде аммиачной селитры.

Перевод на графике.

• Yield (t/ha) – Урожайность (т/га)
• Protein – Белок
• Ureic N – Карбамид
• AN – Аммиачная селитра
• 1 мешок: 85 kg N/ha Ureic N – 85 кг N/га карбамида
• 2 мешок: 85 kg N/ha AN – 85 кг N/га аммиачной селитры
• +250 kg/ha — +250 кг/га

Мониторинг азотного статуса. 6/8

• Дозировка и сроки последнего применения азота облегчаются с помощью инструментов точного земледелия, таких как азотный тестер.

• Устройство в реальном времени измеряет фактическое содержание азота в растении и, таким образом, позволяет настроить последнее применение для достижения оптимальной эффективности при минимальных затратах.

• Использование азотного тестера в более чем 240 полевых испытаниях увеличило содержание белка на 0,3 балла и урожайность на 120 кг/га в среднем.

Перевод на анимации.

• Protein – Белок
• Yield – Урожайность
• +120 kg/ha — +120 кг/га

Внесение серы. 7/8

Позднее внесение серы сужает пропорции азота и серы и увеличивает содержание белка. Это улучшает прочность клейковины и, следовательно, качество выпечки пшеничной муки.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Для оптимального качества пшеницы и содержания белка необходимо:

• Выбрать подходящий сорт пшеницы.
• Обеспечить высокую эффективность азота (используйте аммиачную селитру вместо карбамидно-аммиачной смеси или мочевины).
• Планировать позднее внесение.
• Контролировать фактическое состояние азота в культуре.
• Совместить применение серы и азота.

Краснодарский край

Опубликовано: 09 августа, 2021 в 19:00

Тэги: пшеницаазотные удобрениякачество зернаурожайностьбелокагрономия

коктейлей для наращивания мышц не всегда содержат столько белка, сколько утверждают в

Протеиновые добавки стали широко популярным способом для заядлых посетителей тренажерного зала накачать дополнительный белок в свое тело и увеличить мышцы.

Белок необходим для общего здоровья организма, построения и восстановления его тканей, а также для поддержания баланса уровней энергии, гормонов и многих других химических веществ. Он также играет центральную роль в наращивании мускулов — часто его привлекают продукты для бодибилдинга и фитнеса.

В идеале мужчины должны получать около 56 г белка в день для продолжения нормальных процессов в организме. Женщинам рекомендуется употреблять около 46 г белка.

Яйцо содержит около 6 г белка, в то время как порция соевых бобов (полстакана) может содержать 15 г белка, а одна отбивная из нежирной корейки ягненка может содержать 14 г белка.

Было много споров вокруг людей, накачивающих свой организм протеиновыми добавками. Некоторые исследования показывают, что людям, которые проходят тренировки по наращиванию мышечной массы, необходимо большее количество белка для поддержки максимального роста мышц.Но нет никакого научного согласия в том, что этим людям действительно нужно потреблять больше белка, чем рекомендованная диета.

Тем не менее, силовые тренажеры и спортсмены часто дополняют свой рацион протеиновыми коктейлями или батончиками. Это может быть связано с их удобством — они стоят дешевле, чем мясные продукты с таким же содержанием белка, и позволяют оптимальное потребление белка без чрезмерного потребления углеводов или жиров.

Но наше исследование показало, что когда дело доходит до протеиновых коктейлей, то, что находится в ванне, не всегда бывает на первый взгляд.Около 10% протеиновых коктейлей, оцененных на рынке, составляли менее 60% от количества протеина, за которое платили потребители.

Приготовление протеиновой добавки

Протеиновые добавки выпускаются в виде коктейлей, батончиков и других продуктов для замены еды. Наиболее популярны протеиновые порошки. Эти порошки обычно смешиваются с водой или молоком для образования коктейля, который следует употреблять непосредственно до или после тренировки или вместо обычного приема пищи.

Белковые компоненты в этих порошках часто получают из молочных продуктов (сыворотка или казеин) или сои.Порошки часто содержат другие ингредиенты, такие как ароматизаторы и непитательные подсластители для улучшения вкуса.

В нашем исследовании изучалось соответствие маркировки протеиновых добавок в Южной Африке. Мы проанализировали 70 товаров, приобретенных в популярных розничных и интернет-магазинах Южной Африки.

Мы отобрали по два образца из разных партий каждого продукта и отправили их на анализ питания. Это позволит определить фактические питательные вещества, присутствующие в продукте, с помощью аккредитованных методов.Затем эти значения питательных веществ сравнивались со значениями, указанными на этикетках продуктов.

Правила, касающиеся маркировки и рекламы пищевых продуктов, допускают разницу в 25% между фактическим содержанием продукта и тем, что указано на этикетке.

В нашем исследовании мы обнаружили разницу до 80% в содержании меченого белка и величине, определенной во время анализа. Из 70 продуктов, включенных в исследование, 65 продуктов, или 93%, подпадали под действие правил.

В 21 продукте фактическое содержание белка в продукте было более чем на 10% меньше, чем указано на этикетке, но в пяти продуктах указанное содержание белка превышало допустимый предел в 25%.

Эти пять продуктов содержали в баке на 42–80% меньше белка, чем указано на этикетках.

Смена плана

Наше исследование проводится на фоне обсуждения вопроса о включении спортивных добавок в действующее законодательство Южной Африки.Управление по контролю за продуктами питания и Совет по контролю за лекарствами ведут переговоры о внесении поправок в свои правила Национального департамента здравоохранения Южной Африки.

По общему мнению, продукты, такие как протеиновые коктейли, которые представляют собой пилюли, желе и таблетки, в будущем будут маркироваться как пищевые продукты и подпадать под юрисдикцию правил, касающихся пищевых продуктов.

Но пищевые продукты, которые заявляют о себе как о лекарствах, подпадают под действие Закона о лекарственных средствах как дополнительное лекарство.

Если протеиновые коктейли подпадают под действие Закона о лекарственных средствах, свобода действий производителей в отношении разницы между протеином, указанным на этикетке, и протеином, содержащимся в продукте, будет уменьшена с 25% до 10%.

В США обогащенные или обработанные пищевые продукты с добавлением питательных веществ считаются неправильно маркированными в соответствии с разделами Федерального закона о пищевых продуктах, лекарствах и косметических средствах, если содержание белка в продукте не меньше или не превышает значения, заявленное на этикетка продукта. Эти нарушения подлежат гражданской ответственности.

В Южной Африке виновный может быть оштрафован на сумму до 20 000 рандов за первое нарушение.

Следующие шаги

После установления различий в общем содержании белка, указанного на этикетках продуктов, и измеренных значений, исследователи теперь изучают целостность белка.

Многие протеиновые коктейли заявляют о наличии на этикетках определенных незаменимых белковых фрагментов, таких как аминокислоты с разветвленной цепью или отдельные аминокислоты. Аминокислоты — это строительные блоки белка.Некоторые аминокислоты, которые считаются более низкими по сравнению с цельными белками, использовались некоторыми производителями для искусственного завышения и фальсификации более высоких значений общего белка в своих продуктах, что обычно называется пиковым содержанием белка. На этикетках многих протеиновых добавок прямо указано, что они не содержат пиков.

Следующий шаг — определить аминокислотный профиль этих протеиновых коктейлей и сравнить его с данными, указанными на этикетках продуктов.

Обзор методов анализа белков | Thermo Fisher Scientific

Количественное определение концентрации белка является неотъемлемой частью любого лабораторного рабочего процесса, включающего экстракцию, очистку, маркировку или анализ белка.Тесты Pierce Protein Assays предоставляют широкий спектр возможностей для точного определения концентрации белка на основе времени анализа, чувствительности, совместимости, линейности стандартной кривой и вариации от белка к белку. Хотя в этой статье в качестве примеров используются продукты Pierce Protein Assay, обсуждаемые принципы и химический состав в целом применимы к большинству доступных колориметрических или флуориметрических методов анализа белка.

Вступление

Количественное определение белка часто необходимо перед обработкой образцов белка для выделения, разделения и анализа с помощью хроматографических, электрофоретических и иммунохимических методов.В зависимости от требуемой точности, количества и чистоты доступного белка для определения концентрации белка подходят разные методы.

Самый простой и прямой метод определения концентрации белка в растворе — это измерение оптической плотности при 280 нм (УФ-диапазон). Аминокислоты, содержащие ароматические боковые цепи (т. Е. Тирозин, триптофан и фенилаланин), обладают сильным поглощением УФ-света. Белки и пептиды поглощают УФ-свет пропорционально содержанию в них ароматических аминокислот и общей концентрации.Другой метод, традиционно используемый в аминокислотном анализе с помощью ВЭЖХ, заключается в маркировке всех первичных аминов (то есть N-конца и боковой цепи остатков лизина) цветным или флуоресцентным красителем, таким как нингидрин или о-фталевый альдегид (OPA). Подходы с прямым поглощением УФ-света и реагентами ВЭЖХ имеют особые недостатки, которые делают эти методы непрактичными для использования с типичными образцами белков в рабочих процессах протеомики. Метод УФ-поглощения не идеален для белковых смесей, поскольку разные белки имеют разное содержание ароматических аминокислот, что приводит к разным характеристикам поглощения.Кроме того, любое небелковое вещество, поглощающее УФ-свет, будет мешать измерениям.

Для преодоления этих недостатков было разработано несколько колориметрических и флуоресцентных методик анализа белков на основе реагентов, которые используются почти в каждой лаборатории, занимающейся исследованиями белков. К реагенту добавляют образцы белка, вызывая изменение цвета или усиление флуоресценции пропорционально добавленному количеству. Концентрацию белка определяют по стандартной кривой, состоящей из известных концентраций очищенного эталонного белка.Эти методы анализа белка можно разделить на две группы в зависимости от типа химии.

Таблица 1. Типы, преимущества, недостатки и примеры методов определения белка.

Выбор анализа белка

Ни один реагент не может считаться идеальным или лучшим методом анализа белка.У каждого метода есть свои преимущества и недостатки. Выбор среди доступных анализов белка обычно основан на совместимости метода анализа белка с образцами. Кроме того, необходимо учитывать потенциальные мешающие вещества, включенные в образцы, которые могут повлиять на определенные методы анализа, а также на точность, воспроизводимость и желаемое время инкубации. Следовательно, успешное использование анализов белка включает выбор метода, который наиболее совместим с анализируемыми образцами, выбор подходящего стандарта анализа, а также понимание и контроль конкретных допущений и ограничений, которые остаются.

Цель состоит в том, чтобы выбрать метод, который требует минимальных манипуляций или предварительной обработки образцов для размещения веществ, которые мешают анализу. У каждого метода есть свои преимущества и недостатки. Поскольку ни один реагент не может считаться идеальным или лучшим методом анализа белка при любых обстоятельствах, большинство исследователей имеют в своих лабораториях более одного типа анализа белка.

Важными критериями для выбора анализа являются:

• Совместимость с типом образца и компонентами
• Диапазон анализа и требуемый объем образца
• Однородность белка к белку (см. Ниже)
• Скорость и удобство для количества образцов подлежит тестированию
• Наличие спектрофотометра или планшет-ридера, необходимого для измерения цвета (поглощения) при анализе

Некоторые распространенные вещества, которые потенциально мешают методам анализа белка, являются восстанавливающими агентами (например.я. DTT) и моющие средства (например, Triton X-100). Как правило, образцы, содержащие восстанавливающие агенты или хелатирующие медь агенты, предпочтительно анализируются с помощью тестов на основе красителя Кумасси (метод Брэдфорда). Это связано с тем, что анализы на основе красителя Кумасси, такие как анализы Пирса Кумасси (Брэдфорд) и Пирса Кумасси Плюс (Брэдфорд), совместимы с восстанавливающими агентами и не требуют реакций связывания медь-белок. Для тех образцов, которые содержат детергенты, лучше всего подходят анализы на основе белка на основе меди, такие как анализ BCA Pierce Rapid Gold, поскольку они не ингибируются низкими или умеренными количествами детергента.

Помимо совместимости образцов, анализы белков также обычно группируются по диапазону концентраций белка, которые они могут обнаружить. Для образцов, в которых ожидается низкая концентрация белка (<20 мкг / мл), может потребоваться использование альтернативного протокола анализа на микропланшете или специализированного анализа, такого как анализ белка Pierce Micro BCA, который специально разработан для разбавленные образцы. Если общая концентрация белка в образцах высока (> 2000 мкг / мл), часто можно использовать разбавление образца для преодоления любых проблем с известными мешающими веществами.Иногда образец содержит вещества, которые делают его несовместимым с любым из методов анализа белка. Предпочтительный метод борьбы с этими типами мешающих веществ — просто удалить их.

Анализ белков BCA Pierce Rapid Gold и анализ белка Кумасси (Брэдфорд) дополняют друг друга и обеспечивают два основных метода анализа большинства образцов. Различные дополнительные реагенты и альтернативные версии этих двух анализов позволяют удовлетворить многие другие потребности в образцах.

Выбор стандарта белка

Поскольку белки различаются по аминокислотному составу, каждый из них по-разному реагирует на каждый тип анализа белка. Таким образом, лучший выбор для эталонного стандарта — это очищенная, известная концентрация белка, наиболее распространенного в образцах. Обычно этого невозможно достичь, и это редко бывает удобно или необходимо. Во многих случаях цель состоит в том, чтобы просто оценить общую концентрацию белка, и небольшая вариабельность между белками является допустимой.

Если высокоочищенная версия интересующего белка недоступна или слишком дорога для использования в качестве стандарта, альтернативой является выбор белка, который будет давать очень похожую кривую цветового отклика в выбранном методе анализа белка и легко доступны для любой лаборатории в любое время. Как правило, бычий сывороточный альбумин (БСА) хорошо подходит для стандарта белка, поскольку он широко доступен в высокой чистоте и относительно недорого. В качестве альтернативы, бычий гамма-глобулин (BGG) является хорошим стандартом при определении концентрации антител, поскольку BGG дает кривую цветового ответа, которая очень похожа на кривую иммуноглобулина G (IgG).

Для максимальной точности оценки общей концентрации белка в неизвестных образцах важно включать стандартную кривую каждый раз, когда проводится анализ. Это особенно верно для методов анализа белка, которые дают нелинейные стандартные кривые. Выбор количества стандартов и повторов, используемых для определения стандартной кривой, зависит от степени нелинейности стандартной кривой и требуемой степени точности. Как правило, для построения стандартной кривой требуется меньше точек, если цветовая характеристика линейна.Обычно стандартные кривые строятся с использованием как минимум двух повторов для каждой точки кривой.

Подготовка проб для анализа белка

Перед анализом образца на общее содержание белка его необходимо растворить, обычно в забуференном водном растворе. Часто принимаются дополнительные меры предосторожности, чтобы подавить рост микробов или избежать случайного загрязнения образца посторонними предметами, такими как пыль, волосы, кожные или телесные масла.

В зависимости от исходного материала, который используется в процедурах перед проведением анализа белка, образец будет содержать множество небелковых компонентов.Знание этих компонентов имеет решающее значение для выбора подходящего метода анализа и оценки причины аномальных результатов. Например, ткани и клетки обычно лизируются буферами, содержащими поверхностно-активные вещества (детергенты), биоциды (антимикробные агенты) и ингибиторы протеаз. Также могут быть включены различные соли, денатурирующие агенты, восстанавливающие агенты и хаотропы. После фильтрации или центрифугирования для удаления клеточного мусора типичные образцы по-прежнему будут включать нуклеиновые кислоты, липиды и другие небелковые соединения.

На каждый тип анализа белка отрицательно влияют вещества того или иного вида. Компоненты белкового раствора считаются мешающими веществами в анализе белка, если они искусственно подавляют ответ, усиливают ответ или вызывают повышенный фон на произвольно выбранную степень (например, на 10% по сравнению с контролем).

Неточность из-за небольшого количества мешающего вещества может быть устранена путем приготовления стандарта белка в том же буфере, что и анализируемый белок.Для более высоких, несовместимых уровней мешающих веществ необходимы другие стратегии:

• Выберите другой метод анализа белка или версию того же метода анализа, которая включает компоненты для преодоления помех.
• Диализ или обессоливание пробы для удаления мелких мешающих веществ (т.е. менее 1000 дальтон), таких как восстановители.
• Осаждайте белок в TCA или другом подходящем реагенте, удалите раствор, содержащий мешающий компонент, и затем повторно растворите белок для анализа.На этой иллюстрации представлен обзор того, как методы диализа белка используются для удаления веществ, которые могут загрязнять образцы белка и мешать последующим применениям.

Рис. 1. На схеме показано, как диализную кассету можно использовать для очистки от белка. 3 мл 1 мг / мл IgG в 0,1 М трис-буфере, pH 7, внутри диализной кассеты помещают в 1000 мл 100 мМ PBS, с pH 7,6. Старый диализат удаляют и заменяют 1000 мл 100 мМ PBS с pH 7.6. IgG слишком велик для проникновения в поры мембраны; следовательно, количество IgG внутри кассеты остается постоянным. Концентрация Трис-буфера внутри кассеты падает ниже 0,01 М по мере диффузии Трис-буфера и диффузии буфера PBS. Опять же, старый диализат отбрасывается и заменяется 1000 мл 100 мМ PBS с pH 7,6. IgG внутри кассеты остается постоянным. Уровень трис-буфера внутри кассеты падает почти до неопределяемого уровня. Буфер внутри кассеты представляет собой 100 мМ PBS с pH 7.6.

Различия между белками

Каждый белок в образце отвечает уникальным образом в данном анализе белка. Такое изменение от белка к белку относится к различиям в степени окраски (оптической плотности), получаемой при одновременном анализе одной и той же массы различных белков одним и тем же методом. Эти различия в цветовой реакции связаны с различиями в аминокислотной последовательности, изоэлектрической точке (pI), вторичной структуре и присутствием определенных боковых цепей или простетических групп.

В зависимости от типа образца и цели проведения анализа, вариация от белка к белку является важным фактором при выборе метода анализа белка и при выборе подходящего стандарта анализа (например, BSA по сравнению с BGG). Методы анализа белков, основанные на аналогичном химическом составе, имеют сходные различия между белками.

Рисунок 2. Стандартные кривые. Примеры стандартных кривых с использованием очищенного BSA и BGG с набором для анализа белков Pierce BCA Protein Assay Kit, иллюстрирующие различия в интенсивности окраски двух разных белков.

Вариация белково-белковых анализов на белок

Протеиновые анализы различаются по своей химической основе для обнаружения специфичных для белков функциональных групп. Некоторые методы анализа обнаруживают пептидные связи, но ни один анализ не делает этого исключительно. Вместо этого каждый анализ белка обнаруживает одну или несколько различных конкретных аминокислот с большей чувствительностью, чем другие. Следовательно, белки с различным аминокислотным составом дают окраску с разной скоростью или интенсивностью в любом данном анализе белка.

В следующей таблице сравнивается вариабельность цветового ответа от белка к белку в нескольких анализах Thermo Scientific Pierce Protein Assays. Эти данные служат в качестве общего руководства для оценки различий в ответах между образцами белка. Однако, поскольку сравнения проводились с использованием одной концентрации белка и буфера, их не следует использовать в качестве точных калибровочных коэффициентов.

Эта информация о вариабельности полезна при выборе стандарта белка. Например, если анализируемый образец представляет собой очищенное антитело, бычий гамма-глобулин (BGG, белок № 5) будет более точным стандартом, чем бычий сывороточный альбумин (BSA, белок № 1).Эти данные также указывают на важность определения того, какой стандарт анализа использовался при сообщении результатов анализа белка.

Для каждого из представленных здесь анализов белков было проанализировано 14 белков с использованием стандартного протокола пробирки. Было рассчитано чистое (скорректированное на холостое значение) среднее поглощение для каждого белка. Чистое поглощение для каждого белка выражается как отношение к чистому поглощению для BSA (например, отношение 0,80 означает, что белок дает 80% цвета, полученного для эквивалентной массы BSA).Все концентрации белка составляли 1000 мкг / мл, за исключением анализа Micro BCA, концентрация которого составляла 10 мкг / молоко.

Таблица 2. Обзор протеиновых анализов.

Расчеты и анализ данных

В большинстве анализов белка концентрации белка в образце определяются путем сравнения их результатов анализа с ответами на серию разведений стандартов, концентрации которых известны.Образцы белка и стандарты обрабатываются таким же образом, смешивая их с реагентом для анализа и используя спектрофотометр для измерения оптической плотности. Отклики стандартов используются для построения или расчета стандартной кривой. Затем значения абсорбции неизвестных образцов интерполируются на график или формулу для стандартной кривой для определения их концентраций.

Очевидно, что наиболее точные результаты возможны только тогда, когда неизвестные и стандартные образцы обрабатываются одинаково.Это включает их анализ в одно и то же время и в одних и тех же буферных условиях, если это возможно. Поскольку задействованы различные этапы дозирования, повторения необходимы, если кто-то хочет рассчитать статистику (например, стандартное отклонение, коэффициент вариации) для учета случайной ошибки.

Рис. 3. Сравнение стандартных кривых для двухточечной и линейной аппроксимации. Интерполяция и расчет для исследуемого образца, имеющего оптическую плотность 0,6, приводят к значительно разным значениям концентрации белка.В этом случае метод «точка-точка» явно обеспечивает более точную контрольную линию для расчета тестового образца.

Хотя большинство современных спектрофотометров и планшет-ридеров имеют встроенные программы для анализа данных анализа белков, некоторые факторы часто неправильно понимаются техническими специалистами. Потратив несколько минут на изучение и правильное применение принципов, задействованных в этих расчетах, можно значительно расширить возможности разработки анализов, дающих наиболее точные результаты (см. Соответствующие технические советы и ссылки).

Количественный анализ пептидов

Для рабочих процессов, использующих протеомику с использованием масс-спектрометрии, важно измерять концентрацию пептидов после этапов переваривания, обогащения и / или очистки C18, чтобы нормализовать вариации от образца к образцу. В частности, для экспериментов с использованием изобарической маркировки критически важно обеспечить маркировку равных количеств образца перед смешиванием, чтобы получить точные результаты.

Подобно методам анализа белков, доступны различные варианты определения концентрации пептидов.Исторически для измерения концентраций пептидов применялись методы анализа белков в УФ-видимой области (A280) или колориметрические реагенты. Часто используются анализы BCA и микро-BCA. Хотя эти стратегии хорошо работают с образцами белков, эти реагенты не предназначены для точного определения пептидов. Альтернативно, количественные анализы пептидов — в колориметрическом или флуорометрическом формате — доступны для специфического количественного определения смесей пептидов. При выборе формата колориметрического или флуорометрического анализа микропланшетов для количественного анализа пептидов необходимо учитывать следующие важные критерии:

• Совместимость с типом образца, компонентами и рабочими процессами
• Диапазон анализа и требуемый объем образца
• Скорость и удобство для количество образцов для тестирования
• Наличие спектрофотометра или флуорометра, необходимого для измерения результатов анализа

Эти репрезентативные данные сравнивают результаты, полученные с помощью колориметрических и флуориметрических анализов.

Рис. 4. Количественное сравнение колориметрического и флуориметрического анализа пептидов. Триптические пептидные гидролизаты получали из двенадцати клеточных линий. Концентрации перевариваемых пептидов определяли с использованием количественного колориметрического анализа пептидов Thermo Scientific Pierce и наборов для количественного флуорометрического анализа пептидов Pierce в соответствии с инструкциями. Каждый образец анализировали в трех экземплярах, и концентрацию каждого гидролизата рассчитывали по стандартной кривой, построенной с использованием стандарта анализа протеинового переваривания.

Рекомендуемая литература

1. Брэдфорд, ММ. (1976) Быстрый и чувствительный метод количественного определения количества белка в микрограммах, использующий принцип связывания белок-краситель. Аналитическая биохимия. 72, 248-254.
2. Смит П.К., Крон Р.И., Хермансон Г.Т. и др. (1987) Измерение белка с использованием бицинхониновой кислоты. Аналитическая биохимия. 150, 76-85.
3. Крон, Р.И. (2002). Колориметрическое определение и количественное определение общего белка, Current Protocols in Cell Biology, A.3H.1-A.3H.28, John Wiley & Sons, Inc.
4. Krohn, R.I. (2001). Колориметрическое определение общего белка, Текущие протоколы аналитической химии пищевых продуктов, B1.1.1-B1.1.27, John Wiley & Sons, Inc.
5. Lowry, O.H., Rosebrough, N.J., Farr, A.L., et al. (1951) Измерение белка с помощью реагента фолин-фенол. Журнал биологической химии. 193, 265-75.
6. Legler G, Müller-Platz CM, Mentges-Hettkamp M и др. (1985) На химической основе определения белка Лоури.Аналитическая биохимия. 150, 278-87.

Статьи по Теме

Содержание белка и аминокислотный состав коммерчески доступных изолятов растительного белка

Животный белок по сравнению с растительным белком | Содержание белка в растительной пище

Если вы новичок или заинтересованы в питании на растительной основе, вы можете беспокоиться о том, что не получаете достаточно белка для активного образа жизни.В конце концов, в растениях обычно меньше белка на грамм, чем в продуктах животного происхождения, и они также не усваиваются. Тем не менее, многие спортсмены, употребляющие растения, преуспевают после отказа от животной пищи.

Чтобы получить некоторое представление о различиях между животным белком и растительным белком, мы побеседовали с двумя зарегистрированными диетологами: Мари Спано, врачом-диетологом, врачом-диетологом, спортивным диетологом из Atlanta Braves, и Самантой Кассетти, MS, RD, диетологом и диетологом. эксперт по здоровью и соавтор Sugar Shock .

→ Присоединяйтесь к Runner’s World + сегодня, чтобы получить эксклюзивный доступ к советам экспертов по питанию, тренировкам, обзорам снаряжения и многому другому!

Чем отличаются белки животного и растительного происхождения?

Белок является строительным материалом для кожи, волос, зубов, ногтей и основных органов, а также служит антителом, мессенджером, ферментом, переносчиком и хранилищем. Белок наиболее известен своей способностью стимулировать синтез мышечного протеина (MPS) в течение как минимум 24 часов в ответ на один сеанс упражнений, например, бег.Другими словами, это действительно важно!

Белок содержится как в животной, так и в растительной пище. Например, вы можете получать белок из животных источников, таких как курица, рыба, индейка и говядина, и вы можете получать белок из растительных источников, таких как соя, фасоль, бобовые, орехи и семена. Однако не все источники одинаковы.

«Бегунам, которые едят только растительную пищу, требуется больше общего белка каждый день, потому что растительные белки, как правило, не такого высокого качества, как белки животного происхождения», — говорит Спано Runner’s World .

Качество протеина часто зависит от аминокислотного состава пищи. Напоминаем, что аминокислоты являются строительными блоками белка, которые помогают вашему телу наращивать и восстанавливать мышцы, а также регулируют вашу иммунную систему. Есть 20 аминокислот, но только девять незаменимы, потому что ваше тело не может их вырабатывать, но они нужны вам для жизни.

До недавнего времени считалось, что растительной пище «не хватает» некоторых из 20 незаменимых аминокислот. Тем не менее, недавний обзор исследования показал, что, точнее говоря, профиль распределения аминокислот «менее оптимален в растительной пище, чем в пище животного происхождения», что означает, что некоторые аминокислоты ограничены в некоторых растительных белках.

Но хорошая новость заключается в том, что исправить эту проблему очень просто. «Рекомендуется употреблять в течение дня различные растительные продукты, такие как бобовые, соевые продукты, цельнозерновые, орехи и семена. Это поможет вам удовлетворить ваши потребности в белке без необходимости съедать гигантскую порцию какой-либо отдельной пищи », — рассказывает Кассетти Runner’s World .

Еще одно различие между белками животного и растительного происхождения — это количество белка на единицу объема пищи. Например, 3 унции курицы содержат около 20 граммов белка по сравнению с примерно 6 граммами в 3 унциях нута и 8 граммами в 3 унциях твердого тофу.

Чтобы получать такое же количество белка, как и из продуктов животного происхождения, вам нужно есть больше, если вы бегаете на растительной основе. Кассетти рекомендует варьировать растительные белки в еде.

Она говорит, что вместо того, чтобы есть 2 чашки нута с 22 граммами белка, съешьте чашку нута с 11 граммами белка, ½ чашки киноа с 4 граммами белка и жареные овощи. Затем сбрызните 2 столовыми ложками тахини, что составляет 5 граммов белка.

Этот контент импортирован из {embed-name}.Вы можете найти тот же контент в другом формате или найти дополнительную информацию на их веб-сайте.

Как ваше тело усваивает оба типа белка?

«Вы можете получить и использовать строительные блоки — аминокислоты — из животных белков легче, чем из растительных белков», — говорит Спано. На самом деле, существуют две системы оценки, используемые для определения биодоступности белка [мера того, сколько вещества может проникать в кровообращение вашего тела и достигать целевой области] пищи: аминокислота с поправкой на усвояемость белка. кислотная оценка (PDCAAS) и оценка усвояемых незаменимых аминокислот (DIAAS).

Система PDCAAS существует с 1993 года и учитывает качество аминокислот в продуктах питания, тогда как более новая система DIAAS была предложена Продовольственной и сельскохозяйственной организацией Объединенных Наций (ФАО) в 2013 году. Она определяет усвояемость аминокислот в конечном итоге. тонкой кишки, обеспечивая более точное измерение количества аминокислот, усваиваемых организмом.

Знать оценку каждого отдельного белка не обязательно, но из этих систем оценки можно сделать несколько выводов.В основном, соя — единственный растительный белок, который имеет такие же высокие показатели, как мясо и молочные продукты. Картофель, горох и фасоль также близки к мясу по обоим показателям, хотя обычно они примерно на 25 процентов ниже.

«Поскольку эти строительные блоки не так биодоступны в растительных белках, вам потребуется больший размер порции белка, чтобы удовлетворить ваши потребности», — говорит Спано. В целом, Spano рекомендует стремиться к минимуму 30-40 граммов белка за один прием пищи, если вы потребляете только растительную пищу (в отличие от 20-25 граммов белка, если вы потребляете продукты животного происхождения).

Согласно Академии питания и диетологии, если вы веган или вегетарианец, который в течение дня потребляет различные растительные белки, у вас не должно возникнуть проблем с удовлетворением своих потребностей в белке. И если вы полагаетесь на протеиновые добавки, исследования показывают, что протеин риса и гороха может стимулировать изменения в мышцах и силе так же, как и сывороточный протеин.

Вам нужно больше белка на растительной диете?

Исследования последних 30 лет показывают, что спортсменам, занимающимся интенсивными тренировками, может потребоваться от 1 до 1.2–2,0 грамма белка на килограмм (0,45–0,9 грамма на фунт) веса тела в день для поддержания мышечной массы. Для бегуна весом 150 фунтов это от 68 до 135 граммов белка в день.

«Бегуну на растительной основе может потребоваться немного больше белка, чем бегуну, который употребляет животную пищу, но это не должно быть слишком сложным», — говорит Кассетти.

Спано цитирует одно исследование, которое показало, что спортсменам-вегетарианцам на выносливость требуется на 12 процентов больше — или примерно на 10 дополнительных граммов в день — общего белка по сравнению с всеядными спортсменами, работающими на выносливость.Таким образом, для того же 150-фунтового бегуна на растительной основе это составляет от 78 до 145 граммов белка в день.

И снова Кассетти подчеркивает, что «важно потреблять белок из различных растительных источников и распределять этот белок во всех ваших блюдах и закусках».

Вот как может выглядеть обычный день для 150-фунтового едока на растительной основе:

→ Завтрак: Чаша мюсли с ½ стакана сырого овса + 3 столовые ложки семян конопли + 30 грамм миндаля + фрукты = 18 граммов белка

→ Обед: Чечевичный суп с 1 ½ чашки чечевицы = 30 граммов белка

→ Закуска: 1 чашка эдамаме = 20 граммов белка

→ Ужин: 5 унций темпе с рисом и овощи = 30 граммов белка