Нормализация обмена веществ: Как улучшить обмен веществ в организме — что делать, чтобы наладить метаболизм, продукты нормализующие пищеварение

≡ Восстановление обмена веществ и нормализация веса в г. Днепр

Для чего нужен метаболизм? Он позволяет нашему телу расти, размножатся, заживлять повреждения и реагировать на окружающую среду. Но более распространённое выражение метаболизма — называют процесс переработки употребляемой человеком пищи. Этот процесс делится на анаболизм и катаболизм.

Анаболизм — процесс биосинтеза в результате которого, из простых веществ (молекул) образуются более сложные вещества (например, мышечные волокна). Очень энергетически затратный процесс.

Катаболизм — это процесс, наоборот, когда происходит распад сложных веществ на простые элементы, а также выделяется необходимая энергия.

Анаболизм и Катаболизм не могут существовать друг без друга. Если мы тратим такое же количество энергии, что получаем из пищи, у нас не появится проблем ни с весом, ни с общим здоровьем. Причем нарушение этого баланса в какую-то из сторон одинаково вредно. Когда количество съеденных калорий больше, чем количество затраченных, мы постепенно оплываем жирком в неположенных местах. Когда же калорий слишком мало, начинает разрушаться организм, пытаясь найти энергию для своей жизнедеятельности. И хорошо если он берёт энергию из жировых отложений. Хуже будет тогда, когда начинает разрушаться мышечная ткань. Чтобы вы знали. Небольшая часть полученной и нерастраченной энергии складывается в виде углевода гликогена – источника энергии для активной работы мышц. Он запасается в самих мышцах и печени. Остальное накапливается в жировых клетках. Причём для их образования и жизни требуется гораздо меньше энергии, чем для постройки мышц или костей. Даже если вы двигаетесь очень много, нужно, так или иначе, следить за потребляемыми калориями, чтобы их не оказалось больше положенного.
Как метаболизм связан с массой тела? Можно сказать, что вес тела — это катаболизм минус анаболизм. Другими словами, разница между количеством поступившей в организм энергии и использованной им.

Несложный пример: съедаете бутерброд (колбаса с хлебом, самый простой) и ложитесь на диван. Из хлеба и колбасы организм получил жиры, белки, углеводы и 140 ккал. При этом лежащее тело потратит полученные калории только на расщепление съеденной пищи и немного на поддержание функций дыхания и кровообращения – около 50 ккал в час. Остальные 90 ккал превратятся в 10 г жира и отложатся в жировое депо. Если же любитель бутербродов выйдет на спокойную прогулку, полученные калории организм потратит примерно за час.

Нормализация веса в клинике Health Partner

«Хороший» и «плохой» метаболизм? Исследования показали, что замедленный метаболизм наблюдается при ряде заболеваний, например, гипотиреозе — недостатке гормона щитовидной железы. Тогда как у большинства людей с лишним весом наблюдается энергетический дисбаланс. То есть энергии в организм поступает гораздо больше, чем её нужно на самом деле. И именно она складируется про запас Поэтому и стоит задуматься о восстановление обмена веществ и нормализации веса.

Статьи расхода калорий

Чтобы расход и получение калорий держать под контролем, стоит помнить основные направления дополнительных энергозатрат.

• Чем выше масса тела, тем больше калорий ему требуется. Но, как мы знаем, жировой ткани надо совсем мало энергии для жизни, а вот мышечная потребляет достаточно. Поэтому 100-килограммовый культурист потратит как минимум в два раза больше калорий на ту же работу, что и его 100 — килограммовый ровесник с неразвитыми мышцами и высоким процентом жира.
• Чем старше становится человек, тем выше у него разница между поступлением энергии и её тратами за счёт гормонального дисбаланса и резкого снижения физической активности.
• В метаболизме мужского организма активно участвует гормон тестостерон. Это настоящий естественный анаболик, заставляющий организм тратить энергию и ресурсы на выращивание дополнительных мышц. Именно поэтому мышечная масса у мужчин обычно гораздо выше, чем у женщин. А поскольку на поддержание жизнедеятельности мышц требуется гораздо больше энергии, чем для сохранения жира, то мужчина и женщина одного роста и веса тратят неодинаковое количество калорий на одни и те же действия. Проще говоря: мужчины больше тратят энергии, им требуется больше еды, а при желании они гораздо быстрее худеют.

Простая формула расчёта калорий Для мужчины: (9,99 умножить на вес в кг) + (6,25 умножить на рост в см) — (4.92 умножить на возраст в годах) + 5 = ;
Для женщины: (9,99 умножить на вес в кг) + (6,25 умножить на рост в см) — (4,92 умножить на возраст в годах) — 161 = .
Чтобы было понятно, как считать, возьмём женщину 30 лет весом 70 кг и ростом 160 сантиметров: (9,99×70) + (6,25×160)— (4,92×30) – 161 = (699,3 + 1000 – 196,8— 161) = 1390,7 ккал— это то количество калорий, меньше которого давать организму нельзя, иначе метаболизм начнёт замедляться в целях сохранить энергию, так как для него наступают голодные дни, а значит, пора делать запасы.

Восстановление обмена веществ в частной клинике

Как влияют физические нагрузки и спорт на нормализацию метаболизм и восстановление обмена веществ? Нередко те, кому нужна нормализация веса,  идут в тренажерный зал, начинают активно заниматься спортом, чтобы увеличить энергозатраты и таким путём избавиться от лишних килограммов. Чтобы вес и объёмы успешно покидали ваше тело, важно владеть информацией, как различные виды физической нагрузки воздействуют на организм. Клиника в г. Днепр знает как помочь Вам для нормализация веса и восстановления обмена веществ.

Физические нагрузки состоят из двух основных видов: аэробные и анаэробные. К первым относят бег, интенсивную ходьбу, различные виды танцев, аэробику, велосипед, ко вторым относят тренировки с различными отягощениями. С их помощью тратится много калорий, так как обычно они проводятся интенсивно, расход энергии происходит, даже когда вы уже не тренируетесь, во сне, в том числе. Однако чтобы такие чудеса происходили, нужно иметь мышцы, привычные к нагрузкам, чтобы в течение определённого времени проводить подобную тренировку. Занимаясь, например, бегом, хороших результатов вряд ли можно добиться, если мышечный корсет развит слабо. Чтобы исправить ситуацию и развить мышечный корсет, стоит сначала заняться анаэробными, силовыми упражнениями, а уже потом подключить аэробные. У кого же мышечный корсет уже достаточно развит, чтобы создать красивую фигуру и укрепить здоровье, хорошо подойдёт сочетание силовых и аэробных нагрузок. Они обе приводят к расходу калорий, вот только происходит это разными способами.

Немного о питании и диетах Для того чтобы ускорить свой метаболизм необходимо изменить подход к своему питанию. А это значит, что необходимо убрать определённые продукты из своего рациона, которые просто делают «помойку» из вашего организма и начать есть больше. Не нужно искать какую-то особую, строгую и убийственную диету. Достаточно начать питаться дробно (небольшими порциями) и часто (5-6 приёмов пищи в день). Не забываем при этом подсчитывать калории. Ни в коем случае нельзя допускать голода для организма.

Важно! Для восстановление обмена веществ, ограничьте сладкие и жирные продукты, полуфабрикаты в первую очередь. Более подробно о том, отчего следует по возможности избавиться в своём рационе, вы можете прочитать в нашей статье или.

Несколько советов по ускорению метаболизма.

• Чистая вода. Пейте больше простой и чистой воды. Благодаря этому вы сможете контролировать свой аппетит и включать накопленные жировые отложения в обменные процессы.
• Стабильный сон. Очень важно для отличного обмена веществ спать 7-8 часов в сутки. Желательно, чтобы сон был в период с 22:00-23:00 до 05:00-06:00. Самое оптимальное время, для выработки, например, мелатонина (гормон жизни и долголетия).
• Стрессы. Постарайтесь максимально избавиться от стрессов. Стресс, влияет на наш организм не очень положительно изменяя наш гормональный фон. При сильном стрессе вырабатывается кортизол, который разрушающие действует на вашу мышечную ткань.
• Контрастный душ — очень хороший помощник в ускорении вашего метаболизма.
• Спорт. Займитесь своим телом. Измените свой образ жизни. Просто начните заниматься ходьбой, бегом, делать базовые упражнения (отжимания, приседания, подтягивания) обязательно начните делать растяжку или займитесь йогой. Если вас это все бесит, начните хотя бы ежедневно танцевать.
• Ешьте фрукты богатые витамином С и овощи богатые клетчаткой. Все фрукты и цитрусовые, содержащие в больших количествах витамин С, в частности, это касается ананасов, кислых ягод, киви, зелёных яблок, способствуют улучшению пищеварительного процесса, помогают сжигать жиры и ускорять метаболизм. А богатые клетчаткой овощи будут помогать лучше работать кишечнику и желудку. Быстро наполняя желудок, они на продолжительное время дают ощущение сытости.
• И наконец для ленивых , Health partner предлагает программы : Health, Детокс, Антистресс, Релакс, которые не только нормализуют метаболизм , но и помогают адекватно привести в порядок физическое и психическое здоровье.

Препараты для нормализации обмена веществ

{{/if}} {{each list}} ${this} {{if isGorzdrav}}

Удалить

{{/if}} {{/each}} {{/if}}

Заказать таблетки для ускорения метаболизма

Аптечная сеть «Горздрав» действует на территории Санкт-Петербурга, Москвы, Московской и Ленинградской областей. Своим клиентам мы предлагаем выгодную бонусную программу и гибкую ценовую политику. Заказать таблетки для ускорения метаболизма можно в режиме онлайн на нашем сайте. Во время оформления заказа необходимо выбрать, в какой из аптек «Горздрав» вам будет удобнее забрать лекарство и оплатить.

На интернет-ресурсе можно ознакомиться с инструкциями к препаратам, подобрать дешевые или дорогие аналоги по действующему веществу, изучить отзывы других заказчиков. «Горздрав» делаем все необходимое, чтобы покупка медикаментов была удобной и выгодной.

Применение препаратов для ускорения метаболизма

Метаболизм — важнейшая функция, комплекс энергетических и биохимических процессов, способствующих усвоению питательных веществ и расходованию их на нужды организма, удовлетворение его потребностей в энергетических и пластических веществах.1 О том, что скорость обменных реакций снизилась и необходима нормализация метаболических процессов, можно понять по признакам:

• быстрый набор лишнего веса;
• отеки лица, конечностей;
• ухудшение состояния кожных покровов, волос;
• высокая утомляемость.

Если нарушенный метаболизм спровоцировал ожирение, бесполезно покупать рядовые средства для похудения. В первую очередь, нужно привести в норму обменные процессы. Только тогда липолиз активируется. Помогут в этом современные препараты для ускорения метаболизма. Подбирать их нужно с помощью квалифицированного врача.

Формы выпуска

В каталоге сайта «Горздрав» представлены высокоэффективные лекарства для улучшения обмена веществ, выпущенные в разных формах:

• таблетки;
• кремы;
• капсулы;
• пластыри;
• сушеные травы.

Для кого

Богатый выбор препаратов для обмена веществ облегчает выбор, позволяет приобретать медикаменты, которые имеют минимальное количество побочных эффектов и хорошо переносятся больным. В наших аптеках можно заказать лекарства:

• для взрослых;
• для детей;
• лиц, с нарушениями в работе эндокринной системы.

Противопоказания

При выборе продуктов, направленных на повышение скорости протекания обменных процессов, нужно внимательно изучать противопоказания и побочные действия. Чаще всего производители указывают, что их препараты нельзя использовать:

• во время беременности;
• детям до определенного возраста;
• в период грудного вскармливания;
• при аллергии на любое из соединений состава.

Сертификаты

Некоторые сертификаты товаров, представленных в нашем каталоге.

ПЕРЕД ПРИМЕНЕНИЕМ ПРЕПАРАТОВ НЕОБХОДИМО ОЗНАКОМИТЬСЯ С ИНСТРУКЦИЕЙ ПО ПРИМЕНЕНИЮ ИЛИ ПРОКОНСУЛЬТИРОВАТЬСЯ СО СПЕЦИАЛИСТОМ.

 

Список литературы:

1. [1] Граник В. Г. «Метаболизм эндогенных соединений», М., «Вузовская книга», 2006, 528 с.

Как нормализовать вещественный обмен в организме

Человек чувствует себя хорошо, когда все жизненно важные процессы в организме протекают бесперебойно. При любом малейшем сбое могут появляться различные заболевания. При изменении липидного обмена отмечается появление лишнего веса или напротив, резкое похудение. Именно поэтому важно поддерживать нормальный обмен веществ в организме.

Содержание:

Метаболизм представляет собой комплекс химических реакций в человеческом организме, которые расщепляют еду и преобразовывают ее в энергию. В обмене веществ принимают участие специальные ферменты, которые ускоряют процесс переваривания пищи, усваивание питательных веществ.

В организме может происходить 3 вида нарушения метаболизма:

• Нарушение обмена белков. Человек постоянно испытывает чувство голода, находится в раздраженном и беспокойном состоянии, впадает в депрессии. В таком случае поможет белковая диета.

• Нарушение углеводного обмена. Человек не может и дня прожить без кофе, безразличен к сладкому, отсутствует аппетит. Может наблюдаться обратная картина – человек постоянно ест сладкое, перекусывает конфетами и пирожными. Необходима углеводная диета под наблюдением специалиста. 

• Комбинированный. При таком метаболизме человек постоянно ощущает слабость, сонливость, тревожность, не может жить без сладкого и склонен к ожирению.

Причины нарушения обмена веществ

Когда нарушается метаболизм, в организме неправильно протекают все типы вещественного обмена. Это приводит к разным болезням, которые нуждаются в своевременном лечении.

К причинам нарушения метаболизма относят:

• наследственная предрасположенность;

• гормональный сбой;

• частое потребление алкоголя, курение;

• нарушение работы надпочечников;

• неправильное питание;

• негативное влияние окружающей среды;

• нехватка в организме микро- и макронутриентов.

Определить нарушение обмена веществ в организме можно по следующим симптомам:

• повышенный аппетит или его отсутствие;

• резкое похудение или набор веса при привычном питании;

• появление пигментных пятен;

• разрушение зубной эмали;

• сыпь на коже;

• запоры и диарея;

• ухудшение состояния волос, ногтей, преждевременное появление седины;

• отек нижних конечностей;

• раздражительность, частые стрессы;

• безразличие и апатия к происходящему;

• плохое состояние.

Нарушение метаболизма может привести к следующим заболеваниям и проблемам:

• подагра;

• сахарный диабет;

• повышение уровня холестерина в крови;

• ишемическое заболевание сердца;

• дерматологические заболевания;

• анорексия;

• проблемы с ЖКТ.

Как восстановить обмен питательных веществ

Главное своевременно выявить нарушение обмена веществ и нормализовать его, чтобы не допустить болезней. Исправить это можно с помощью лекарственных средств под строгим наблюдением врача. Также это можно сделать самостоятельно (корректировка рациона питания, отказ от вредных привычек, занятие спортом, прием витаминов).

Лекарственные препараты

Обычно врачи и диетологи прописывают следующие препараты:

Редуксин. Помогает избавиться от лишнего веса, подавляя тягу к еде. Принимается внутрь раз в день. Имеет множество побочных реакций.

Лецитин. Стабилизирует расщепление жиров на аминокислоты.

Глюкофаж. Улучшает работу поджелудочной железы, ускоряет обмен веществ, нормализует работу желудка. Побочные эффекты появляются крайне редко.

Супрадин.

Перед приемом стоит ознакомиться с противопоказаниями.

Витаминные добавки

Определить необходимые витамины сможет только специалист-диетолог после определения диагноза. Обычно прописывают:

• рыбий жир – понижает количество холестерина в крови, положительно сказывается на сосудах;

• витамины – улучшают все типы метаболизма;

• йод – нормализует функции щитовидной железы;

• хром – улучшает работу желудка, помогает поддерживать содержание сахара в крови на нужном уровне;

• витаминно-минеральные добавки – нормализуют метаболизм;

• пробиотики – выводят токсичные вещества из организма.

Режим питания

Не стоит ограничиваться приемом лекарств и витаминов. Для нормализации обмена веществ важно соблюдать правильное питание. Стоит отказаться от вредной пищи (сильно жареной или соленой), поменьше есть сладкого и отказаться от алкогольных напитков. Врачи советуют утром на голодный желудок выпивать стакан питьевой воды с лимонным соком.

В ежедневном рационе должны присутствовать овощи, фрукты, молочка, рыба, курица, яйца. Всю пищу стоит разделить на 4-5 приемов в день. Не стоит забывать, что за день нужно выпивать 2 л воды. Блюда можно приправлять перцем, чесноком и другими специями. Следуя этим правилам, можно поддерживать вес на нужном уровне и нормализовать метаболизм.

Физические упражнения

Если вести малоподвижный образ жизни, нормализовать обмен веществ выше описанными способами не получится. Специалисты советуют каждый день выполнять физические упражнения и полезные процедуры:

• бег, быстрая ходьба, плавание, езда на велосипеде. Можно записаться в спортивный зал. Любые физические нагрузки при регулярном выполнении принесут пользу;

• контрастный душ;

• массаж в профилактических целях;

• отжимания, приседания. Эти упражнения помогут укрепить мышцы, их можно выполнять самостоятельно в домашних условиях;

• продолжительные прогулки на свежем воздухе.

Образ жизни

Важно научиться контролировать свои эмоции, быть сдержанным, уметь справляться депрессией и стрессовыми ситуациями. Психическое уравновешенное состояние способствует нормализации гормона, отвечающего за аппетит. Стоит отказаться от вредных привычек, таких как курение, частое употребление спиртного. Эти привычки негативно отражаются на здоровье и нарушают метаболизм.

Из-за чего нарушается метаболизм и как его восстановить?

Метаболизм – это комплекс энергетических и биохимических процессов превращения веществ, обеспечивающих жизнедеятельность и здоровье организма. Цепочка превращений может нарушиться при изменениях в работе щитовидной и половых желез, надпочечников, гипофиза. На обмен веществ также негативно влияет избыточное, некачественное или недостаточное питание. Рассмотрим способы его восстановления.

Нарушение метаболизма – виды и признаки

Выделают несколько основных разновидностей метаболизма: белковый, жировой, углеводный, витаминный, минеральный, кислотно-щелочной. Каждый из них может пострадать при гормональных сбоях, из-за жестких диет и других негативных факторов. Чем чреваты различные обменные нарушения?

Белковый метаболизм нарушается при дефиците или избытке белков в рационе. Две основополагающие причины нарушения жирового обмена – истощение и ожирение. В первом случае происходит гормональный дисбаланс, падает иммунитет, начинают выпадать волосы и крошиться ногти. Во втором – возрастет риск сахарного диабета, атеросклероза, сердечно-сосудистых болезней.

Нарушение углеводного метаболизма приводит к гипо- или гипергликемии – к снижению или повышению уровня сахара в крови. При неполадках в водном обмене либо в организме задерживается жидкость, либо он обезвоживается. Последнее состояние чревато сгущением крови, повышением давления и развитием болезней сердечно-сосудистой и выделительной системы.

Нарушение витаминного метаболизма приводит к авитаминозу или гиповитаминозу. Минерального – к снижению иммунитета, болезням тканей и органов. Дисбаланс кислот и щелочей чреват разными исходами – от агрессивности до смерти.

К важным признакам нарушения обмена веществ относят низкий гемоглобин, избыток холестерина, повышение сахара. Выявляют их только лабораторным путем.

Внимание! Внешне проблему можно распознать по слабости, выпадению волос, мигреням, расстройствам сна, апатии, резкому снижению или набору веса, отсутствию аппетита, сыпи. Это основные проявления. У каждого человека метаболические нарушения протекают и проявляются индивидуально.

Восстановление метаболизма

Чтобы восстановить метаболизм, необходимо выяснить причину его нарушения. При гормональном сбое следует пропить курс определенных препаратов, которые должен назначить врач. При изменении кислотно-щелочного баланса – посетить гастроэнтеролога. При истощении – увеличить в рационе количество легкоусвояемого белка. Справиться с метаболическим нарушением можно, только искоренив его причину.

Как ускорить после диеты?

Метаболизм часто замедляется, когда человек пытается похудеть, поскольку организм старается защититься от истощения, сохранив максимум питательных веществ и энергии. Чтобы восстановить его, нужно плавно выходить из диеты, употреблять белковые продукты, сократить количество углеводов, больше двигаться, пить не менее 3 л воды в день, перейти на дробное питание – часто, небольшими порциями.

Как замедлить после диеты?

Если наоборот наблюдается истощение организма из-за слишком ускоренного обмена веществ, старайтесь употреблять исключительно горячую пищу, больше спите, введите в рацион жирные продукты, разграничьте питание – ешьте отдельно белковую и углеводную еду, повысьте калорийность ежедневого меню на 25%.

Продукты для восстановления метаболизма

Некоторые продукты также способны нормализовать метаболизм. Они влияют на скорость пищеварения и восстанавливают баланс метаболических процессов.

Продукты, богатые клетчаткой, восстанавливают полноценное усвоение продуктов. К ним относят зеленый и репчатый лук, томаты, кокос, огурцы, авокадо, редис, белую и цветную капусту.

Многие продукты с высоким содержанием витамина C смещают анаболический-катаболический баланс в правильную сторону. Это лимон, грейпфрут, ананас, арбуз, клубника, смородина, малина. Таким же действием обладает пища с быстрым комплексом белков – молоко и произведенные из него продукты.

Сложные углеводы с низкой степенью всасываемости: манная каша и изделия из нее – снижают секрецию поджелудочной железы. Источники полиненасыщенных жирных кислот омега изменяют холестериновый баланс. Среди них – рыбий жир, нефильтрованные масла, свиное сало.

Внимание! Острые специи ускоряют метаболизм на 20%. Добавляйте в блюда перец, имбирь, карри и другие пряности.

Таблетки для здорового метаболизма

Многие мечтают восстановить обмен веществ с помощью «волшебных пилюль». Такие средства существуют, но они способны ускорить или замедлить метаболизм лишь на время. Нормализовать его раз и навсегда можно только с помощью правильного питания и образа жизни.

10 способов ускорить обмен веществ

Часто, стремясь быстрее скинуть ненавистные килограммы, мы ограничиваем свой дневной рацион настолько, что не покрываем даже уровень основного обмена. Наш организм, понимая, что наступили «черные дни», переходит в режим «энергосбережения». То есть откладывает про запас все больше калорий, оставляя на собственные нужды самый минимум. И все – вес стоит! А иногда даже и растет. Отсюда парадокс – едим все меньше, но порой еще и лишние кило набираем. И чем меньше калорийность рациона, тем хуже обмен веществ.

— Есть несколько простых, но довольно эффективных способов «подстегнуть» уснувший обмен, дать организму возможность с новыми силами бороться с лишними килограммами. – подсказывает наш постоянный эксперт, врач-диетолог Людмила Денисенко.

1. Начните питаться по-человечески!

Конечно, не стоит начинать есть килограммами после грамм. Но все же любая еда ускоряет обмен веществ. На переработку потребляемых вами питательных веществ уходит около десяти процентов калорий, которые вы сжигаете за день. Большинство диет и диетических программ не зря предусматривают четырех- или пятикратный прием пищи в день небольшими порциями. Самое главное — правильно завтракать, ведь утренняя еда – это кнопка «включить» для вашего обмена веществ. Некоторые продукты или их компоненты способны сильнее подстегивать основной обмен (см. Важно)

2. Полюбите двигаться.

Любая физическая активность, будь то ходьба или езда на велосипеде, плавание или танцы подстегивают сжигание жира — причем еще почти в течение часа после ее прекращения. Предпочтительнее всего силовые упражнения, которые способствуют росту мышечной ткани, ведь мышцы требуют затрат калорий даже в покое! То есть чем больше у вас мышц, тем больше калорий вы сжигаете каждую минуту в течение дня, независимо от того, занимаетесь ли вы спортом или просто смотрите телевизор. Поэтому стоит ускорять темп обмена веществ регулярными упражнениями с отягощением. И помните, для того чтобы расходовать калории, вам даже не нужны специальные упражнения, дорогущие фитнес-клубы и эксклюзивная спортивная форма от известных марок. Подойдут любые движения, вместо отягощений можно использовать бутылки с водой, например. Главное – двигаться!

3. Делайте массаж.

Любой вид массажа (антицеллюлитный, спортивный, вакуумный, даже самомассаж в домашних условиях) отлично стимулирует кровообращение, лимфодренаж, что значительно ускоряет обмен веществ.

4. Полюбите сауну.

А также обычную или инфракрасную баню, которые усиливают клеточную активность, обеспечивают свободное дыхание кожи как самостоятельного органа, разогревая тело, открывают поры, увеличивают циркуляцию в клетках и стимулируют обмен веществ.

Кроме того, принимайте горячие ванны (продолжительностью 5-10 мин) и контрастный душ, которые так же ускоряют обмен веществ.

5. Пейте больше воды.

Вода является важнейшим участником процесса обмена веществ в организме человека. Вода подавляет аппетит и помогает вовлекать в обмен веществ отложенные жиры. Вода — матрица жизни, основа обмена веществ. Недостаток воды может заметно замедлить метаболизм — потому что главной задачей печени в таком случае будет восстановить запасы жидкости в организме, а не сжигать жиры.

6. Спите правильно.

Глубокий сон способствует обновлению клеток мозга, выработке в организме гормона роста, который ускоряет обмен веществ и, соответственно, сжигает калории и приводит к снижению веса.

7. Больше гуляйте.

Особенно сейчас, весной. Солнечный свет и свежий воздух увеличивают активность человека, ускоряют обмен веществ а также стабилизируют и активизировуют защитные силы.

8. Подружитесь с ароматерапией.

Например, эфирное масло можжевельника помогает снять боль в мышцах, расширяет кровеносные сосуды, тем самым улучшая кровообращение и ускоряя обмен веществ. Его можно добавлять в крем для массажа или просто вдыхать запах.

9. Будьте оптимистами.

Стресс освобождает жировые кислоты, которые перераспределяются по кровеносной системе и откладываются в жир. Научитесь расслабляться после трудного дня – та же горячая ванна, самомассаж или йога помогут в этом.

10. Чаще занимайтесь сексом!

Секс ускоряет обмен веществ, ведь при оргазме кровь усиленно насыщается кислородом, улучшается питание тканей и, следовательно, ускоряется обмен веществ.

ВАЖНО!

Вещества, необходимые нашему обмену

Белок. На усвоение белковой пищи организм затрачивает куда больше времени и энергии, чем на ту же операцию в отношении легкоусваиваемых углеводов и жиров. По мнению американских диетологов, процесс переваривания белка активизирует энергозатраты организма (то есть сжигание калорий) почти в два раза. На этом эффекте основаны все белковые диеты, но не усердствуйте – переизбыток белка в рационе тоже имеет много минусов.

Углеводы + клетчатка. Углеводы в сочетании с клетчаткой усваиваются довольно медленно, поддерживая уровень инсулина в крови на протяжении нескольких часов. Когда уровень инсулина в крови скачет, организм воспринимает это как тревожный знак и начинает на всякий случай накапливать стратегические запасы жира. А если с этим показателем все в порядке, скорость обмена веществ увеличивается на 10%, а иногда и более.

Растительная пища. Как известно, у вегетарианцев ускоренный обмен веществ. При этом больше расходуется энергии на сырые продукты. Включайте в свой рацион до 80% растительной пищи. Фрукты, содержащие фруктовые кислоты и растительные ферменты, так же позволяют сбрасывать лишние килограммы, помогают обмену веществ в организме. Грейпфрут и лимон улучшают пищеварение, способствуют сгоранию жиров и ускоряют обмен веществ.

Омега-3 жирные кислоты. Они регулируют уровень лептина в организме. По мнению многих исследователей, именно этот гормон отвечает не только за скорость обмена веществ в организме, но и за принципиальные решения по поводу того, сжигать жир в данный момент или его накапливать. Лучшие продукты с повышенным содержанием омега-3 жирных кислот – это жирная рыба, льняное семя и масло из него, брокколи, фасоль, китайская капуста, цветная капуста и грецкие орехи.

Витамин B6 и другие витамины группы В. Они действительно ускоряют обмен веществ в клетках. Включайте в свой рацион продукты, содержащие этих маленьких помощников: мясо, печень, рыбу, яйца, хлеб из непросеянной муки, бобовые, бананы, коричневый рис, орехи и дрожжевой экстракт.

Фолиевая кислота. Она ускоряет обмен веществ в организме, укрепляет иммунную систему и помогает очищению. Содержится в моркови, зеленых листовых овощах, печени, бобовых, яйцах, продуктах из непросеянной муки, дрожжах, апельсиновом соке и пшеничных отрубях,

Хром. Он помогает перерабатывать жиры и углеводы, регулирует поступление сахара в кровь. Основными источниками являются хлеб из муки грубого помола, овощи, бобовые, крупы

Кальций. Также ускоряет метаболизм. Как свидетельствуют результаты исследований британских диетологов, страдальцы от лишнего веса, которые увеличили дневное потребление кальция до 1200-1300 мг, сбрасывали вес вдвое быстрее, чем те, кому кальций доставался в пределах обычной дневной нормы. Ищите кальций в молоке, твороге, сыре, сое, яичном желтке.

Йод. Он активизирует щитовидную железу, то есть также ускоряет обмен веществ. Много йода содержится в морской капусте, морепродуктах, и даже в семечках яблок. Если разжевать в день всего 6-7 семечек, то получите дневную норму.

Кофе, зеленый чай, содержащие кофеин. Они также ускоряют обмен веществ на 10-16 процентов, способствуя высвобождению жирных кислот из жировых тканей.

Специи и пряности. Почти все они учащают сердцебиение и повышают температуру тела. Так, например, порция острой пищи, благодаря капсаицину — веществу, которое придает перцу его остроту, ускоряет обмен веществ на 25 процентов.

Книгу «Кремлевская диета» журналиста «Комсомольской правды» Евгения Черныха, испытателя самой популярной и эффективной системы похудения в России. Ее с успехом применяют миллионы людей в нашей стране и за рубежом.

Читайте также:

Книгу «Кремлевская диета» журналиста «Комсомольской правды» Евгения Черныха, испытателя самой популярной и эффективной системы похудения в России. Ее с успехом применяют миллионы людей в нашей стране и за рубежом.

10 простых способов разогнать метаболизм :: Здоровье :: РБК Стиль

Автор Фрида Морева

24 сентября 2018

Как без особых усилий расходовать больше калорий.

1. Лежите на диване

Обычно лежание на диване ассоциируют только с неподвижностью и лишним весом, но в то же время это моменты комфорта и расслабления. Стресс стимулирует выработку гормона кортизола. Повышенный кортизол в долгой перспективе вызывает нарушение обмена веществ. Поэтому если вы не из тех счастливых людей, которые могут обрести спокойствие за счет прогулки или танцев, находите время на то, чтобы просто прийти в себя. Если надо — на диване с любимым сериалом.

2. Откажитесь от вечернего бокала вина

Все тот же стресс может ввести привычку расслабляться вечером за счет бокальчика красного. Но известно, что даже один бокал алкоголя может отрицательно влиять на метаболизм, вызывая такие болезни обмена веществ, как диабет. Если вам нужен ритуал для вечернего отдыха, попробуйте строить его не вокруг алкоголя, а вокруг теплых полезных напитков — травяных или ягодных чаев.

3. Выбирайте здоровые десерты

Простые углеводы — сладкое и продукты из белой муки — быстро поднимают уровень сахара в крови, запускают процесс отложения жира и делают организм устойчивым к инсулину. В то же время десерты — это важная часть социального ритуала, который часто совсем не хочется пропускать. Компромисс — десерты из фруктов, творожные угощения с орехами без добавления сахара, печенье из цельнозерновой муки с бананом и изюмом. Да, во фруктах тоже содержится сахар, но вместе с клетчаткой он усваивается и попадает в кровь медленнее.

4. Пританцовывайте

Даже небольшая активность в течение дня — пританцовывание в очереди, отбивание ритма ступнями во время работы за столом, прогулка вокруг остановки в ожидании автобуса — сжигает калории и заставляет избавляться от лишних запасов. Час такой активности в день без изменения других факторов может позволить сбросить до одного килограмма в месяц!

5. Пейте кофе

Кофеин стимулирует нервную систему, а вместе с ней и обмен веществ, который может ускориться на 5–8% (100–150 килокалорий в день). Кроме того, чашка кофе перед тренировкой поможет взбодриться и сделать упражнения эффективнее. Важно обсудить этот вопрос с вашим гастроэнтерологом — при некоторых проблемах ЖКТ этот напиток нежелателен.

6. Компенсируйте недостатки сидячего образа жизни

Сидячий образ жизни вызывает целый спектр проблем со здоровьем и замедляет обмен веществ. Чтобы лучше себя чувствовать и повысить дневную активность, введите в привычку каждый час делать 10-минутную разминку. Кроме того, можно попробовать стол, который позволяет работать стоя.

7. Ешьте больше овощей

Клетчатка в овощах требует от организма дополнительной энергии (калорий) для переваривания и усваивания. Кроме того, овощи в большинстве случаев содержат низкое количество калорий и высокое число витаминов, что тоже хорошо для нормализации веса.

8. Не забывайте о перекусах

Большие перерывы между едой или голодание могут замедлять обмен веществ. Поэтому следите за тем, чтобы есть более или менее регулярно. К тому же такая хитрость, как легкий перекус за пару часов до основного приема пищи (стакан кефира, овощной салат, тарелка легкого супа), поможет избежать переедания.

9. Занимайтесь спортом хотя бы пять минут в день

Высокоинтенсивная тренировка с высокой кардионагрузкой сжигает калории в первую очередь за счет высокого потребления кислорода. К тому же она повышает активность обмена веществ на 24 часа, даже если речь идет о пяти минутах в день. Выделите для себя это время, и уже через пару недель почувствуете себя более подтянутыми.

10. Старайтесь больше гулять

Прогулка — та нагрузка, которую несложно выполнять каждый день большинству из нас. Она помогает размяться, снять стресс, разогнать обмен веществ и стимулировать организм сжигать больше калорий. Полчаса в день — серьезная инвестиция в ваше здоровье. 

Комплекс Норм, нормализация обмена веществ, Choice, 30 капсул, 18518

Правильный обмен веществ – залог нормальной жизнедеятельности организма. При нарушении обмена веществ, причинами которого могут быть нарушение режима и качества питания, неблагоприятная экологическая обстановка, хронические стрессы и другие причины, страдают все органы и ткани организма. Как следствие нарушения обмена веществ – накопление вредных продуктов жизнедеятельности организма, которые приводят к серьезным заболеваниям. Среди них ожирение, сахарный диабет, инфаркт, онкологические и другие заболевания. Лечебно-профилактический комплекс «Норм» помогает эффективно решать эти проблемы.

Действие компонентов

При оздоровлении любым способом очень важно, чтобы в этот период в организм поступало необходимое количество биологически активных веществ, благодаря чему он будет продолжать работать стабильно.

Роль питательного комплекса, в данном случае, выполняют прозеры (проросшие зерна овса, пшеницы и кукурузы).

Прозеры, в сбалансированном виде, содержат практически все биологически активные вещества, необходимые для нормальной жизнедеятельности организма человека, а именно: легкоусвояемые углеводы; белки, содержащие незаменимые аминокислоты; витамины А, С, Е, группы В, РР, Н, D; макро-, микроэлементы К, Са, Mg, Fe, Cu, Zn, P и др.; растительные ферменты; фитогормоны; полифенольные вещества; растительные волокна и др. Также прозеры усиливают действие всех компонентов комплекса, обеспечивая эффект синергизма.

Все растения, витамины, минералы и другие ингредиенты, входящие в состав комплекса «НОРМ», обладают многосторонним терапевтическим действием. Однако в состав комплекса «НОРМ» они включены благодаря следующим свойствам:

Артишок (трава) – усиливает секрецию желчи, диурез, стимулирует метаболизм холестерина и липидов в крови, регулирует функцию щитовидной железы.

Мята перечная (трава) – способствует нормализации кровообращения в сердечной мышце, усиливает капиллярное кровообращение в тканях. Нормализует перистальтику кишечника, усиливает секрецию пищеварительных желез.

Стевия (трава) – нормализует уровень сахара в крови и рекомендуется для применения больным с нарушением обмена веществ, сахарным диабетом, атеросклерозом; нормализует работу печени и желчного пузыря; улучшает работу щитовидной железы; нормализует давление.

Брусника (листья) – снижает количество сахара в крови; оказывает дезинфицирующее, мочегонное и желчегонное действие; обладает выраженным бактерицидным эффектом.

Зелёный чай (листья) – уменьшает уровень холестерина в крови; улучшает кислородный и водно-солевой обмен; нормализует кроветворение и кровеносное давление в начальных стадиях гипертонической болезни.

Пажитник (семена) – нормализует углеводный обмен; снижает содержание холестерина в крови; улучшает липидный состав крови.

Витамин С – оказывает влияние на белковый, углеводный и жировой обмен.

Витамин В1 – участвует в процессах углеводного и энергетического обменов; нормализует функции нервной системы.

Витамин В2 – участвует в регуляции окислительно-восстановительных процессов обмена жиров, белков и углеводов.

Витамин В6 – участвует в обмене белков и жиров в организме; влияет на деятельность функции желудочно-кишечного тракта, неразрывно связан со здоровьем гормональной системы у женщин, укреплением иммунной системы. Все витамины группы В ответственны за выработку энергии за счет извлечения топлива из углеводов, белков и жиров, содержащихся в пище.

Витамин А – улучшает обмен глюкозы, позволяя организму более эффективно использовать инсулин, помогает этому гормону доставлять сахар из крови в клетки.

Биотин (витамин Н) – участвует в обмене жирных кислот в качестве составной части ферментов, помогает контролировать уровень сахара в крови, гарантирует сохранение здоровья волос и кожи, влияет на функциональное состояние нервной системы и желудочно-кишечного тракта.

Таурин (аминокислота) – управляет работой клеточных мембран. Восстанавливает жировой обмен. Для расщепления холестерина организму нужна желчь – фермент, вырабатывающийся в печени с помощью таурина. Таурин помогает более успешно переваривать жиры.

Хром (минерал) – оказывает значительное лечебное воздействие на целый спектр нарушений здоровья, включая: ожирение, неустойчивый уровень сахара в крови, инсульт, гипертонию, язвы и т.д. Принимает участие в регуляции кроветворения и в процессах углеводного обмена; регулирует усвоение глюкозы; поддерживает нормальный уровень холестерина в крови. Благодаря хрому увеличивается общая костно-мышечная масса тела, что, в свою очередь, ускоряет обмен веществ и сжигает лишний жир, способствует сжиганию калорий в процессе упражнений, что еще более облегчает «сбрасывание» веса.

Применение

Взрослым по 1 капсуле 2 раза в день, детям от 5 до 12 лет по 1 капсуле в день за 15 – 30 минут до приема пищи, запивая водой.

В период приема рекомендуется употреблять 1,5 – 2 литра воды в день. Курс приема 30 – 45 дней. Рекомендуется повторять 2 – 3 раза в год.

При простудных заболеваниях принимать по 2 капсулы 3 раза в день.

Состав (рус • укр • lat)	В капсуле 1мг
Прозери • Прозеры	Cмесь фито-компонентов, 310.600
Артишок (трава) • Артишок (трава) • Cynara scolymus
Мята перечная (трава) • М’ята перцева (трава) • Mentha piperita
Cтевия (трава) • Стевія (трава) • Stevia rebaudiana
Брусника (листья) • Брусниця (листя) • Vaccinium vitis-idaea
Зелёный чай (камелия китайская) • Зелений чай (камелія китайська) • Camellia sinensis
Пажитник (семена) • Пажитник (сім’я) • Trigonella foenun graecum
Витамин С	20,000
Витамин В1	1,000
Витамин В2	1,000
Витамин В6	1,000
Витамин А	0,300
Биотин	0,075
Таурин	66,000
Хром	0,025

Нормализация метаболического синдрома с применением фенофибрата, метформина или их комбинации

Цель: Целью этого исследования было оценить, улучшают ли и в какой степени фенофибрат (F), метформин (M) или комбинация этих препаратов характеристики метаболического синдрома (MetS).

Методы: MetS был определен как наличие> / = 3 критериев Национальной образовательной программы по холестерину, включая> / = 2 биохимических отклонения.Пациенты с MetS были рандомизированы для получения одного из семи курсов лечения дважды в день в течение трех месяцев: F 80 мг + M 850 мг, F 80 мг + M 500 мг, F 40 мг + M 850 мг, F 40 мг + M 500 мг, F. 80 мг + плацебо, M 850 мг + плацебо или плацебо. «Нормализованный» был определен как отсутствие биохимических отклонений MetS в течение 3-месячного периода лечения. Всего был проанализирован 681 пациент (средний возраст 56 лет, 59% мужчин, средний индекс массы тела 31,6 и 33,3 у мужчин и женщин соответственно).

Результаты: Комбинированная терапия высокими дозами привела к нормализации биохимических показателей у 17 больных.4% пациентов, тогда как только 5,8% пациентов во время F (p = 0,009) и 5,0% во время монотерапии M (p = 0,005) показали нормальные биохимические показатели. Соответственно, F 80 мг + M 850 мг два раза в день были наиболее эффективными для нормализации триглицеридов (55,0%), холестерина липопротеидов высокой плотности (35,0%) и глюкозы натощак (39,4%). Все виды лечения хорошо переносились, со сравнимой частотой нежелательных явлений между группами.

Выводы: Комбинированное лечение фенофибратом и метформином привело к нормализации биохимических нарушений, связанных с метаболическим синдромом, более эффективно по сравнению с любой терапией отдельно, без дополнительных побочных эффектов.Эти данные предполагают, что комбинированная терапия с высокими дозами может дать дополнительный терапевтический эффект, особенно у пациентов с метаболическим синдромом.

границ | Комментарий: к интерпретации константы нормализации в уравнении масштабирования

Многие соотношения масштабирования биологического размера следуют степенной функции Y = β X ^α , где Y — конкретный признак, β — константа нормализации (коэффициент масштабирования), X — мера размера. , α — наклон (показатель масштабирования).Никлас и Хаммонд (2019) утверждали, что, хотя многие исследования были сосредоточены на эмпирических значениях и биологическом значении α, сопоставимое внимание β не уделялось. Они также оценивают четыре возможных причины того, почему, по их мнению, β недостаточно изучено, включая убеждение некоторых исследователей (например, Huxley, 1932), что β не имеет биологического значения и что его значение часто является просто результатом статистической автокорреляции с α. . Их вдумчивый аргумент в пользу более глубокого изучения биологического значения β стоит прочитать, но я считаю, что он упускает из виду три важных момента.Во-первых, авторы не упоминают и даже не намекают на существование многочисленных исследований по масштабированию различных физиологических, анатомических и жизненно важных черт, которые показывают, как различные факторы влияют на β биологически значимым образом. Во-вторых, они не обсуждают альтернативные способы количественной оценки повышения отношения масштабирования (обычно оцениваемого как β), которые позволяют избежать проблемы автокорреляции. В-третьих, они не признают предшествующую заслуживающую внимания литературу о шкале скорости метаболизма, которая была сосредоточена на понимании как высоты, так и наклона, а также взаимосвязи между ними.Учитывая ограниченность места, я могу лишь кратко обсудить эти три момента. Читатели могут найти более подробную информацию в процитированных источниках, некоторые из которых являются обзорами соответствующей теории и эмпирических данных.

Во-первых, во многих исследованиях изучали, как различные факторы влияют на повышение (на что указывает β = антилогарифм пересечения Y на графике логарифма) масштабирования скорости метаболизма и других характеристик по массе тела. Например, многие исследования показали, что температура и поведенческая активность увеличивают скорость метаболизма при всех размерах тела, и, следовательно, общее увеличение масштабов (например.г., Brown et al., 2004; Стекольщик, 2010). Кроме того, учтите, что сравнительные исследования различных биологических характеристик часто корректируются с учетом эффектов размера тела с помощью анализа ковариации. Эти бесчисленные исследования, по сути, сравнивают высоты (на что указывают точки пересечения по оси Y) нескольких соотношений масштабирования и размера, которые считаются параллельными (т.е. α является постоянным; см. Sokal and Rohlf, 1995). Таким образом, этот статистический метод делает упор на β, а не на α, что является разумным, если α фиксировано. Действительно, сторонники закона 3/4-степени утверждают, что α фиксируется на уровне 3/4 для скорости метаболизма и других биологических процессов, и что вариация в этих масштабных соотношениях в основном включает β (например.г., Браун и др., 2004). Ранний пример был описан Хеммингсеном (1960), чей известный анализ метаболического масштабирования выявил значительные различия в β между одноклеточными эктотермами, многоклеточными эктотермами и многоклеточными эндотермами, но никаких межгрупповых различий в α (~ 3/4). Некоторые исследователи обсуждали биологические причины не только этой вариации в увеличении чешуек (например, Phillipson, 1981; Peters, 1983; Glazier, 2014a), но также и многих других физиологических, анатомических и жизненно важных черт среди различных таксонов. (е.г., Питерс, 1983; Шмидт-Нильсен, 1984; Hayssen и Lacy, 1985; Зотин, 1990; Сибли и Браун, 2007; Стекольщик, 2009а, 2018а). Биологически значимым анализом β не пренебрегали, как утверждают Никлас и Хаммонд.

Во-вторых, хотя Никлас и Хаммонд правильно указывают, что β и α нескольких пересекающихся отношений масштабирования могут коррелировать по простым математическим причинам, это может происходить, даже если отношения не пересекаются. При сравнении нескольких соотношений масштабирования, если β имеет тенденцию быть меньше геометрической средней точки отношения масштабирования, β и α будут иметь отрицательную корреляцию, тогда как если β имеет тенденцию быть больше средней точки, β и α будут иметь тенденцию быть положительными. коррелирован.Многие исследователи масштабных соотношений признали этот эффект автокорреляции (например, Gould, 1966; Peters, 1983; Glazier, 2010, 2018c). Чтобы избежать этой проблемы, β можно заменить другой мерой масштабирования высоты, L , которая является логарифмической ( Y / X ) в центральной средней точке отношения логарифмического масштабирования. Для отношений метаболического масштабирования эта мера повышения (метаболический уровень) может относиться к наклону биологически значимым образом, что не является простым математическим артефактом (например,г., Стекольщик, 2009б, 2010, 2014б; Киллен и др., 2010). Однако оценка L является наиболее полезной при сравнении непоследовательных, непересекающихся масштабных соотношений с аналогичными диапазонами массы тела. Например, большой разброс в средней точке массы, при которой оценивается L , может потенциально затруднить взаимосвязь между высотой и уклоном (Glazier, 2009b, 2010). Доказательства биологически значимых корреляций между высотой и наклоном масштабных соотношений наиболее убедительны, когда аналогичные результаты получены как для β, так и для L (Glazier, 2009b, 2010).

В-третьих, несколько исследователей, не упомянутых Никласом и Хаммондом, исследовали как высоту, так и наклон отношений масштабирования и их корреляцию. Например, Heusner (1991) подчеркнул, что отношения метаболического масштабирования не могут быть полностью поняты без объяснения их вертикального положения в «плоскости массы-мощности». Макнаб (2008, 2009) показал, как несколько экологических и биологических факторов влияют как на наклон, так и на подъем метаболических масштабных отношений у птиц и млекопитающих (см. Также другие ссылки, процитированные в Glazier, 2010).Прайс и Вайц (2012) исследовали корреляции между пересечениями шкалы и наклоном площади поверхности листьев. В частности, Glazier (2005, 2008, 2010, 2014b) предложил гипотезу границ метаболического уровня (MLBH), которая предсказывает, что подъем и наклон масштабных соотношений должны иметь отрицательную корреляцию для скорости метаболизма в состоянии покоя, но положительную корреляцию для скорости активного метаболизма. . MLBH также предсказывает, что любой фактор, который влияет на повышение отношений метаболического масштабирования (количественно измеряемый как β или L ), включая температуру, физиологическое состояние и уровень активности, в свою очередь, будет влиять на наклон через сдвиги в относительном влиянии различных метаболических факторов. процессы, которые относятся либо к площади поверхности, либо к объему.Многие исследования тестировали MLBH, часто с подтверждающими результатами (обзор в Glazier, 2008, 2009a, 2010, 2014b, 2018b).

Исследования биологического значения как возвышений, так и наклонов масштабных соотношений некоторых физиологических, анатомических и жизненно важных черт уже ведутся, и аналогичные усилия должны быть полезными для других видов биологических черт, как утверждали Никлас и Хаммонд ( 2019). Поступая таким образом, я рекомендую, чтобы исследователи хорошо разбирались в доступной, широко разрозненной литературе по различным видам организмов, чтобы быть уверенными, что они случайно не откроют заново или не упустят ценную информацию о схемах масштабирования или объяснениях, о которых уже сообщалось, что является обычным явлением. появление в области биологического масштабирования (Glazier, 2018c).

Авторские взносы

Автор подтверждает, что является единственным соавтором данной работы, и одобрил ее к публикации.

Финансирование

Эта работа финансировалась Колледжем Джуниата.

Конфликт интересов

Автор заявляет, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Благодарности

DG благодарит рецензентов за полезные комментарии.

Список литературы

Браун, Дж. Х., Гиллули, Дж. Ф., Аллен, А. П., Сэвидж, В. М., и Уэст, Г. Б. (2004). К метаболической теории экологии. Экология 85, 1771–1789. DOI: 10.1890 / 03-9000

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Стекольщик, Д. С. (2005). За пределами «закона 3/4-степени»: изменение внутривидового и межвидового масштабирования скорости метаболизма у животных. Biol. Ред. . 80, 611–662. DOI: 10.1017 / S1464793105006834

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Стекольщик, Д.С. (2008). Влияние уровня метаболизма на масштабирование скорости обмена веществ у птиц и млекопитающих. Proc. R. Soc. B Biol. Sci . 275, 1405–1410. DOI: 10.1098 / rspb.2008.0118

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Стекольщик, Д. С. (2009a). Уровень метаболизма и масштабирование скорости дыхания и роста у одноклеточных организмов. Функц. Экол . 23, 963–968. DOI: 10.1111 / j.1365-2435.2009.01583.x

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Стекольщик, Д.С. (2009б). Онтогенетическое масштабирование массы тела в зависимости от скорости метаболизма в состоянии покоя в зависимости от уровня метаболизма и размера тела у пауков и змей. Комп. Biochem. Physiol. Мол. Интегр. Физиол . 153, 403–407. DOI: 10.1016 / j.cbpa.2009.03.020

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Стекольщик, Д. С. (2014b). Масштабирование метаболического масштабирования в физических пределах. Системы 2, 425–450. DOI: 10.3390 / systems2040425

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Стекольщик, Д.С. (2018а). «Масса кладки, масса потомства и размер кладки: масштабирование массы тела, таксономические и экологические вариации» в The Natural History of the Crustacea, Volume 5: Life Histories , под ред. Г. А. Велборна и М. Тиля (Оксфорд: Оксфордский университет Пресс, 67–95.

Google Scholar

Стекольщик, Д. С. (2018b). Эффекты непредвиденных обстоятельств по сравнению с ограничениями на масштабирование скорости метаболизма по массе тела. Вызовы 9: 4. DOI: 10.3390 / Challe

04

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Стекольщик, Д.С. (2018в). Повторное открытие и возрождение старых наблюдений и объяснений метаболического масштабирования в живых системах. Системы 6: 4. DOI: 10.3390 / systems6010004

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Hayssen, V., and Lacy, R.C. (1985). Основные скорости метаболизма у млекопитающих: таксономические различия в аллометрии BMR и массы тела. Комп. Biochem. Physiol. Физиол . 81, 741–754. DOI: 10.1016 / 0300-9629 (85)

-1

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хеммингсен, А.М. (1960). Энергетический обмен в зависимости от размера тела и поверхности дыхания и его эволюция. Rep. Steno Mem. Hosp. 9, 1–110.

Google Scholar

Хаксли, Дж. С. (1932). Проблемы относительного роста . Лондон: Метуэн.

Google Scholar

Киллен С.С., Аткинсон Д. и Глейзер Д.С. (2010). Внутривидовая шкала скорости метаболизма в зависимости от массы тела рыб зависит от образа жизни и температуры. Ecol. Lett .13, 184–193. DOI: 10.1111 / j.1461-0248.2009.01415.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Макнаб, Б.К. (2008). Анализ факторов, влияющих на уровень и масштабирование BMR млекопитающих. Комп. Biochem. Physiol. Мол. Интегр. Физиол . 151, 5–28. DOI: 10.1016 / j.cbpa.2008.05.008

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Никлас, К. Дж., И Хаммонд, С. Т. (2019). Об интерпретации нормировочной константы в уравнении масштабирования. Фронт. Ecol. Evol . 6: 212. DOI: 10.3389 / fevo.2018.00212

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Петерс, Р. Х. (1983). Экологические последствия размера тела . Кембридж: Издательство Кембриджского университета. DOI: 10.1017 / CBO9780511608551

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Филлипсон, Дж. (1981). «Биоэнергетические возможности и филогения» в журнале «Физиологическая экология: эволюционный подход к использованию ресурсов» , ред. К. Р.Таунсенд и П. Калоу (Сандерленд, Массачусетс: Sinauer Associates, 20–45.

Google Scholar

Шмидт-Нильсен, К. (1984). Масштабирование: почему так важен размер животного? Кембридж: Издательство Кембриджского университета. DOI: 10.1017 / CBO9781139167826

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сибли Р. М., Браун Дж. Х. (2007). Влияние размера тела и образа жизни на эволюцию историй жизни млекопитающих. Proc. Natl. Акад. Sci. США . 104, 17707–17712.DOI: 10.1073 / pnas.0707725104

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сокал Р. Р. и Рольф Ф. Дж. (1995). Биометрия: принципы и практика статистики в биологических исследованиях, 3-е изд. . Нью-Йорк, штат Нью-Йорк: Фриман.

Зотин А.И. (1990). Термодинамические основы биологических процессов: физиологические реакции и адаптации . Берлин: Вальтер де Грюйтер. DOI: 10.1515 / 9783110849974

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Оценка производительности и онлайн-реализация методов нормализации на основе данных, используемых в нецелевом метаболомическом анализе на основе ЖХ / МС

Xia, J., Broadhurst, D. I., Wilson, M. & Wishart, D. S. Открытие трансляционных биомаркеров в клинической метаболомике: вводное руководство. Метаболомика 9, 280–299 (2013).

CAS PubMed Google Scholar

Вайс, Р. Х. и Ким, К. Метаболомика в изучении заболеваний почек. Nat. Преподобный Нефрол. 2012. Т. 8. С. 22–33.

CAS Google Scholar

Каддура-Даук, Р.& Кришнан, К. Р. Метаболомика: глобальный биохимический подход к изучению заболеваний центральной нервной системы. Нейропсихофармакология 34, 173–186 (2009).

CAS PubMed Google Scholar

Янг, Х. и др. Обновление базы данных терапевтических целей 2016: расширенный ресурс для получения информации о клинических целевых лекарствах и целевых путях. Nucleic Acids Res. 44, D1069–1074 (2016).

CAS PubMed Google Scholar

Чжу, Ф.и другие. Обновление базы данных терапевтических целей 2012: ресурс для содействия целенаправленному открытию лекарств. Nucleic Acids Res. 40, D1128–1136 (2012).

CAS PubMed Google Scholar

Xu, J. et al. Сравнение одобренных FDA мишеней киназ с мишенями для клинических испытаний: выводы из их системных профилей и сетей взаимодействия лекарство-мишень. Biomed Res. Int. 2016, 2509385 (2016).

PubMed PubMed Central Google Scholar

Ленг, Д.и другие. Мета-анализ генетических программ между идиопатическим фиброзом легких и саркоидозом. PLoS One 8, e71059 (2013).

ADS CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Yang, Z. et al. Мета-анализ дифференциально экспрессируемых генов при остеосаркоме на основе данных об экспрессии генов. BMC Med. Genet. 15, 80 (2014).

PubMed PubMed Central Google Scholar

Милберн, М.В. и Лоутон, К. А. Применение метаболомики для диагностики инсулинорезистентности. Анну. Rev. Med. 64, 291–305 (2013).

CAS PubMed Google Scholar

Matthan, N.R. et al. Биомаркеры фосфолипидных жирных кислот в плазме крови, определяющие качество пищевых жиров и эндогенный метаболизм, позволяют прогнозировать риск ишемической болезни сердца: вложенное исследование случай-контроль в рамках наблюдательного исследования Инициативы по охране здоровья женщин. Варенье. Сердце доц. 3, e000764 (2014).

PubMed PubMed Central Google Scholar

Weckwerth, W. Метаболомика в системной биологии. Анну. Rev. Plant Biol. 54, 669–689 (2003).

CAS PubMed Google Scholar

ван ден Берг, Р. А., Хефслот, Х. К. Дж., Вестерхейс, Дж. А., Смилде, А. К. и ван дер Верф, М. Дж. Центрирование, масштабирование и преобразования: улучшение биологической информации, содержащейся в данных метаболомики.BMC Genomics 7, 142 (2006).

PubMed PubMed Central Google Scholar

Де Ливера, А. М. и др. Статистические методы обработки нежелательных вариаций в данных метаболомики. Анальный. Chem. 87. С. 3606–3615 (2015).

PubMed PubMed Central Google Scholar

Zhu, F. et al. Сгруппированные образцы видового происхождения природных лекарств и подсказки для будущих биоразведок.Proc. Natl. Акад. Sci. USA 108, 12943–12948 (2011).

ADS CAS PubMed Google Scholar

Ejigu, B.A. et al. Оценка методов нормализации, чтобы проложить путь к крупномасштабным экспериментам по профилированию метаболомики на основе ЖХ-МС. ОМИКС 17, 473–485 (2013).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Незами Ранджбар, М. Р., Чжао, Ю., Tadesse, M. G., Wang, Y. & Ressom, H. W. Модель регрессии гауссовского процесса для нормализации данных ЖХ-МС с использованием информации на уровне сканирования. Proteome Sci. 11, S13 (2013).

PubMed PubMed Central Google Scholar

Ранджбар, М. Р., Тадесс, М. Г., Ван, Ю. и Рессом, Х. У. Байесовская нормализационная модель для безметочного количественного анализа с помощью ЖХ-МС. IEEE / ACM Trans. Comput. Биол. Биоинформ. 12. С. 914–927 (2015).

CAS PubMed Google Scholar

Ранджбар, М.Р., Ди Пото, К., Ван, Ю. и Рессом, Х. В. SIMAT: инструмент анализа данных GC-SIM-MS. BMC Bioinformatics 16, 259 (2015).

PubMed Google Scholar

Бефекаду, Г. К., Тадесс, М. Г. и Рессом, Х. У. Функциональная модель смешанных эффектов на основе Байеса для анализа данных ЖХ-МС. Конф. Proc. IEEE Eng. Med. Биол. Soc. 2009, 6743–6746 (2009).

PubMed PubMed Central Google Scholar

Ранджбар, М.Р. Н., Тадесс, М. Г., Ван, Ю. и Рессом, Х. У. Нормализация данных ЖХ-МС с использованием гауссовского процесса. в 2012 г. Международный семинар IEEE по обработке и статистике геномных сигналов (Gensips) 187–190 (2012).

Коль, С. М. и др. Современные методы нормализации данных улучшают метаболомный анализ на основе ЯМР. Метаболомика 8, 146–160 (2012).

CAS PubMed Google Scholar

Варрак, Б. М.и другие. Стратегии нормализации метабономического анализа образцов мочи. J. Chromatogr. Б Аналит. Technol. Биомед. Life Sci. 877. С. 547–552 (2009).

CAS PubMed Google Scholar

Де Ливера, А. М. и др. Нормализация и интеграция данных метаболомики. Анальный. Chem. 84, 10768–10776 (2012).

CAS PubMed Google Scholar

Лин, С. М., Ду, П., Huber, W. & Kibbe, W.A. Преобразование, стабилизирующее отклонение, на основе модели для данных микрочипов Illumina. Nucleic Acids Res. 36, с11 (2008).

PubMed PubMed Central Google Scholar

Болстад, Б. М., Иризарри, Р. А., Астранд, М. и Спид, Т. П. Сравнение методов нормализации для данных массива олигонуклеотидов высокой плотности на основе дисперсии и систематической ошибки. Биоинформатика 19, 185–193 (2003).

CAS Google Scholar

Эдвардс, Д.Нелинейная нормализация и коррекция фона в одноканальных исследованиях микрочипов кДНК. Биоинформатика 19, 825–833 (2003).

CAS PubMed Google Scholar

Фукусима, А., Кусано, М., Редестиг, Х., Арита, М. и Сайто, К. Комплексные омические подходы в системной биологии растений. Curr. Opin. Chem. Биол. 13, 532–538 (2009).

CAS PubMed Google Scholar

Ся, Дж.G. & Wishart, D. S. Веб-вывод о биологических паттернах, функциях и путях на основе метаболомных данных с использованием MetaboAnalyst. Nat. Protoc. 6. С. 743–760 (2011).

CAS PubMed Google Scholar

Мак, Т. Д., Лаякис, Э. К., Гоударзи, М. и Форнас, А. Дж., Мл. Селективный парный ионно-контрастный анализ: новый алгоритм для анализа постобработанных данных метаболомики ЖХ-МС, обладающих высоким экспериментальным шумом. Анальный. Chem.87. С. 3177–3186 (2015).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Грун Д., Кестер Л. и ван Ауденаарден А. Валидация шумовых моделей для транскриптомики одиночных клеток. Nat. Методы 11. 2014. С. 637–640.

PubMed Google Scholar

Barrett, T. et al. NCBI GEO: архив наборов данных функциональной геномики — обновление. Nucleic Acids Res.41, D991–995 (2013).

CAS Google Scholar

Haug, K. et al. MetaboLights — универсальный репозиторий с открытым доступом для исследований метаболомики и связанных метаданных. Nucleic Acids Res. 41, D781–786 (2013).

CAS PubMed Google Scholar

Astrand, M. Нормализация контрастности массивов олигонуклеотидов. J. Comput. Биол. 10, 95–102 (2003).

CAS PubMed Google Scholar

Уоркман, К.и другие. Новый метод нелинейной нормализации для уменьшения вариабельности экспериментов с ДНК-микрочипами. Genome Biol. 3, research0048 (2002).

Dudoit, S., Yang, Y.H., Callow, M.J. & Speed, T.P. Статистические методы идентификации дифференциально экспрессируемых генов в экспериментах с реплицированными микрочипами кДНК. Стат. Грех. 12. С. 111–139 (2002).

MathSciNet МАТЕМАТИКА Google Scholar

Ли, К. и Вонг, В.H. Модельный анализ массивов олигонуклеотидов: вычисление индекса экспрессии и обнаружение выбросов. Proc. Natl. Акад. Sci. USA 98, 31–36 (2001).

ADS CAS PubMed МАТЕМАТИКА Google Scholar

Дитерле, Ф., Росс, А., Шлоттербек, Г. и Сенн, Х. Нормализация вероятностного коэффициента как надежный метод для учета разбавления сложных биологических смесей. Применение в метабономике ¹ H ЯМР. Анальный.Chem. 78, 4281–4290 (2006).

CAS PubMed Google Scholar

Ху, К. Х. и Сюй, Г. У. Анализ метаболомики на основе масс-спектрометрии для фудомики. Trac-Trend Anal. Chem. 52, 36–46 (2013).

CAS Google Scholar

Пурохит, П. В., Рок, Д. М., Виант, М. Р. и Вудрафф, Д. Л. Модели дискриминации с использованием стабилизирующего дисперсию преобразования данных метаболомного ЯМР.ОМИКС 8, 118–130 (2004).

CAS PubMed Google Scholar

Eriksson, L. et al. Использование хемометрии для навигации в больших наборах данных геномики, протеомики и метабономики (gpm). Анальный. Биоанал. Chem. 380, 419–429 (2004).

CAS PubMed Google Scholar

Бродский, Л., Муссаев, А., Шахаф, Н., Ахарони, А. и Рогачев, И. Оценка качества выделения пиков в данных метаболомики ЖХ-МС.Анальный. Chem. 82, 9177–9187 (2010).

CAS PubMed Google Scholar

Смилде, А. К., ван дер Верф, М. Дж., Бийлсма, С., ван дер Верфф-ван дер Ват, Б. Дж. И Джеллема, Р. Х. Слияние данных метаболомики на основе масс-спектрометрии. Анальный. Chem. 77, 6729–6736 (2005).

CAS PubMed Google Scholar

Huber, W., von Heydebreck, A., Sultmann, H., Poustka, A.И Вингрон, М. Стабилизация дисперсии применяется к калибровке данных микрочипа и количественной оценке дифференциального выражения. Биоинформатика 18 Приложение 1, S96–104 (2002).

Google Scholar

Карп Н.А. и др. Решение вопросов точности и прецизионности количественного анализа iTRAQ. Мол. Cell Proteomics 9, 1885–1897 (2010).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Кеун, Х.C. et al. Улучшенный анализ многомерных данных с помощью шкалы переменной стабильности: приложение к метаболическому профилированию на основе ЯМР. Анальный. Чим. Acta 490, 265–276 (2003).

CAS Google Scholar

Теодоридис, Г., Гика, Х. Г. и Уилсон, И. Д. Методология глобального профилирования метаболитов в метабономике / метаболомике, основанная на ЖХ-МС. Trac-Trend Anal. Chem. 27, 251–260 (2008).

CAS Google Scholar

Суд, м.и другие. Metabolomics Workbench: международный репозиторий метаболомических данных и метаданных, стандартов метаболитов, протоколов, учебных пособий и инструментов для обучения, а также инструментов анализа. Nucleic Acids Res. 44, D463–470 (2016).

CAS PubMed Google Scholar

Franceschi, P. et al. Metadb — рабочий процесс обработки данных в нецелевых экспериментах по метаболомике на основе MS. Фронт. Bioeng. Biotechnol. 2, 72 (2014).

PubMed PubMed Central Google Scholar

Бисвас, А.и другие. MetDAT: модульный бесплатный онлайн-конвейер на основе рабочих процессов для обработки, анализа и интерпретации данных масс-спектрометрии. Биоинформатика 26, 2639–2640 (2010).

CAS PubMed Google Scholar

Hughes, G. et al. MSPrep — обобщение, нормализация и диагностика для обработки метаболомных данных на основе масс-спектрометрии. Биоинформатика 30, 133–134 (2014).

CAS PubMed Google Scholar

Джакомони, Ф.и другие. Workflow4Metabolomics: совместная исследовательская инфраструктура для вычислительной метаболомики. Биоинформатика 31, 1493–1495 (2015).

CAS PubMed Google Scholar

Gowda, H. et al. Интерактивный XCMS Online: упрощение расширенной обработки метаболомных данных и последующего статистического анализа. Анальный. Chem. 86, 6931–6939 (2014).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Чаваде, А., Александерссон, Э. и Левандер, Ф. Normalyzer: инструмент для быстрой оценки методов нормализации наборов данных omics. J. Proteome Res. 13, 3114–3120 (2014).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Mathe, E. A. et al. Неинвазивное метаболомическое профилирование мочи позволяет выявлять диагностические и прогностические факторы рака легких. Cancer Res. 74, 3259–3270 (2014).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Рессом, Х.W. et al. Использование метаболомики для определения сывороточных биомаркеров гепатоцеллюлярной карциномы у пациентов с циррозом печени. Анальный. Чим. Acta. 743, 90–100 (2012).

CAS PubMed Google Scholar

Либбрехт, М. В. и Нобл, В. С. Приложения машинного обучения в генетике и геномике. Nat. Преподобный Жене. 16. С. 321–332 (2015).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Мозли, Х.N. Анализ и распространение ошибок в анализе данных метаболомики. Comput. Struct. Biotechnol. J. 4, e201301006 (2013).

PubMed PubMed Central Google Scholar

van der Kloet, F. M., Bobeldijk, I., Verheij, E. R. & Jellema, R.H. Снижение аналитических ошибок с использованием калибровки по одной точке для точного и точного метаболомного фенотипирования. J. Proteome Res. 8, 5132–5141 (2009).

CAS PubMed Google Scholar

Ся, Дж., Psychogios, N., Young, N. & Wishart, D. S. MetaboAnalyst: веб-сервер для анализа и интерпретации метаболомных данных. Nucleic Acids Res. 37, W652–660 (2009).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Di Guida, R. et al. Ненаправленные методы обработки метаболомных данных УВЭЖХ-МС: сравнительное исследование нормализации, вменения пропущенных значений, преобразования и масштабирования. Метаболомика 12, 93 (2016).

PubMed PubMed Central Google Scholar

Dunn, W. B. et al. Процедуры крупномасштабного метаболического профилирования сыворотки и плазмы с использованием газовой хроматографии и жидкостной хроматографии в сочетании с масс-спектрометрией. Nat. Protoc. 6. С. 1060–1083 (2011).

CAS PubMed Google Scholar

Смит, К. А., Вант, Э. Дж., О’Майл, Г., Абагян, Р., Сюздак, Г.XCMS: обработка данных масс-спектрометрии для профилирования метаболитов с использованием нелинейного выравнивания, сопоставления и идентификации пиков. Анальный. Chem. 78, 779–787 (2006).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Weber, C.M. et al. Оценка матрицы газовых датчиков и распознавание образов для идентификации рака мочевого пузыря по свободному пространству мочи. Аналитик 136, 359–364 (2011).

ADS CAS PubMed Google Scholar

Struck, W.и другие. Жидкостная хроматография тандемное масс-спектрометрическое исследование нуклеозидов в моче как потенциальных маркеров рака. J. Chromatogr. А 1283, 122–131 (2013).

CAS PubMed Google Scholar

Shi, X. et al. Метаболомический анализ эффектов полихлорированных бифенилов при неалкогольной жировой болезни печени. J. Proteome Res. 11. С. 3805–3815 (2012).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Бораки, П., Биганзоли, Э. и Марубини, Э. Совместное моделирование причинно-зависимых функций риска с кубическими шлицами: приложение к большой группе пациентов с раком молочной железы. Comput. Стат. Данные An. 42, 243–262 (2003).

MathSciNet МАТЕМАТИКА Google Scholar

Баллман, К. В., Гриль, Д. Э., Оберг, А. Л. и Терно, Т. М. Более быстрый циклический лёсс: нормализация массивов РНК с помощью линейных моделей. Биоинформатика 20, 2778–2786 (2004).

CAS PubMed Google Scholar

Дуань, З.и другие. МикроРНК-199a-3p подавляется при остеосаркоме человека и регулирует пролиферацию и миграцию клеток. Мол. Рак Тер. 10, 1337–1345 (2011).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Yuan, Y. et al. Метаболомический анализ банана во время послеуборочного старения с помощью ЯМР высокого разрешения ¹ H. Food Chem. 218, 406–412 (2017).

CAS PubMed Google Scholar

Backshall, A., Шарма, Р., Кларк, С. Дж. И Кеун, Х. С. Фармакометабономическое профилирование как прогностический фактор токсичности у пациентов с неоперабельным колоректальным раком, получавших капецитабин. Clin. Cancer Res. 17, 3019–3028 (2011).

CAS PubMed Google Scholar

Sreekumar, A. et al. Метаболомные профили определяют потенциальную роль саркозина в прогрессировании рака простаты. Nature 457, 910–914 (2009).

ADS CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Джейкоб, К.К., Дервилли-Пинель, Г., Бьянкотто, Г. и Ле Бизек, Б. Оценка удельного веса как стратегия нормализации для анализа метаболома мочи крупного рогатого скота. Метаболомика 10, 627–637 (2014).

CAS Google Scholar

Chen, Y. et al. Комбинация калибровки объема инъекции по креатинину и нормализации сигналов МС для преодоления вариабельности мочи в исследованиях метаболомики на основе ЖХ-МС. Анальный. Chem. 85, 7659–7665 (2013).

CAS PubMed Google Scholar

Чу, Т.М., Вейр, Б. С. и Вольфингер, Р. Д. Сравнение моделей Ли-Вонга и логлинейных смешанных моделей для статистического анализа массивов олигонуклеотидов. Биоинформатика 20, 500–506 (2004).

CAS PubMed Google Scholar

Yan, Z. & Yan, R. Специальное снижение чувствительности улучшает распознавание образов и восстановление информации с более высокой толерантностью к различной концентрации образцов для целевой метаболомики мочи. J. Chromatogr.А 1443, 101–110 (2016).

CAS PubMed Google Scholar

Янг, Дж., Чжао, X., Лу, X., Лин, X. и Сюй, Г. Стратегия предварительной обработки данных для метаболомики для уменьшения эффекта маски при анализе данных. Фронт. Мол. Biosci. 2, 4 (2015).

PubMed PubMed Central Google Scholar

Leichtle, A. B. et al. Аминокислотные профили сыворотки и их изменения при колоректальном раке.Метаболомика 8, 643–653 (2012).

CAS PubMed Google Scholar

Slupsky, C.M. et al. Анализ метаболитов мочи дает возможность ранней диагностики рака яичников и груди. Clin. Cancer Res. 16. С. 5835–5841 (2010).

CAS PubMed Google Scholar

Logsdon, C.D. et al. Молекулярное профилирование аденокарциномы поджелудочной железы и хронического панкреатита позволяет выявить несколько генов, дифференцированно регулируемых при раке поджелудочной железы.Cancer Res. 63, 2649–2657 (2003).

CAS PubMed Google Scholar

Zhang, S. et al. Взаимозависимость обработки сигналов и анализа мочи ¹ H ЯМР-спектры для метаболического профилирования. Анальный. Chem. 81, 6080–6088 (2009).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Kultima, K. et al. Разработка и оценка методов нормализации для безметки относительного количественного определения эндогенных пептидов.Мол. Cell Proteomics 8, 2285–2295 (2009).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Ибарра Р. и др. Метаболомический анализ ткани печени на кроличьей модели вторичных опухолей VX2. HPB Surg. 2014, 310372 (2014).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Giskeodegard, G. F. et al. Многомерное моделирование и прогнозирование факторов прогноза рака молочной железы с использованием метаболомики МРТ.J. Proteome Res. 9. С. 972–979 (2010).

CAS PubMed Google Scholar

Баллабио Д. и Консонни В. Инструменты классификации в химии. Часть 1: линейные модели. PLS-DA. Анальный. Методы 5. 2013. С. 3790–3798.

CAS Google Scholar

Thévenot, EA, Roux, A., Xu, Y., Ezan, E. & Junot, C. Анализ вариаций метаболома мочи взрослого человека в зависимости от возраста, индекса массы тела и пола путем реализации комплексного рабочего процесса для одномерный и OPLS статистический анализ.J. Proteome Res. 14. С. 3322–3335 (2015).

PubMed Google Scholar

Wu, W., Xing, E. P., Myers, C., Mian, I. S. & Bissell, M. J. Оценка методов нормализации данных микрочипов кДНК по классификации k-NN. BMC Bioinformatics 6, 191 (2005).

PubMed PubMed Central Google Scholar

Брахим, А., Рамирес, Дж., Горриз, Дж. М., Кхедер, Л.И Салас-Гонсалес, Д. Сравнение различных методов нормализации интенсивности в визуализации I-Ioflupane ¹²³ для автоматического обнаружения паркинсонизма. PLoS One 10, (2015).

Синг Т., Сандер О., Беренвинкель Н. и Ленгауэр Т. ROCR: визуализация производительности классификатора в R. Bioinformatics 21, 3940–3941 (2005).

CAS PubMed Google Scholar

Zheng, G. et al. Изучение механизма ингибирования одобренных селективных ингибиторов обратного захвата норэпинефрина и энантиомеров ребоксетина с помощью исследования молекулярной динамики.Sci. Реп.6, 26883 (2016).

ADS CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Xue, W. et al. Идентификация механизма ингибирования одобренных FDA селективных ингибиторов обратного захвата серотонина: выводы из исследования моделирования молекулярной динамики. Phys. Chem. Chem. Phys. 18, 3260–71 (2016).

CAS PubMed Google Scholar

Ким, Дж.и другие. Соматические мутации ERCC2 связаны с отчетливой геномной подписью уротелиальных опухолей. Nat. Genet. 48. С. 600–606 (2016).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Типпманн, С. Инструменты программирования: приключения с R. Nature 517, 109–110 (2015).

ADS CAS PubMed Google Scholar

Fukushima, A. DiffCorr: пакет R для анализа и визуализации дифференциальных корреляций в биологических сетях.Gene 518, 209–214 (2013).

CAS PubMed Google Scholar

Huber, W. et al. Организация высокопроизводительного геномного анализа с помощью Bioconductor. Nat. Методы 12. 2015. С. 115–121.

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Franceschi, P., Masuero, D., Vrhovsek, U., Mattivi, F. & Wehrens, R. Набор эталонных всплесков данных для идентификации биомаркеров в метаболомике.J. Chemom. 26, 16–24 (2012).

CAS Google Scholar

Hochrein, J. et al. Нормализация данных наборов данных фингерпринта метаболитов ¹ H ЯМР в присутствии несбалансированной регуляции метаболитов. J. Proteome Res. 14. С. 3217–3228 (2015).

CAS PubMed Google Scholar

Валикангас, Т., Суоми, Т. и Эло, Л. Л. Систематическая оценка методов нормализации в количественной протеомике без меток.Краткий. Биоинформ. bbw095 (2016).

Ся, Дж., Синельников, И. В., Хан, Б. и Уишарт, Д. С. MetaboAnalyst 3.0 — делает метаболомику более значимой. Nucleic Acids Res. 43, W251–257 (2015).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

ВЫБОР «Норма», нормализация обмена веществ, 30 капсул по 400 мг, купить в Киеве, Львове

.

ВЫБОР «Норма», нормализация обмена веществ, 30 капсул по 400 мг

«Норма» — это фитокомплекс, улучшающий жировой, белковый и углеводный обмен, а также метаболизм глюкозы, позволяющий организму более эффективно использовать инсулин.Балансирует количество необходимых компонентов в организме на должном уровне, адсорбирует и выводит из организма лишний холестерин, а также другие вредные вещества, восполняет недостаток полезных веществ.

Без правильного обмена веществ организм не сможет нормально функционировать. Неблагоприятная экологическая обстановка, неправильное питание, нарушение режима, хронические стрессы и др. Являются причинами нарушения обмена веществ, в результате чего страдают все системы организма.

Также нарушения обмена веществ приводят к накоплению вредных веществ и продуктов организма, которые могут вызвать серьезные заболевания организма, такие как диабет, ожирение, инфаркт, онкологические и другие заболевания.

Компоненты и их свойства.

Для здорового и стабильного функционирования организма необходимо, чтобы необходимое количество биологически активных веществ поступало в организм во время выздоровления, независимо от способа выздоровления. В фитокомплексе «Норма» источником питания для организма являются прозеры (проросшие зерна овса, пшеницы и кукурузы). В сбалансированном виде прозеры содержат практически все физиологически активные вещества, которые необходимы для стабильного функционирования человеческого организма: белки, содержащие незаменимые аминокислоты; легкоусвояемые углеводы; макро-, микроэлементы K, Ca, Mg, Fe, Cu, Zn, P и др.; витамины A, C, E, группы B, PP, H, D; фитогормоны; растительные ферменты; растительные волокна; полифенольные вещества и др. Просперы усиливают действие всех компонентов, создавая синергетический эффект.

Артишок (трава) — увеличивает секрецию желчи, регулирует работу щитовидной железы, стимулирует липидный обмен и обмен холестерина в крови, усиливает диурез.

Мята перечная (трава) — способствует нормализации кровообращения в сердечной мышце; увеличивает капиллярное кровообращение в тканях; увеличивает секрецию желез пищеварительной системы; нормализует перистальтику кишечника.

Стевия (трава) — уравновешивает давление; нормализует функции желчного пузыря и печени; улучшает работу щитовидной железы; уравновешивает давление; нормализует уровень сахара в крови и эффективен при нарушении обмена веществ, сахарном диабете, атеросклерозе.

Брусника (листья) — снижает уровень сахара в крови; является дезинфицирующим, бактерицидным, мочегонным и желчегонным средством.

Чай зеленый (листья) — улучшает водно-солевой и кислородный обмен; снижает уровень холестерина в крови; на начальных стадиях гипертонической болезни эффективно балансирует артериальное давление и кровотечение.

Пажитник (семена) — улучшает липидный состав крови; снижает уровень холестерина в крови; приводит к нормальному углеводному обмену.

Витамин С — положительно влияет на жировой, углеводный и белковый обмен.

Витамин B1 — нормализует работу нервной системы; принимает участие в процессах энергетического и углеводного обмена; как и все витамины группы B, отвечает за выработку энергии путем извлечения топлива из жиров, белков и углеводов, содержащихся в пище.

Витамин В2 — участвует в регуляции окислительно-восстановительных процессов углеводного, белкового и жирового обмена.

Витамин B6 — влияет на работу пищеварительного тракта; принимает участие в процессе метаболизма жиров и белков в организме; имеет прямое отношение к здоровью гормональной системы у женщин; неразрывно связано с укреплением иммунитета.

Витамин А — улучшает метаболизм глюкозы, поэтому организм более эффективно использует инсулин, поэтому этот гормон лучше доставляет сахар из крови в клетки.

Биотин (витамин H) — помогает сбалансировать уровень сахара в крови; участвует в метаболизме жирных кислот, поскольку является составной частью ферментов; гарантирует сохранение здоровья кожи и волос; положительно влияет на работу пищеварительного тракта и нервной системы.

Таурин (аминокислота) — участвует в процессе восстановления жирового обмена; контролирует работу клеточных мембран; таурин участвует в выработке в печени ферментов, ответственных за расщепление холестерина; при наличии таурина жиры лучше усваиваются организмом.

Хром (минерал) — оказывает сильное терапевтическое действие на ряд нарушений здоровья, в том числе: ожирение, гипертонию, нестабильный уровень сахара в крови, язвы, инсульт и др. Участвует в регуляции кроветворения, в процессах углеводного обмена; нормализует уровень холестерина в крови; регулирует всасывание глюкозы. Увеличивает общую костно-мышечную массу тела, что ускоряет обменные процессы и сжигает лишний жир; во время упражнений помогает сжигать калории, что значительно способствует «сбрасыванию» веса.

Способ применения: взрослым по 1 капсуле 2 раза в день, детям от 7 до 12 лет по 1 капсуле в день до еды, запивая водой. Курс приема 30-45 дней. Второй курс — после двухнедельного перерыва.

Противопоказания: индивидуальная непереносимость компонентов.

Срок годности — 24 месяца.

Нормализация метаболизма глюкозы эксендином-4 в хронической фазе после инсульта способствует функциональному восстановлению при диабете

Предпосылки

Активация рецептора глюкагоноподобного пептида-1 (GLP-1R) может снизить риск инсульта у людей с диабетом 2 типа ( T2D).Более того, исследования на животных показали эффективность агонистов GLP-1R в борьбе с острым повреждением головного мозга, вызванным инсультом. Однако еще предстоит определить, может ли активация GLP-1R улучшить восстановление после инсульта в постострой хронической фазе после инсульта. Мы исследовали, улучшает ли постинсультное восстановление после инсульта хроническое введение агониста GLP-1R эксендина-4, и изучили возможные основные механизмы у мышей T2D и не-T2D.

Методы

Мы индуцировали инсульт через преходящую окклюзию средней мозговой артерии (tMCAO) у мышей T2D / ожирения (8 месяцев диеты с высоким содержанием жиров) и контрольной группы того же возраста.Эксендин-4 вводили ежедневно в течение 8 недель, начиная с 3 дня после tMCAO. Мы оценивали функциональное восстановление с помощью еженедельных тестов силы захвата верхних конечностей, в то время как чувствительность к инсулину и гликемию оценивали через 4 и 8 недель после tMCAO. С помощью иммуногистохимии исследовали гибель нейронных клеток, нейрогенез, вызванный инсультом, нейровоспаление, потенциальную атрофию ГАМКергических, парвальбумин + интернейронов, постинсультное ремоделирование сосудов и образование фиброзных рубцов.

Результаты

Эксендин-4 полностью нормализовал вызванное СД2 нарушение восстановления силы захвата передней лапы.Выздоровление коррелировало с нормализацией гликемии и чувствительности к инсулину. Мы также показываем, что эксендин-4 противодействовал индуцированной T2D атрофии парвальбумин + интернейронов и уменьшал активацию микроглии. Кроме того, эксендин-4 нормализовал плотность и покрытие микрососудов перицитами и восстанавливал образование фиброзных рубцов у мышей T2D. У мышей без T2D эффект восстановления от эксендина-4 был незначительным.

Заключение

Это исследование демонстрирует, что постострая хроническая активация GLP-1R опосредует неврологическое восстановление после инсульта у мышей T2D, вероятно, за счет нормализации метаболизма глюкозы и механизмов нейропластичности, а также улучшения ремоделирования сосудов в фазе восстановления.Полученные результаты способствуют запуску клинических испытаний, изучающих, улучшают ли агонисты GLP-1R эффективность реабилитации после инсульта у людей с СД2.

Ключевые слова

T2D, Инсульт, Неврологическое восстановление, Парвальбумин, ремоделирование сосудов, фиброзный рубец, ингибиторы DPP-4, сульфонилмочевины

Нормализация мочи при изменении объема внутрисосудистой жидкости и нарушениях обмена веществ — Эксперты @ Миннесота

@article {9c31f19a345e43e88c7fac7b07593381,

title = «Метаболомика мочи при геморрагическом шоке: нормализация мочи при изменении объема внутрисосудистой жидкости и нарушениях метаболизма»,

abstract = «Есть много способов нормализации метаболизма. для учета изменений в разбавлении, все из которых были тщательно изучены в модельных системах.Здесь данные метаболомики мочи были исследованы в соответствующих физиологических условиях, полученных на модели геморрагического шока и реанимации у свиней. Это включает в себя сильно изменчивый объем внутрисосудистой жидкости и диурез в сочетании с большими отклонениями в количестве эндогенных метаболитов. Были оценены семь различных методов нормализации и необработанные данные для определения подходящего метода нормализации в этих условиях, включая методы спектральной постобработки и физиологические измерения концентрации.Были изучены отношения между константами нормализации для каждого образца мочи, а также отношения между концентрациями креатинина в моче и сыворотке. Анализ основных компонентов был использован для изучения кластеризации данных метаболомики. Набор констант нормализации, связанных с каждым образцом, отражал концентрацию мочи с тенденцией к снижению концентрации во время поздних моментов реанимации. Креатинин в моче, нормализованный к диурезу, больше всего отражал уровень креатинина в сыворотке.Анализ основных компонентов показал, что образцы мочи сгруппированы в соответствии с экспериментальным моментом времени для всех исследованных методов нормализации. В необработанных данных наблюдалось небольшое разделение. Данные, нормализованные по диурезу, выделяются среди шести других изученных методов нормализации, поскольку они отражают почечный клиренс и должны использоваться при сравнении данных метаболомики мочи и сыворотки. «,

keywords =» Креатинин, геморрагический шок, метаболизм, ЯМР, нормализация , Моча «,

author =» Lusczek, {Элизабет Р.} и Тереза ​​Нельсон, Даниэль Лексен и Витовски, {Нэнси Э.} и Мюльер, {Кристина Э.} и Грег Бейлман «,

год =» 2011 «,

doi =» 10.4172 / 1948-593X.1000041 «,

language = «Английский (США)»,

volume = «3»,

pages = «38-48»,

journal = «Журнал биоанализа и биомедицины»,

issn = «1948-593X «,

publisher =» OMICS Publishing Group «,

number =» 2 «,

}

Покрытие Cell-Tak может вызвать неправильную нормализацию данных метаболического потока морского конька

Abstract

Исследования метаболического потока клеток и образцы тканей — быстро развивающийся инструмент в различных областях исследований.Надежные методы нормализации данных имеют решающее значение для адекватной интерпретации результатов и предотвращения неправильной интерпретации экспериментов и неправильных выводов. Наиболее распространенные методы нормализации данных о метаболическом потоке — это количество клеток, ДНК и белок. На нормализацию данных может влиять множество факторов, таких как плотность, здоровое состояние, эффективность приверженности или пропорциональный посев клеток.

Клей Cell-Tak, полученный из мидий, часто используется для иммобилизации плохо прилипающих клеток.Здесь мы демонстрируем, что это покрытие может сильно повлиять на флуоресцентное обнаружение ДНК, что приведет к неправильной и сильно изменчивой нормализации данных метаболического потока. На белковые анализы это влияет гораздо меньше, а подсчет клеток может практически полностью устранить эффект покрытия. Покрытие Cell-Tak также влияет на форму клеток в зависимости от клеточной линии и может изменять клеточный метаболизм.

На основании этих наблюдений мы рекомендуем подсчет клеток в качестве золотого стандарта метода нормализации для измерения метаболического потока морских коньков с содержанием белка в качестве разумной альтернативы.

Введение

Измерение клеточного метаболизма — широко используемый исследовательский подход в различных дисциплинах. Любые вмешательства, которые приводят к изменению физиологического функционирования клеток, например мутации, химическая обработка, условия окружающей среды и другие факторы могут влиять на клеточный метаболизм. Технология измерения внеклеточного потока (XF), разработанная Seahorse (Agilent), представляет собой элегантный метод измерения потребления кислорода и скорости внеклеточного подкисления в относительно небольших количествах живого биологического материала.Ранее мы использовали анализатор Seahorse для изучения влияния липофильных катионов на метаболизм митохондрий [1], ингибирующего действия липофильного положительно заряженного фрагмента метилтрифенилфосфония (TPMP) на 2-оксоглутаратдегидрогеназу [2] и влияние Cu (II) — комплексы фенантролина на клеточный метаболизм [3] и в других исследованиях.

Данные XF обычно требуют нормализации из-за различного количества клеток в каждой тестируемой лунке — это требование больше всего необходимо для образцов ex vivo или когда разные клеточные линии используются в одном эксперименте или для сравнения экспериментов в разное время.Доступен ряд стратегий нормализации для метаболических анализов XF, таких как нормализация к общему клеточному белку [4], к ядерной ДНК [5], к количеству клеток, рассчитанному с помощью анализа изображений под микроскопом [6,7], или к количеству ядер клеток с использованием флуоресцентная микроскопия [8].

Во время измерений, которые включают некоторое перемешивание жидкости и перемешивание, некоторые клетки имеют тенденцию отделяться от поверхности лунок микропланшета, что может привести к непригодным для использования данным измерения. Таким образом, поверхность обычно покрывают веществами, улучшающими адгезию к пластику [9].Клетки предпочитают прилипать к гидрофильным поверхностям или поверхностям, которые содержат функциональные группы –NH ₂ / –COOH [10,11].

Cell-Tak является одним из широко используемых материалов для покрытий с высокой адгезией. Его основными компонентами являются полифенольные белки, извлеченные из морской мидии Mytilus edulis , которая обладает замечательной способностью прилипать к подводным поверхностям [12–14]. Наблюдения показали, что эти белки, богатые лизином, гидроксилированными аминокислотами и 3,4-дигидроксифенилаланином, обладают сильными адгезионными свойствами in vitro и способствуют биссальной адгезии [12,15].Множественные полифенольные белки были экстрагированы из M. edulis и использованы в качестве основы Cell-Tak [12,13]. Cell-Tak использовался для прикрепления клеток к предметным стеклам микроскопа, чтобы стабилизировать их для наблюдения [16].

Некоторые из наших предыдущих экспериментов с использованием Cell-Tak для увеличения клеточной адгезии показали противоречивые результаты измерений концентраций ДНК, используемых для нормализации данных XF. Мы исследовали возможные источники этого несоответствия, и в этом исследовании мы обсуждаем возможные ошибки нормализации данных XF из-за покрытия Cell-Tak.Чтобы исключить факторы, влияющие на измерения, такие как клеточный дебрис, белок или содержание буфера для лизиса, мы начали с ДНК и стандартов белка с известной концентрацией на покрытых и непокрытых поверхностях, а затем последовали две разные клеточные линии. Эксперименты проводили на стандартных пластиковых 96-луночных планшетах с четырьмя протоколами нанесения покрытия и на планшете XF Seahorse с двумя протоколами нанесения покрытия. Наконец, мы нормализовали полученные данные метаболического потока на основе измеренной флуоресценции ДНК, оптической плотности белка и количества клеток, подсчитанных с помощью микроскопа.Наши результаты указывают на явное влияние используемого типа покрытия на нормализованные данные, что может привести к неверной интерпретации данных.

Материалы и методы

Линии клеток, культуры и стандарты

Иммортализованные линии клеток млекопитающих HepG2 (линия клеток печени человека) и C2C12 (линия клеток миобластов мыши) были любезно предоставлены доктором Жюльеном Прудентом (MRC Mitochondrial Biology Unit, MRC Mitochondrial Biology Unit, Кембридж, Великобритания) и выращены в среде Игла, модифицированной Дульбекко (Life Technologies, каталожный номер 31885023) с добавлением 10% FBS (Life Technologies, кат.п. A3160402) и 1% пенициллин / стрептомицин (Sigma-Aldrich, каталожный номер P4333) при 37 ° C в 5% CO ₂ . Клетки собирали с использованием трипсина / ЭДТА (Life Technologies, каталожный номер 15400054) и центрифугировали при 150 × g в течение 5 минут. Гранулы ресуспендировали в полной среде Seahorse XF DMEM, pH 7,4 или в DMEM без фенолового красного (Life Technologies, каталожный номер A1443001), и клетки подсчитывали под инвертированным микроскопом Motic / микроскопом AE20 с использованием счетной камеры Bürker.

В качестве стандарта ДНК лямбда-ДНК в TE из набора для анализа дцДНК Quant-iT ^™ PicoGreen ^® (ThermoFisher Scientific, кат.п. P11496). Бычий сывороточный альбумин (Sigma-Aldrich, каталожный номер P0914-10AMP) использовали в качестве стандарта белка.

Различные методы лечения и анализы сведены в Таблицу 1 и описаны ниже. Первую серию экспериментов проводили на 96-луночном планшете со стандартом ДНК или белка с четырьмя протоколами покрытия планшета с последующими аналогичными экспериментальными настройками, но с двумя линиями клеток. После посева и прикрепления клетки лизировали и анализировали их ДНК или содержание белка.

Таблица 1.Резюме экспериментальных протоколов.

Во втором типе экспериментов клетки высевали на планшеты XFp Seahorse с двумя типами покрытия. После измерения последовательности XF клетки подсчитывали и использовали для определения содержания ДНК или подсчитывали и использовали для анализа содержания белка.

Посев стандартов и посев клеток

Для первой серии экспериментов мы использовали 96-луночные микропланшеты Nunc ^™ MicroWell ^™ (ThermoFisher Scientific, каталожный номер 269620) с крышками для микропланшетов Nunc ^™ ( ThermoFisher Scientific, кат.п. 263339). На эти планшеты наносили четыре различных варианта покрывающих растворов: 1) dH ₂ O в качестве контроля, 2) 0,1 M NaHCO ₃ в качестве другого контроля, 3) Cell-Tak — Corning ^® Cell-Tak ^™ Клеточный и тканевый адгезив (Corning, каталожный номер 354240) (3,5 мкг / см ² ), разведенный в dH ₂ O, и 4) Cell-Tak (3,5 мкг / см ² ), разведенный в 0,1 М NaHCO ₃ .

Стандарты

ДНК и BSA разбавляли в dH ₂ O и добавляли в лунки в концентрациях 250 нг / мл и 500 нг / мл для ДНК и 50 мкг / мл и 100 мкг / мл для BSA в объемах, указанных в таблице 1. .Клетки в DMEM без фенолового красного добавляли в планшеты в двух количествах: 10 000 и 20 000 на лунку. Планшеты со стандартами центрифугировали при 2200 x g в течение 30 минут и затем недолго встряхивали перед добавлением реагентов для анализа ДНК / белков (см. Ниже). Лунки только с dH ₂ O использовали в качестве бланка для стандартного анализа, а лунки со средой служили только в качестве бланка для анализа клеток. Все эксперименты ставили трижды и повторяли трижды.

Вторую серию экспериментов проводили на микропланшетах для культивирования клеток Seahorse XF (Agilent, кат.п. 103022-100) с восемью колодцами. Клетки высевали на эти планшеты, как описано выше, но на эти планшеты наносили только два варианта покрывающих растворов: четыре лунки были покрыты dH ₂ O в качестве контроля без покрытия, а остальные четыре были покрыты Cell-Tak ( 3,5 мкг / см ² ), разведенный в 0,1 М NaHCO ₃ в соответствии с инструкциями производителя. Клетки высевали по 6000 на лунку в среду Seahorse XF DMEM, pH 7,4 (Agilent, каталожный номер 103575-100). Только среду для анализа использовали в качестве бланка в одной лунке, покрытой dH ₂ O, и одной лунке с Cell-Tak.

Оба типа пластин, использованных в данном исследовании, изготовлены из гидрофобного необработанного полистирола с плоским дном. Все эксперименты проводились трижды в отдельные дни.

Измерения XF

Сразу после посева клеткам давали отстояться в течение 20 минут на столе для обеспечения равномерного распределения, а затем переносили на 40 минут в инкубатор при 37 ° C / 5% CO2. По истечении этого времени в каждую лунку добавляли предварительно нагретую при 37 ° C среду для анализа Seahorse XF DMEM, pH 7,4 до конечного объема 180 мкл / лунку.В среду добавляли 5,55 мМ глюкозы, 1 мМ пирувата натрия (Sigma-Aldrich, каталожный номер S8636) и 4 мМ L-глутамина (Sigma-Aldrich, каталожный номер G7513). Перед анализом планшеты помещали в инкубатор без CO2 при 37 ° C (согласно инструкциям производителя). Клеточное митохондриальное дыхание (OCR — скорость потребления кислорода) определяли с помощью анализатора XFp (Agilent Technologies, Калифорния, США). Анализ митохондриального стресса проводили с последовательными инъекциями 20 мкл / каждого из реагентов (конечная концентрация): олигомицин (1 мкМ), карбонилцианид-4- (трифторметокси) фенилгидразон (FCCP) (1 мкМ — HepG2; 2 мкМ — C2C12), и антимицин А / ротенон (по 1 мкМ каждый).В последнюю инъекцию добавляли 0,2 мкг / мл Hoechst (Life Technologies, каталожный номер 33342-Invitrogen ^™ ), используемых для подсчета клеток. Всего было проведено 12 измерений OCR — три для базального дыхания и три после каждой инъекции ингибитора.

Подсчет клеток

После эксперимента с морским коньком планшеты центрифугировали (5 минут при 150 x g) для осаждения отделившихся клеток и часть среды отсасывали из лунок (таблица 1). Затем образцы в микропланшетах для клеточных культур Seahorse XF сканировали в режиме светлого поля с помощью монохромной флуоресцентной CCD-камеры Leica DFC 350FX, установленной на порте для камеры перевернутого полностью моторизованного микроскопа Leica DMI 6000.Объектив Leica HC PL FLUOTAR 10x / 0, 30 DRY использовался для получения сканов мозаики с полями 4 × 5 с соответствующим размером пикселя 921 × 921 нм.

Затем мы использовали программное обеспечение Fiji [17] для подсчета клеток вручную. Во время подсчета клеток клетки были разделены на две группы в зависимости от их формы — круглой формы с определенными и видимыми краями и плоской — не круглой формы, без определенных краев или с выступами.

Лизис клеток

Перед анализом содержания ДНК / белка 96-луночные планшеты с клетками центрифугировали в течение 5 минут при 350 x g.Часть среды из этих планшетов отсасывалась из лунок. Аналогичные шаги были выполнены с чашками с морским коньком перед подсчетом клеток (таблица 1). Соответствующие объемы буфера для лизиса (Sigma-Aldrich, каталожный номер C3228-500ML) добавляли к обоим типам планшетов (таблица 1). Планшеты недолго встряхивали и помещали на десять минут при 37 ° C (повторяли трижды). Затем для завершения лизиса их помещали в морозильную камеру -80 ° C на ночь.

Анализы содержания ДНК и белка

Все измерения проводились в исходных планшетах со стандартами / клетками.Для определения содержания ДНК 100 мкл PicoGreen добавляли к 100 мкл стандартных ДНК / лизатов размороженных клеток. Интенсивность флуоресценции измеряли с помощью микропланшетного ридера TECAN Infinite M200Pro (Schoeller instruments) с усилением, установленным вручную на 80.

Для измерения общего содержания белка 205 мкл реагента Брэдфорда (Sigma-Aldrich, кат. № B6916) пипетировали в 50 мкл лизатов стандартных / размороженных клеток BSA. Поглощение измеряли при длине волны 595 нм с использованием считывающего устройства для микропланшетов TECAN Infinite M200Pro.

Анализ данных

Три повтора в каждом эксперименте / обработке усредняли (флуоресценция / оптическая плотность / количество клеток) и соответствующие средние значения холостого опыта (флуоресценция / оптическая плотность) вычитали из этих значений. Мы использовали лунки, «покрытые» dH ₂ O, в качестве отрицательного контроля в нашем эксперименте, и все значения, полученные для других вариантов покрытия, были нормализованы к этому отрицательному контролю, чтобы предотвратить изменение сигнала изо дня в день. Таким образом, полученные отношения флуоресценции / оптической плотности / количества клеток указывают на влияние покрытий на отсутствие покрытия (dH ₂ O).Затем эти отношения из трех независимых экспериментов были проанализированы статистически.

Анализ данных по морскому коньку был выполнен следующим образом: для каждой временной точки измерения три повтора измерений были усреднены, чтобы получить значение для каждого эксперимента. Затем были рассчитаны средние значения и стандартные отклонения по трем независимым экспериментам. Затем эти данные были нормализованы до соответствующего количества ДНК / белка / клеток в программе анализа волновых данных (Agilent) и экспортированы в Microsoft Excel.

Измеренные значения флуоресценции / поглощения / дыхания для различных экспериментальных условий, взятые из трех независимых экспериментов, сравнивали с использованием t-критерия Стьюдента, и соответствующие значения p обозначены на рисунках и в таблицах. Количество форм клеток в трех независимых экспериментах сравнивали между обработками с использованием точного критерия Фишера. Для статистического анализа мы использовали GraphPad Prism 8.

Результаты

Влияние покрытия на ДНК и белковые анализы стандартов

Первую серию экспериментов проводили в 96-луночных планшетах с четырьмя различными вариантами покрытия: 1) dH ₂ O, 2) 0.1 M NaHCO ₃ , 3) Cell-Tak, разведенный в dH ₂ O и 4) Cell-Tak, разбавленный 0,1 M NaHCO ₃ и двумя стандартами в двух концентрациях: a) ДНК (250 и 500 нг / мл) и б) БСА (50 и 100 мкг / мл).

После посева в лунки без покрытия / с покрытием (см. Методы) их анализировали с использованием PicoGreen (содержание ДНК — флуоресценция) и реагента Брэдфорда (содержание белка — поглощение) соответственно.

По сравнению с отрицательным контролем (dH ₂ O «покрытие») не было значительного изменения обнаруженной абсорбции для обеих концентраций BSA, и данные показали низкие стандартные отклонения во всех случаях (таблица 2).При использовании ДНК в качестве стандарта в лунках, покрытых NaHCO ₃ , не было измерено значительного изменения флуоресценции по сравнению с покрытием dH ₂ O, но примерно 25% снижение флуоресценции было обнаружено в лунках, покрытых Cell-Tak, разведенным в dH ₂ O и уменьшение более чем на 50% в лунках, покрытых Cell-Tak, разведенных в NaHCO ₃ (таблица 2), даже если количество ДНК было одинаковым во всех сравниваемых лунках. Эти различия достигли относительно низких значений p. В двух последних упомянутых установках большие стандартные отклонения указывают на высокую изменчивость сигнала (Таблица 2).

Таблица 2. Среднее изменение флуоресценции ДНК и поглощения белка из-за покрытий.

Эффекты покрытия на ДНК и белковые анализы на культивируемых клетках

Мы провели аналогичную серию экспериментов с четырьмя вариантами покрытия, как указано выше, и с двумя клеточными линиями: 1) HepG2 и 2) C2C12, при двух плотностях: 10000 и 20000 ячеек / лунка. После лизиса клеток, как и раньше, измеряли флуоресценцию ДНК или оптическую плотность белка.

При анализе содержания белка не было обнаружено значительных различий в клетках, растущих в лунках, покрытых NaHCO ₃ и Cell-Tak / dH ₂ O по сравнению с dH ₂ O (Таблица 2).В лунках, покрытых Cell-Tak / NaHCO ₃ , мы наблюдали снижение поглощения на 10-15% (таблица 2). При анализе на содержание ДНК мы наблюдали увеличение количества лунок с клетками HepG2 при покрытии NaHCO ₃ и Cell-Tak / dH ₂ O (приблизительно 35%) и аналогичное, но меньшее увеличение количества клеток C2C12 (6-10 %) (Таблица 2). В лунках, покрытых Cell-Tak / NaHCO ₃ , небольшое увеличение флуоресценции было обнаружено в клетках HepG2, но флуоресценция уменьшилась в клетках C2C12 (Таблица 2).

Затем мы выполнили аналогичный набор экспериментов в многолуночных планшетах, используемых для измерения метаболического потока в аппарате «Морской конек», и использовали подсчет клеток в лунках в качестве независимого метода нормализации. Наблюдалось аналогичное снижение флуоресценции ДНК для обеих клеточных линий (таблица 3) в лунках, покрытых Cell-Tak / NaHCO ₃ по сравнению с dH ₂ O (приблизительно 15%). Анализ содержания белка практически не показал различий между вариантами покрытия (таблица 3).

Таблица 3.Результаты отклонений количества ДНК / белков / клеток на чашках с морским коньком.

Влияние покрытия на нормализацию метаболического потока

Чтобы исследовать влияние покрытия в предполагаемом контексте измерения метаболического потока, мы использовали стандартную методологию митохондриального стресс-теста, состоящую из измерений базального клеточного дыхания с последующими измерениями после последовательного добавления Ингибитор АТФ-синтазы олигомицин, разобщитель FCCP и комбинация ингибиторов митохондриального комплекса I и III ротенона и антимицина A.Перед экспериментами подходящую концентрацию FCCP для использования устанавливали титрованием для обеих клеточных линий. В этих экспериментах сравнивали только два типа покрытия: без покрытия (dH ₂ O) или обычно используемое покрытие Cell-Tak / NaHCO ₃ .

Мы сравнили три стратегии нормализации (количество клеток, содержание ДНК или содержание белка). Когда результаты измерения морского конька были нормализованы по количеству клеток, практически не было различий между планшетами, покрытыми dH ₂ O и Cell-Tak / NaHCO ₃ .Напротив, нормализация содержания ДНК показала видимое несоответствие между покрытиями. Когда мы нормализовали данные OCR по содержанию белка, были обнаружены очень небольшие различия между покрытиями в обеих клеточных линиях, несколько больше в клетках C2C12 (рис. 1).

Рис. 1. Нормализованные скорости потребления кислорода в клеточных линиях C2C12 и HepG2 различаются из-за покрытий.

A Данные нормализованы по количеству клеток и содержанию ДНК, а данные B нормализованы по количеству клеток и содержанию белка.Синие кривые показывают лунки без покрытия (dH ₂ O), красные кривые показывают лунки, покрытые Cell-Tak / NaHCO ₃ . Данные показаны как средние из трех независимых экспериментов +/- SEM. Звездочки указывают на достоверные различия, основанные на t-критерии Стьюдента (значение установлено на уровне p <0,05).

Влияние покрытия на форму ячеек

Во время ручного подсчета ячеек мы заметили, что ячейки проявляются в двух различных формах ячеек. Часть ячеек сохраняет круглую форму с определенными и видимыми краями, а остальные значительно более плоские, без определенных краев или с выступами, предположительно, лучше прикрепленных к пластику (рис. 2).

Рис. 2. Варианты формы клеток, выявленные при ручном подсчете клеток.

В обеих клеточных линиях (A: HepG2 и B: C2C12) в чашках с морским коньком были обнаружены два варианта формы клеток: круглые (1, темно-синий) и плоские (2, светло-синие).

Пропорции этих форм клеток различались в лунках с покрытием и без покрытия. В клетках без покрытия (dH ₂ O) 88% клеток HepG2 были обнаружены в круглой форме, в лунках, покрытых Cell-Tak / NaHCO ₃ , большинство клеток были плоскими (62%). Для клеток C2C12 эта разница была гораздо менее выраженной (рис. 3).

Рис. 3. Различия в форме ячеек в зависимости от типа покрытия пластин.

Доля круглых / плоских клеток в лунках без покрытия (dH ₂ O) и лунках, покрытых Cell-Tak / NaHCO ₃ . Данные представлены в виде средних значений из трех независимых экспериментов +/- стандартное отклонение.

Обсуждение

В наших предыдущих экспериментах с использованием технологии анализа внеклеточного потока Seahorse от Agilent мы не всегда получали согласованные данные, когда пытались нормализовать метаболические измерения по содержанию ДНК с помощью флуоресцентных красителей в лунках, покрытых Cell-Tak.В этой статье мы сравнили влияние покрытия Cell-Tak на анализы ДНК и белков с использованием стандартов, а также двух клеточных линий, HepG2 и C2C12. Наши результаты показывают, что покрытие Cell-Tak влияет на флуоресцентные анализы ДНК, как при использовании чистых стандартов ДНК, так и в культивируемых клетках. Лунки, покрытые Cell-Tak / NaHCO ₃ , имели значительно пониженные значения флуоресценции по сравнению с лунками без покрытия. Аналогичная картина наблюдалась в клеточных линиях, культивируемых на пластике с покрытием по сравнению с пластиком без покрытия, но эффекты оказались более специфичными для клеточной линии и, возможно, даже специфичными для типа используемого пластика, поскольку другая картина наблюдалась в планшетах для нормальных культур ткани по сравнению сТарелки морского конька. В дополнение к различиям в значениях флуоресценции мы также наблюдали гораздо более высокую вариабельность сигнала, выраженную в стандартном отклонении измерений.

Покрытие Cell-Tak в меньшей степени влияет на обнаружение общего белка. Мы не наблюдали практически никакой разницы при использовании стандарта BSA и в среднем на 15% уменьшения измеренного содержания белка в обеих клеточных линиях, предполагая, что все может быть сложнее с общим содержанием клеточного белка в клеточном лизате.Это различие в эффектах покрытия между анализами ДНК и белков может быть связано с прикреплением части молекул ДНК к липкому покрытию, что может препятствовать связыванию флуоресцентного реагента.

Когда мы использовали все три метода нормализации (белок, ДНК, подсчет клеток) на реальных данных внеклеточного потока морских коньков, мы увидели аналогичную картину, как указано выше, но с некоторыми другими наблюдениями, специфичными для клеточной линии. В случае линии клеток мышиного миобласта C2C12, нормализация к количеству клеток или содержанию белка практически не дает разницы между кривыми OCR без покрытия и без покрытия.покрытые лунки. С другой стороны, значения, нормализованные по ДНК, значительно выше в лунках, покрытых Cell-Tak, что хорошо согласуется с нашим наблюдением более низкого измеренного содержания ДНК в покрытых лунках.

В случае клеток HepG2 картина несколько сложнее. Хотя несоответствие между непокрытыми и покрытыми клетками при нормализации по содержанию ДНК такое же, как и для клеток C2C12, также наблюдается небольшое увеличение OCR в покрытых клетках, которое не может быть полностью устранено другими методами нормализации.Это наблюдение предполагает возможное влияние покрытия Cell-Tak на митохондриальный метаболизм этих клеток, что должно стать предметом дальнейших исследований.

Полезным указателем для таких дальнейших исследований может служить наше наблюдение, что покрытие Cell-Tak влияет на форму клеток. Это влияние на форму клеток после прикрепления к покрытой поверхности согласуется с ранее опубликованными данными о клетках нейробластомы [18] или клетках почек хомяка и клетках гистиоцитарной лимфомы человека [15].Связано ли это изменение в преобладании формы клеток с наблюдаемыми значениями OCR, еще предстоит исследовать.

Наши выводы о том, что покрытие клеточной культуры или аналитического пластика Cell-Tak может сильно влиять на измерения содержания ДНК с использованием флуоресценции PicoGreen, имеет важное значение для нормализации данных анализа внеклеточного потока морских коньков. Одно из возможных объяснений этого — прилипание молекул ДНК к покрытой поверхности. Поскольку этот процесс, вероятно, является случайным, в дополнение к более низким измеренным значениям флуоресценции ДНК мы наблюдали очень большую вариацию данных.Основываясь на этих результатах, мы предлагаем использовать подсчет клеток в качестве метода первого выбора, а общее содержание белка — в качестве метода второго выбора для нормализации данных по морскому коньку всякий раз, когда используется покрытие Cell-Tak. Исследователи должны работать с осторожностью при использовании стратегий нормализации на основе флуоресценции ДНК.

Конфликт интересов

Конфликт интересов отсутствует.

Финансирование

Это исследование было поддержано институциональным грантом Карлова университета PROGRES Q36.

Вклад авторов

JT, SM и MS разработали исследование, разработали эксперименты, проанализировали данные и написали рукопись. SM и MS выполнили эксперименты по обнаружению ДНК и белков и ручному подсчету клеток. AK, SM выполнили метаболический анализ, а JP — анализ изображения.

Адреса электронной почты

MS: michal.sima {at} iem.cas.cz

SM: stanislava.martinkova {at} lf3.cuni.cz

AK: anezka.