Вход в личный кабинет | Регистрация
Избранное (0) Список сравнения (0)
Ваши покупки:
0 товаров на 0 Р
Итого: 0 Р Купить
Сэкономьте, покупая прямо сейчас! Распродажа товаров

Проколлаген: Проколлаген а-1 (COL1A1). Выявление мутации G1245T

alexxlab --

Содержание

ЛЕКЦИЯ-СОЕДТКАНЬ

БИОХИМИЯ СОЕДИНИТЕЛЬНОЙ ТКАНИ

(лекция)

Cоединительная ткань составляет 50% от массы тела человека. Это — сухожилия, фасции, компактная кость, зубы, кожа, строма внутренних органов, нейроглия, брюшина. Все разновидности соединительной ткани построены по общим принципам:

  1. Клеточных элементов в соединительной ткани мало по сравнению с другими тканями, а межклеточное вещество занимает больше места,

  2. Наличие в соединительной ткани своеобразных волокнистых (фибриллярных) структур – коллагеновых, эластических, и ретикулиновых волокон, расположенных в окружении межуточного вещества,

  3. Соединительная ткань богата межклеточным веществом, имеющим сложный химический состав.

Межклеточный органический матрикс соединительной ткани (СТ) представлен белковыми элементами: коллагеном, эластином, фибронектином, ламинином.

Коллаген – основной фибриллярный белок, входящий в состав коллагеновых волокон и составляет 6% от массы тела. Коллаген как главная макромолекула соединительной ткани является важным элементом кожи, костей, сухожилий, сосудов, зубов. Основную массу коллагеновых белков (95%) составляют:

А) Интерстициальные коллагены (3 типа):

1 тип – кожа, кость, сухожилия, роговица глаза,

2 тип – хрящ, межпозвоночные диски, стекловидное тело,

3 тип — сердечно-сосудистая система, кожа эмбриона,

Б) Коллаген базальных мембран (4-й тип коллагена).

В) Минорные (перицеллюлярные) коллагены (5-й тип коллагена).

Синтез и созревание коллагена. Коллаген – внеклеточный белок, но он синтезируется в виде внутриклеточной молекулы предшественника, которая и подвергается пострансляционной модификации. Наиболее ранним предшественником коллагена является препроколлаген, которые содержит на N-конце лидерную последовательность из 100 аминокислот. Препроколлаген образуется на рибосомах, прикрепленных к эндоплазматическому ретикулуму. После отщепления лидерной последовательности превращается в проколлаген. Проколлаген — предшественник коллагена, но имеет большую молекулярную массу (ок. 140 тыс.). По аминокислотному составу проколлаген может варьировать и в зависимости от этого выделяют несколько типов коллагена. Молекула проколлагена содержит на N- и C- концах пептиды, которые отсутствуют в зрелом коллагене. Эти пептиды содержат остатки цистеина и образуют внутри- и межцепочечные дисульфидные связи. В эндоплазматическом ретикулуме проколлаген подвергается модификации:

1. Гидроксилирование пролина и лизина с образованием 3-гидроксипролина, 4-гидроксипролина и 5-гидроксилизина. Отдельные остатки пролина в коллагене превращаются в гидроксипролин под действием пролилгидроксилазы – фермента, содержащего в активном центре Fe++. Обязательным условием гидроксилирования является присутствие α-оксоглутарат и кислород. Один атом кислорода присоединяется к С-4 пролина, а другой – к α-оксоглутарату, Продуктами данной реакции являются 4-гидроксипролин и сукцинат. Гидроксилированию подвергается и небольшая часть лизина при участии лизилгидроксилазы. Кофактором этих ферментов является аскорбиновая кислота (витамин С). Являясь сильным восстановителем аскорбиновая кислота поддерживает Fe++ в восстановленном состоянии. При С гиповитаминозе коллаген оказывается недогидроксилированным и не может образовывать нормальные по структуре волокна, что приводит к ломкости сосудов, поражению слизистых, кожи (цинга).

2. Гликозилирование гидроксилизиновых остатков. В проколлаген включаются углеводные остатки, чаще всего это глюкоза и галактоза, которые ковалентно связываются с остатками гидроксилизина при участии ферментов глюкозилтрансферазы и галактозилтрансферазы.

3. Скручивание цепей проколлагена. В проколлагене на N- и C- концевые пептиды, содержащие остатки цистеина образуют внутри- и межцепочечные дисульфидные связи. Образование этих дисульфидных связей способствует скручиванию проколлагена в тройную спираль. После формирования тройной спирали гидроксилирование пролиловых и лизиловых остатков становится невозможным. Таким образом модификация заканчивается образованием характерной коллагеновой молекулы – трехспиральной структуры. Каждая субъединица, или α-цепь, представляет собой левозакрученную спираль, у которой на виток приходится по три аминокислотных остатка. По завершении этого внутриклеточного процесса модификации молекулы проколлагена продвигаются к наружной поверхности клетки через комплекс Гольджи и выделяется в межклеточное пространство.

В межклеточном пространстве проколлаген подвергается действию протеолитических ферментов – проколлагенпептидаз (аминопротеаза и карбоксипротеаза). Проколлагенпептидазы отщепляют по 2 дополнительных пептида от каждой из 3-х цепей проколлагена и образуется тропоколлаген (ТГ). ТК состоит из 3-х α-полипептидных цепей одинакового размера и их состав зависит от типа коллагена. α-Цепи ТК состоят приблизительно из 1000 аминокислотных остатков, 1/3 которых представлены аминокислотой глицином, ¼ — пролин, и около 1% — гидроксилизина. Некоторые молекулярные формы коллагена имеют в своем составе и гидроксипролин. В этом отношении коллаген отличается от других белков.

Тропоколлаген один из самых длинных белков. Каждая из 3-х α-полипептидных цепей ТК имеет форму спирали, стабилизируют которую силы стерического отталкивания пирролидоновых колец в остатках пролина. Эти три спирализованные цепи закручиваются одна вокруг другой, стабилизируются водородными связями, образуя суперспираль. В результате формируется жесткая палочковидная молекула с диаметром 1,4 нм и длиной около 300 нм. Характерной особенностью молекулы тропоколлагена является то, что каждых третий остаток тройной спирали α-цепи представляет собой глицин. Молекулы тропоколлагена способны мигрировать в основном веществе соединительной ткани и являются мономером из которого строится коллагеновые фибрилы, которые представляют вытянутые в длину и соединенных между собой конец в конец белковых молекул тропоколлагена.

Однако эти фибриллы должны пройти этап созревания и в результате превратиться в зрелый коллаген.

Созревание коллагена — образование коллагенового волокна – происходит в межклеточном пространстве в результате образования прочных ковалентных связей двух типов: внутримолекулярных (в пределах одной тропоколлагеновой единицы) и межмолекулярных (между отдельными тропоколлагеновыми единицами). Аминогруппы лизина и гидроксилизина боковых цепей окисляются при участии медь-содержащего фермента лизилоксидазы до альдегидных групп с последующей альдольной конденсацией. При этом образуется двойная углерод-углеродная связь к которой присоединяется по амидной группе гистидин из третьей цепи. Боковая цепь лизина взаимодействует с альдегидной группой новой молекулы тропоколлагена с образованием Шиффова основания. Количество и тип связей зависит от функции и возраста ткани. Увеличение поперечных связей в коллагене является признаком старения коллагеновых структур и, соответственно, возрастных изменений соединительной ткани.

В соединительной ткани молекулы тропоколлагена расположены рядами, последовательно смещенными на ¼ длины по отношению друг к другу (поперечная исчерченность коллагеновых волокон). Промежутки в рядах между молекулами тропоколлагена служат центрами кальцификации при формировании кости и расположение кристаллов фосфата Са совпадает с периодом исчерченности коллагенового волокна.

Таким образом, прочными ковалентными связями объединяются не только полипептидные цепочки в пределах одного тропоколлагенового мономера, но и соседние молекулы тропоколлагена, образуя межмолекулярный комплекс. Этот комплекс – оксимеродесмозин – имеет одинаковый состав и включает в себя 2 молекулы гидроксилизина и гистидин в одной тропоколлагеновой единице и альдегидную группу окисленного лизина соседней молекулы тропоколлагена.

В образовании зрелого коллагена решающая роль принадлежит ферменту лизилоксидазе, которая в присутствии ионов меди и аскорбата участвует в образовании альдегидных групп лизина в тропоколагене. Снижение активности этого фермента при дефиците аскорбиновой кислоты или меди значительно уменьшает скорость созревания коллагена и со временем приводит к преобладанию в составе соединительной ткани рыхлого, непрочного на разрыв коллагена. Проявляется это склонностью к спонтанным переломам и разрывам связок при дефиците меди, высокая проницаемость сосудов при цинге.

Катаболизм коллагеновых волокон осуществляется при участии коллагеназ.

Коллаген базальных мембран (коллаген 4 типа) существенно отличается от интерстециальных коллагенов:

  1. α-Полипептидные цепи его длиннее почти в 2 раза интерстициальных коллагенов,

  2. Отличаются резистентностью к тканевым коллагеназам,

  3. В α-полипептидных цепях отсутствует регулярная последовательность аминокислотных остатков и эти участки теряют способность к спирализации

  4. Избирательно фиксируют эпидермальные клетки,

  5. Влияет на дифференцировку клеток с которыми контактируют.

Минорные (перицеллюлярные) коллагены (5-й тип коллагена) локализованы вокруг синтезирующих их клеток, образуя для этих клеток цитоскелет. Этот тип коллагена покрывает равномерным и непрерывным слоем поверхность эндотелия сосудов. Препятствуя тромбообразованию внутри сосуда. Коллагены 5 типа обладают высокой чувствительностью к действию нейтральных протеаз, особенно тромбина.

Эластин – основной компонент эластических волокон. Он обладает способностью растягиваться в длину при нагрузке и быстро восстанавливать исходную форму. Эластина много в сосудах, связках. Аминокислотный состав эластина отличается своеобразием: как и коллаген на 1/3 он представлен глицином, много пролина. Гидроксипролина в эластине в 10 раз меньше, чем в коллагене. Как и в коллагене, в эластине нет цистеина, триптофана, мало метионина. Характерной особенностью первичной структуры эластина является слишком малое содержание полярных аминокислот. В отличие от коллагена в эластине значительно больше валина, аланина, лейцина и меньше глутаминовой кислоты и аргинина. В зрелом эластине много поперечных альдольных связей, благодаря которым эластин практически не растворим. При ферментативном гидролизе эластина в гидролизате обнаруживаются десмозин и изодесмозин (характерные только для эластина). Десмозин – это соединение четырех остатков лизина R-группами, образующее замещенное пиридиновое кольцо, Благодаря десмозину эластиновое волокно способно растягиваться в двух направлениях. В гидролизате эластина обнаружен и лизиннорлейцин, которые также обеспечивает поперечные связи в молекуле эластина. Эластин продуцируется фибробластами в виде предшественника – тропоэластина. Тропоэластин растворим, не содержит поперечных связей, которые образуются в большом количестве при его созревании.

Фибронектин – один из важнейших белков соединительной ткани. Фибронектин синтезируется фибробластами, макрофагами, его много образуется в эмбриональной ткани. В соединительной ткани взрослого организма он расположен вокруг гладкомышечных клеток, в строме лимфатических узлов, сарколемме скелетных мышц, рыхлой соединительной ткани. Фибронектин димер, состоиз их 2-х полипептидных цепей, соединенных дисульфидными связями. Фибронектин содержит 4-5% углеводов в виде олигосахаридов (гликопротеид).

Различают фибронектин тканей (нерастворимый) и фибронектин плазмы (растворимый). По аминокислотному составу они идентичны, но различаются по степени гликозилировнгия. Биологическая роль плазменного фибронектина сводится к следующему:

  1. Принимает участие в свертывании крови и включается в состав кровянного сгустка,

  2. Участвует в заживлении ран, играя роль первичного каркаса, необходимого для упорядоченного расположения фибробластов и коллагеновых структур гранулярно-фиброзной ткани.

  3. Играет роль опсонина и его роль и его дефицит сопровождается угнетением фагоцитоза.

  4. При деградации фибронектина образуются биологически активные фрагменты, выступающие медиаторами воспаления.

  5. Концентрация фибронектина в плазме резко снижается при обширных ожогах, септическом шоке и рассматривается как неблагоприятный прогностический признак.

Ламинин — белок соединительной ткани. Является обязательным структурным компонентом всех базальных мембран и соответствует распределению коллагена 4 типа. Синтезируется эпителиальными клетками. По аминокислотному составу отличается от коллагена, фибронектина. В ламинине содержится много цистеина, но отсутствует оксипролин, оксилизин. Углеводную часть ламинина образуют: глюкозамин (3%), сиаловая кислота (5%), небольшое количество галактозамина. Основная функция ламинина – обеспечивает адгезию эпителиальных клеток к базальной мембране.

МЕЖУТОЧНОЕ ВЕЩЕСТВО СОЕДИНИТЕЛЬНОЙ ТКАНИ

Основную субстанцию межклеточного матрикса соединительной ткани образуют высокомолекулярные углеводно-белковые соединения – протеогликаны. На их долю приходится до 30% сухой массы соединительной ткани. Полисахаридные группы протеогликанов называется гликозаминогликаны (ГАГ) или мукополисахариды.

ГАГ представляют собой линейные гетерополисахариды, построенные из повторяющихся дисахаридных единиц, включающих уроновые кислоты и аминосахара. Наиболее часто встречаются следующие дисахаридные блоки:

  • глюкоза-N-ацетилнейраминовая кислота,

  • галактоза-N-ацетилнейраминовая кислота,

  • галактоза(ксилулоза)-галактуроновая кислота.

В настоящее время расшифрована структура следующих ГАГ:

  1. Гиалуроновая кислота,

  2. Хондроитинсульфат А (Хондроитин-4-сульфат),

  3. Хондроитинсульфат С (Хондроитин-6-сульфат),

  4. Хондроитинсульфат В (Дерматан-сульфат),

  5. Кератан-сульфаты,

  6. Гепаран-сульфат и гепарин.

Образование и катаболизм протеогликанов. Белковые компоненты протеогликанов (ПГ) различны, однако принцип построения ПГ общий: в центре расположен белковый стержень к которому присоединяются полипептидные цепи. Связь между белковым и углеводным компонентом может быть как О-, так и N-гликозидная. Углеводный компонент – глюкозаминогликаны — чаще всего присоединяется к аминокислотам (аспарагину, серину, треонину), входящим в состав белкового компонента при участии глюкозилтрансферазы. На наружных концах углеводных компонентов имеется сульфатная группа, придающая наружной поверхности ПГ свойства полианиона. ПГ связывают большое количество воды, при этом создается гидратная оболочка, которая регулирует транспорт ионов, белков, лимфоцитов в соединительную ткань.

Метаболизм ПГ характеризуется высокой степенью интенсивности, например, период полужизни гиалуроновой кислоты 2-4 дня. Катаболизм осуществляется в макрофагах под действием экзо- и эндогликозидаз, сульфогидролаз, протеаз. Наиболее изучена лизосомальная β-гиалуронидаза, гидролизующая β-1,4-гликозидные связи между дисахаридными единицами гиалуроновой кислоты. Образуется дисахарид глюкуроновая кислота-N-ацетилглюкозамин, который дальше расщепляется лизосомальной β-гликозидазой. Хондроитинсульфаты также расщепляются под влиянием β-гиалуронидазы.

К факторам, оказывающим регулирующее влияние на метаболизм соединительной ткани относятся ферменты, гормоны, витамины Так, глюкокортикоиды тормозят синтез коллагена и ГАГ, угнетая активность фибробластов.

Патология соединительной ткани (коллагенозы):

  1. Наследственные заболевания соединительной ткани:

А) Связанные с дефектом синтеза коллагена:

  1. Несовершенный остеогенез – снижение вдвое количества коллагена 1 типа,

  2. Синдром Марфана – нарушение образования поперечных сшивок,

  3. Синдром Элерса-Данлоса – резкое уменьшение коллагена 3 типа,

  4. Синдром Менке – дефицит лизилоксидазы и нарушение образования поперечных связей в результате нарушения метаболизма меди.

В) Связанные с нарушением обмена ГАГ:

Накоплением и чрезмерным выделением одного или нескольких типов ГАГ. Наи-

более часто встречается дефицит фермента гепарансульфатазы, глюкоронидазы.

Ткани больного инфильтрированы ГАГ и развиваются синдромы поражения пече-

ни, сердца и т.д.

  1. Приобретенные заболевания соединительной ткани.

ГАГ придают антигенные свойства основному веществу соединительной ткани, поэтому организм может вырабатывать антитела к этим антигенным компанентам собственной соединительной ткани и способствовать развитию аутоиммунного процесса (ревматизм, системная красная волчанка, ревматоидный артрит).

Биохимические тесты поражения соединительной ткани:

Определение уровня сиаловых кислот в крови, гексуровых кислот и оксипролина в моче.

Наиболее часто используется определение количества сиаловых кислот, входящих в состав полисахаридной части протеогликанов. При поражении соединительной ткани в крови накапливаются ГАГ и входящие в их состав сиаловые кислоты, которые и отражают уровень воспалительно-деструктивного процесса в соединительной ткани.

Procollagen I C-Terminal Propeptide (PICP) — Карбоксинтерминальный пропептид проколлагена I типа

Московский государственный университет

Исследовательский центр им.Алмазова

НЦ вирусологии и биотехнологии «Вектор»

Институт медико-биологических проблем РАН

Институт Цитологии и Генетики СО РАН

Институт физиологии им. Павлова

Сеченовский Университет

МНТК Микрохирургии глаза им.Федорова

МФТИ

Институт экспериментальной медицины

Исследовательский центр им. Дмитрия Рогачева

НИЦ Курчатовский институт

Петербургский институт ядерной физики им. Б.П.Константинова

НИИ глазных болезней им. Гельмгольца

НЦ акушерства, гинекологии и перинатологии им.Кулакова

ИЭФБ РАН им.Сеченова

Национальный исследовательский университет Лобачевского

Томский научный исследовательский медицинский центр

Казанский Федеральный Университет

СЗГМУ им.Мечникова

Балтийский федеральный университет

Научный центр неврологии

Северо-Кавказский федеральный университет

Дальневосточный федеральный университет

ФНКЦ физико-химической медицины

ФНКЦ реаниматологии и реабилитологии

Сибирский федеральный университет

Институт биологии гена РАН

ФИЦ Питания и биотехнологий

Сибирский медицинский университет

Институт биофизики клетки РАН

НИПИ им. Бехтерева

Институт Фундаментальных Проблем Биологии РАН

Институт токсикологии ФМБА России

НИИ Акушерства и гинекологии им. Отта

НИИ Психического здоровья

РМАПО

Красноярский медицинский университет им. Войно-Ясенецкого

Алтайский медицинский университет

Ниармедик

Волгоградский медицинский университет

Новосибирский медицинский университет

РНИОИ

ИБХ РАН им. акад. Шемякина и Овчинникова

Петровакс Фарм

Южно-Уральский государственный университет

ПИМУ

ФНЦ Пищевых систем им.Горбатова РАН

Большая Энциклопедия Нефти и Газа, статья, страница 4

Проколлаген

Cтраница 4

Имеются экспериментальные доказательства того, что при цинге нарушено образование коллагена. Установлено, что в костях авитаминозных морских свинок количество коллагена значительно уменьшается. Кроме того, в коже больных животных содержится в 2 раза меньше проколлагена, чем в норме. Нарушения в синтезе коллагена и проколлагена, важнейших внеклеточных белков, играющих роль цементирующих и опорных структур в организме, имеют большое значение в развитии цинги.  [46]

Имеются экспериментальные доказательства того, что при цинге нарушено образование коллагена. Установлено, что в костях авитаминозных морских свинок количество коллагена значительно уменьшается. Кроме того, в коже больных животных содержится в 2 раза меньше — проколлагена, чем в норме. Нарушения в синтезе коллагена и проколлагена, важнейших внеклеточных белков, играющих роль цементирующих и опорных структур в организме, имеют большое значение в развитии цинги.  [47]

По своему аминокислотному составу проколлагены отличаются от коллагена главным образом содержанием тирозина, фенилаланина, гистидина, пролина и оксипролина. Содержание фенилаланина в проколлагенах приблизительно вдвое меньше, чем в коллагене, содержание же гистидина в проколлагенах, наоборот, значительно выше. Проколлагены нерастворимы в чистой воде и сравнительно слабо растворимы в подкисленной воде и в кислых буферных растворах с невысокой концентрацией солей.  [48]

Характер связей одинаков в фибриллярных и глобулярных белках. Молекулярный вес обоих основных структурных видов белка также примерно одинаков ( от 30000 до 1000000 и более), но форма значительно отличается. У фибриллярных белков длина макроглобул в сотни и тысячи раз превышает их толщину: так, макроглобула проколлагена с молекулярным весом 680000 имеет длину 3000 А при толщине несколько ангстрем. Глобулярные белки имеют чаще не шарообразную, а веретенообразную форму, варьирующую у разных белков.  [50]

По своему аминокислотному составу проколлагены отличаются от коллагена главным образом содержанием тирозина, фенилаланина, гистидина, пролина и оксипролина. Содержание фенилаланина в проколлагенах приблизительно вдвое меньше, чем в коллагене, содержание же гистидина в проколлагенах, наоборот, значительно выше. Проколлагены нерастворимы в чистой воде и сравнительно слабо растворимы в подкисленной воде и в кислых буферных растворах с невысокой концентрацией солей.  [51]

На этом основании можно предположить, что при охлаждении желатины вновь образуется одна треть разорванных при денатурации связей. Калориметрические исследования тепловой денатурации проколлагена показали [115], что вместе с тем типом структур, которые имеются в нативном проколлагене и интенсивно плавятся в области 30 — 34 и 35 — 39 С, в охлажденном денатурированном проколлагене-желатине возникают структуры нового типа, значительно менее устойчивые с более растянутым интервалом нлавления ( 23 — 31 С), совпадающим с температурным интервалом плавления гелей желатины. Меньшая степень кооперативное процесса плавления свидетельствует о меньшей степени упорядоченности структуры желатины. Величины тепловыделения, полученные тем или иным способом ( непосредственно по теплотам плавления или рассчитанные из температур плавления), составляли несколько десятков килограммкалорий на моль.  [53]

Имеются экспериментальные доказательства того, что при цинге нарушено образование коллагена. Установлено, что в костях авитаминозных морских свинок количество коллагена значительно уменьшается. Кроме того, в коже больных животных содержится в 2 раза меньше проколлагена, чем в норме. Нарушения в синтезе коллагена и проколлагена, важнейших внеклеточных белков, играющих роль цементирующих и опорных структур в организме, имеют большое значение в развитии цинги.  [54]

Имеются экспериментальные доказательства того, что при цинге нарушено образование коллагена. Установлено, что в костях авитаминозных морских свинок количество коллагена значительно уменьшается. Кроме того, в коже больных животных содержится в 2 раза меньше — проколлагена, чем в норме. Нарушения в синтезе коллагена и проколлагена, важнейших внеклеточных белков, играющих роль цементирующих и опорных структур в организме, имеют большое значение в развитии цинги.  [55]

К первым относятся нерастворимые белки, выполняющие защитные функции и отличающиеся волокнистым ориентированным строением. Макромолекулы этих белков имеют компактную третичную структуру, приближающуюся к шару или эллипсоиду вращения. Однако такое различие весьма относительно, и между этими двумя классами существует много растворимых белков, третичная структура которых имеет смешанный характер. К их числу относятся, например, проколлаген, фибриноген и миозин. Хотя молекулы этих белков и отличаются вытянутой палочкообразной формой, их полипептидные цепи не растянуты, а свернуты в топологически сложную третичную структуру.  [56]

Синтез специфических белков, характерных для позвоночных животных, имеет свои особенности, которые связаны с их структурой и определяются механизмами образования de novo белковой молекулы. Ионизирующие излучения изменяют синтез специфических белков, обеспечивающих весьма важные функции организма; Нередко нарушается сопряжение синтеза составных частей сложных белковых комплексов. При лучевой болезни заметно страдают синтез некоторых соединительнотканных структур и антителообразование. Облучение крыс в дозе 167 7 мКл / кг ведет к прогрессирующему снижению включения 14С — глицина в проколлаген кожи: через 24 ч после облучения включение метки уменьшалось в 2 раза, а через 6 сут — в 5 — 6 раз. Облучение вызывает изменение нормальных соотношений белково-углеводных компонентов соединительной ткани.  [57]

На этом основании можно предположить, что при охлаждении желатины вновь образуется одна треть разорванных при денатурации связей. Калориметрические исследования тепловой денатурации проколлагена показали [115], что вместе с тем типом структур, которые имеются в нативном проколлагене и интенсивно плавятся в области 30 — 34 и 35 — 39 С, в охлажденном денатурированном проколлагене-желатине возникают структуры нового типа, значительно менее устойчивые с более растянутым интервалом нлавления ( 23 — 31 С), совпадающим с температурным интервалом плавления гелей желатины. Меньшая степень кооперативное процесса плавления свидетельствует о меньшей степени упорядоченности структуры желатины. Величины тепловыделения, полученные тем или иным способом ( непосредственно по теплотам плавления или рассчитанные из температур плавления), составляли несколько десятков килограммкалорий на моль.  [58]

Каждая цепь содержит 1300 остатков. Образование трнмера, связанное с образованием межцепных дисульфидных мостиков, которые, по-видимому, расположены на концевых участках цепей. Образование тройной спнралн в центре молекулы проколлагена.  [60]

Страницы:      1    2    3    4

Анализ P1NP (n-терминальный пропептид проколлагена 1 типа)

Стоимость забора биоматериала

Настоящим уведомляем Вас о том, что с 01 марта 2016 года Лаборатория «Литех» изменяет порядок и стоимость забора биоматериала.

Прейскурант

№ Наименование услуги Стоимость в рублях*
1 Забор крови из вены, вне зависимости от количества пробирок 170
2 Взятие мазков, вне зависимости от количества стёкол 300

*Цены у Партнеров могут отличаться.


Анализ мочи и кала принимается в специальных контейнерах, бесплатно получить которые можно в медицинских офисах «Литех» или приобрести в аптеке.


Внимание! Скидки и специальные предложения не распространяются на забор биологического материала и генетические исследования

Описание: P1NP (N-терминальный пропептид проколлагена 1 типа) является предшественником коллагена I типа. Он выступает показателем активности формирования костной ткани, которая на 90 % состоит из коллагена 1-го типа, способного разрушаться при ремоделировании костной ткани. В результате образуются С-(карбокси) и N-(амино)терминальные фрагменты, которые далее проникают в кровоток и межклеточную жидкость. P1NP выступает маркером костного обмена. Его содержание в крови прямо пропорционален количеству вновь синтезированного и встроенного в ткань коллагена. Исследование на маркеры костной резорбции B-Cross Labs дает возможность оценить состояние костной ткани. Это необходимо в период постменопаузы у женщин, страдающих остеопорозом. Тест дает возможность выявить костный метаболизмЮ оценить формирование костной ткани.

Подготовка: Взятие крови производится строго натощак. В день взятия крови исключить прием лекарств, если отменить прием лекарств невозможно, необходимо информировать лабораторию.

Сбор материала:

Причины изменения показателей:

Показания к анализу

Примечания

Коллаген в кремах «Чёрный Жемчуг»

Только самовыработанный кожей собственный коллаген способен омолодить кожу

В производстве кремов для лица «Чёрный Жемчуг» не используется животный коллаген, или коллаген любого другого происхождение в чистом виде, так как целая молекула коллагена не проникает в глубокие слои кожи, а остаётся бесполезно лежать на её поверхности. «Жидкий коллаген» и «Про-коллаген», используемые ТМ «Черный Жемчуг» в кремах для лица — это вещества, которые помогают коже вырабатывать собственный коллаген.


Только самовыработанный кожей собственный коллаген способен омолодить кожу: повысить её упругость и разгладить морщины. Поэтому все кремы для лица содержат не сам коллаген, а его «фрагменты» или активные молекулы которые помогают коже восстанавливать самовыработку собственного коллагена. Названия «Жидкий коллаген» и «Про—коллаген» раскрывают саму суть воздействия компонента крема на кожу, но это не коллаген в его обычном понимании. На упаковке, в составе кремов, рядом указаны и химические и «потребительские» названия:

— Dipalmitoyl Hydroxyproline (Жидкий коллаген),

— Undaria Pinnatifida Extract (Про-коллаген I-IV-VIII)

Подробнее о компонентах:

«Жидкий коллаген» — это аминокислота L-гидроксипролин, синтезированная по той же технологии, что и большинство витаминов. Частичка идентичного человеческому коллагена, заключенная в лецитиновую капсулу (липосому), которая благодаря своей биодоступности легко проникает в глубокие слои кожи и запускает самоомолаживающий эффект путём выработки собственных волокон коллагена кожи.

«Жидкий коллаген» (L-гидроксипролин) — это «строительный блок» белков кожи-коллагенов и эластинов, естественное питательное вещество, необходимые для нормального функционирования кожи. Он необходим для синтеза собственных коллагена и эластина, отвечающих за упругость и эластичность кожи.

«Про-коллаген I-IV-VIII» — компонент крема-эксперта 46+, активная молекула, получаемая из репродуктивной части водоросли Ундария перистая (Ундария Пиннатифида).
Название «про-коллаген» обусловлено тем, что данная молекула обладает уникальным свойством помогать коже увеличивать синтез собственного коллагена (типы I-IV-VIII), эластина и гиалуроновой кислоты. За счёт этой уникальной способности «предшествовать» выработке собственных коллагенов, получил название «Про-коллаген».

В комплексе с экстрактом мирта «Про-коллаген I-IV-VIII» за счёт воссоздания внеклеточного матрикса помогает коже значительно улучшить упругость кожи и придать чёткость контурам лица.

оцените материал

Маркёр формирования костного матрикса P1NP (N-терминальный пропептид проколлагена 1 типа, Total P1NP)

Исследуемый материал Сыворотка крови

Метод определения Электрохемилюминесцентный иммуноанализ, Cobas e601(Roche).

Маркёр активности метаболизма костной ткани.

Использование биохимических маркёров костного метаболизма в диагностике и контроле лечения остеопороза – важное дополнение к денситометрии (измерению плотности костной ткани). В отличие от денситометрии, которая констатирует состояние минерализации костной ткани на момент исследования, биохимические маркёры позволяют судить о скорости и направленности процессов костного метаболизма.

В костной ткани имеют место два разнонаправленных, относительно независимых процесса, которые лежат в основе её способности к ремоделированию (самовосстановлению): это процессы резорбции (разрушения и удаления старой ткани) и процесс формирования костной ткани. Эти процессы обеспечивают поддержание структуры костной ткани и тесно связаны с поддержанием обмена кальция в организме. Выраженное влияние на костный метаболизм оказывают паратгормон, эстрогены, тиреоидные гормоны, гормон роста, глюкокортикоиды и др.

Баланс процессов синтеза и резорбции костной ткани меняется с возрастом: в период роста организма преобладает формирование костной ткани над резорбцией; после 50 лет постепенно начинает преобладать процесс резорбции. Ускорение костного метаболизма на этом фоне ускоряет и потерю костной ткани.


Исследование биохимических маркёров полезно в диагностике патологии костной ткани и оценке риска переломов, но особенно целесообразным является применение этих тестов в контроле терапии пациентов. Исследование биохимических маркёров костного метаболизма через 3 месяца и далее от начала лечения помогает оценить эффективность терапии, своевременно выявить пациентов, не придерживающихся назначенного лечения, или лиц с отсутствием ответа на терапию (например, на фоне нарушений питания, алкоголизма, иммобилизации, лечения глюкокортикоидами, гипертиреоидизма) для своевременной коррекции проводимого лечения. Маркёры процесса резорбции: см тесты № 147 – дезоксипиридинолин мочи (ДПИД), № 203 — Beta-Cross laps (контроль антирезорбтивной терапии – ожидается снижение).

Маркёр активности формирования кости — (преимущественно контроль анаболической терапии – ожидается повышение; контроль антирезобтивной терапии – ожидается снижение).


См. также тест № 36 Щёлочная фосфатаза.
Маркёр интенсивности обмена костной ткани – см. тест № 146 N-Остеокальцин (контроль антирезорбтивной терапии – ожидается снижение).

Органический матрикс (основа) кости представлен преимущественно коллагеном 1 типа, который образуется из проколлагена 1 типа, синтезирующегося фибробластами и остеобластами. N-концевой пропептид проколлагена 1 высвобождается в межклеточное пространство и кровоток в процессе образования коллагена 1 и встраивания его в матрикс кости.


P1NP, таким образом, является одним из маркёров, отражающих активность формирования костной ткани (см. также тест Остеокальцин № 146, Щёлочная фосфатаза № 36 ). P1NP, поступивший в кровоток, может иметь трехмерную структуру, но он быстро распадается на мономерные фракции. В данном тесте выявляются обе фракции (общий P1NP).

Исследование рекомендуется проводить до начала терапии и далее с интервалом 3 месяца от её начала.

 

Литература

  1. Руководство по остеопорозу / Под ред. Беневоленской Л. И. – М.: Русский врач. 2003. – с. 524.

  2. Mesko D. Differential diagnosis by Laboratory medicine. – Ed. Springer, 2002, p. 319 — 321.

  3. Clinical Application of Bone Markers – Материалы фирмы Roche.

Проколлаген-пролиндиоксигеназа — Procollagen-proline dioxygenase — qaz.wiki

Проколлаген-пролиндиоксигеназа , широко известная как пролилгидроксилаза , является членом класса ферментов, известных как альфа-кетоглутарат-зависимые гидроксилазы . Эти ферменты катализируют включение кислорода в органические субстраты по механизму, который требует альфа-кетоглутаровой кислоты , Fe 2+ и аскорбата . Этот конкретный фермент катализирует образование (2 S , 4 R ) -4-гидроксипролина , соединения, которое представляет собой наиболее распространенную посттрансляционную модификацию протеома человека .

Ферментный механизм

Проколлаген-пролиндиоксигеназа катализирует следующую реакцию:

L-пролин + 2-оксоглутарат + O 2 → (2 S , 4 R ) -4-гидроксипролин + сукцинат + CO 2

Механизм реакции похож на других диоксигеназ, и происходит в две стадии: Во-первых, высокой реакционной способностью Fe (IV) , = O видов производится. Молекулярный кислород связан концами в аксиальном положении, образуя дикислородную единицу. Нуклеофильная атака на C2 генерирует тетраэдрический промежуточный продукт с потерей двойной связи в дикислородной единице и связями с железом и альфа-углеродом 2-оксоглутарата. Последующее удаление CO 2 совпадает с образованием компонентов Fe (IV) = O. Второй этап включает в себя абстракцию про — R атома водорода от С-4 подложки пролина с последующей радикальной комбинацией, что дает гидроксипролина.

Вследствие механизма реакции одна молекула 2-оксоглутарата декарбоксилируется с образованием сукцината. Этот сукцинат гидролизуется и заменяется другим 2-оксоглутаратом после каждой реакции, и был сделан вывод, что в присутствии 2-оксоглутарата связанный с ферментом Fe 2+ быстро превращается в Fe 3+ , что приводит к инактивации фермента. Аскорбат используется в качестве кофактора для восстановления Fe 3+ до Fe 2+ .

Структура фермента

Более пристальный взгляд на субстрат-связывающий домен пролилгидроксилазы. Остатки тирозина, образующие связующую бороздку, отображаются желтым цветом.

Пролилгидроксилаза представляет собой тетрамер с 2 уникальными субъединицами. Субъединица α составляет 59 кДа и отвечает как за связывание пептида, так и за каталитическую активность. Пептид-связывающий домен охватывает остатки 140-215 α-субъединицы и состоит из вогнутой поверхности, выстланной множеством остатков тирозина, которые благоприятно взаимодействуют с богатым пролином субстратом. Активный сайт состоит из Fe2 + связан с двумя гистидиновых остатками и одного аспартатами остатка, характеристикой общего большинства 2-оксоглутарат-зависимыми диоксигеназами. Β-субъединица 55 кДа отвечает за локализацию и удержание фермента в эндоплазматическом ретикулуме . Эта субъединица идентична ферменту, известному как протеиндисульфидизомераза .

Биологическая функция

Пролилгидроксилаза катализирует образование гидроксипролина, который является наиболее распространенной посттрансляционной модификацией в организме человека. Модификация оказывает значительное влияние на стабильность коллагена , основной соединительной ткани человеческого тела. В частности, гидроксилирование увеличивает температуру плавления (T m ) спирального коллагена на 16 ° C по сравнению с негидроксилированным коллагеном, разница, которая позволяет белку быть стабильным при температуре тела.

Фермент специфически действует на пролин, содержащийся в мотиве X-Pro-Gly, где Pro — это пролин. Из-за этого специфичного для мотива поведения фермент также действует на другие белки, содержащие ту же последовательность. Такие белки включают , среди прочего , C1q , эластины , PrP , Argonaute 2 и конотоксины .

Актуальность болезни

Поскольку для функционирования пролилгидроксилазы требуется аскорбат в качестве кофактора, его отсутствие ставит под угрозу активность фермента. В результате сниженное гидроксилирование приводит к заболеванию, известному как цинга . Поскольку стабильность коллагена у пациентов с цингой нарушена, симптомы включают ослабление кровеносных сосудов, вызывающее пурпуру , петехии и кровоточивость десен.

Фактор, индуцируемый гипоксией (HIF), представляет собой эволюционно законсервированный фактор транскрипции, который позволяет клетке физиологически реагировать на уменьшение кислорода. Идентифицирован класс пролилгидроксилаз, которые специфически действуют на HIF; гидроксилирование HIF позволяет белку быть мишенью для деградации. На пролилгидроксилазу HIF воздействуют различные ингибиторы , предназначенные для лечения инсульта , болезней почек, ишемии , анемии и других важных заболеваний.

Альтернативные имена

  • Протоколлаген гидроксилаза
  • Пролилгидроксилаза
  • Пролил 4-гидроксилаза
  • Протоколлаген пролилгидроксилаза

Рекомендации

внешняя ссылка

<img src=»https://en.wikipedia.org//en.wikipedia.org/wiki/Special:CentralAutoLogin/start?type=1×1″ alt=»» title=»»>

Проколлаген-пептидаза — обзор

Натуральные биоматериалы, найденные в ECM

Коллаген

Коллаген является основным белком человеческого тела и составляет 75% от общего белка кожи. Описано как минимум 29 типов коллагенов, 11 из которых обнаружены в коже [1,5]. Наиболее важная роль коллагена — поддержание структурной целостности [6]. Коллагены синтезируются фибробластами и миофибробластами и могут быть извлечены из костей, хрящей, кожи, связок и сухожилий.Биоматериалы на основе коллагена могут быть получены с помощью двух различных методов: децеллюляризации дермы или экстракции коллагена. При необходимости полученные продукты могут быть подвергнуты различным методам сшивки [7]. Из всех типов коллагена только несколько используются для STE, и среди них золотым стандартом является коллаген 1 типа [7]. Кожа состоит в основном из коллагенов 1 и 3 типов, но также из коллагенов 4, 5, 6 и 12 [1]. Большинство полипептидных цепей коллагена образованы из повторяющейся аминокислотной последовательности, в которой каждые , третьи остатки представляют собой глицин ; его можно описать как Gly-X-Y (рис. 2), где X и Y — пролин и гидроксипролин соответственно.Три полипептидные последовательности коллагена образуют левостороннюю суперспираль длиной примерно 300 нм и диаметром 1,4 нм, состоящую из 1000 аминокислотных остатков [8]. Химическая структура и трехмерное расположение играют решающую роль в стабильности белка [5]. Коллаген существует в фибриллярной или нефибриллярной формах. Фибриллообразующие коллагены самоорганизуются в поперечно-полосатые фибриллы с характерным повторением 67 нм. Коллагены синтезируются в форме предшественника — проколлагена, который после ферментативного расщепления собирается во внеклеточном пространстве.Проколлаген выводится за пределы клетки, и оба конца обрезаются проколлагеновой пептидазой с образованием тропоколлагена. Молекулы тропоколлагена самоорганизуются в микрофибриллу коллагена, которая впоследствии подвергается перекрестному сшиванию с помощью лизилоксидазы и формирует коллагеновое волокно (рис. 2). Фибриллообразующие коллагены обеспечивают структурную основу и включают типы 1, 2, 3, 5 и 11 [9]. Известно, что некоторые коллагены образуют сетчатые сети; например, коллаген типа 4 образует базальную мембрану вместе с другими белками.Другие коллагены, которые, как известно, образуют сети, относятся к типам 8 и 10. Есть коллагены, которые связаны с поверхностями фибрилл (типы 6, 9, 12 и 14), трансмембранными белками (типы 13 и 18) или образуют периодически бусинчатые структуры (тип 6) [6]. Коллагеновые структуры содержат мотивы — лиганды, которые клетки могут распознавать. Лиганд — это особый аминокислотный мотив в белке, который расположен на поверхности матрикса, где связываются молекулы клеточной адгезии [10]. Использование коллагена при STE имеет много преимуществ: (1) низкая иммуногенность; (2) высокая механическая прочность; (3) хорошая биосовместимость; и (4) возможность адаптировать сшивание для достижения желаемых механических свойств, свойств разложения и водопоглощения.К недостаткам относятся трудности с обработкой, стерилизацией и контролем скорости разложения.

Для коммерческого использования коллаген выделяют из коровьего, свиного или куриного источников [8], но также его можно получить с помощью рекомбинантной технологии [11]. Преимущество рекомбинантной версии состоит в том, что она имеет ту же аминокислотную последовательность, что и человеческий коллаген, без проблем с извлечением коллагена (риск заражения, чистота) [12]. Однако большинство существующих биоматериалов, используемых в клинической практике, основаны на натуральном или экстрагированном коллагене [2].

Желатин — денатурированный коллаген. Желатин может поддерживать прикрепление, миграцию и пролиферацию клеток и был протестирован в различных экспериментальных матрицах [11]. Взаимодействия клеточного матрикса имеют первостепенное значение при STE. Их можно разделить на прямые или косвенные взаимодействия между клетками и коллагеном.

Фибронектин

Фибронектин — это высокомолекулярный гликопротеин (440 кДа), также известный как фибриновый пектин. Он является членом семейства адгезивных белков и играет важную роль в ECM.Внутри ECM он связывает интегрины и другие компоненты, такие как коллаген, фибрин и гепарин, играя решающую роль в непрямом контакте клетки с коллагеном [7]. Фибронектин также играет важную роль в заживлении ран, особенно в процессе миграции и роста клеток в процессе восстановления [13]. Фибронектин существует в виде белкового димера, образованного двумя мономерами, связанными парой дисульфидных связей. Существуют растворимые и нерастворимые типы фибронектина. Растворимая форма содержится в крови, участвует в процессах заживления ран и вырабатывается гепатоцитами.Нерастворимый фибронектин продуцируется различными клетками, в основном фибробластами, которые вносят вклад в ECM. Эти две формы структурно и биологически сходны, но не идентичны [14,15]. К счастью, плазменная форма может быть переведена в нерастворимую форму in vivo и in vitro [14,16], что позволяет использовать ее в регенеративных матрицах или покрытии других биоматериалов для усиления взаимодействия клеток с коллагеном. Основными источниками фибронектина являются бычья и человеческая плазма.

Ламинин

Ламинин — это широко распространенный белок внутри внеклеточного матрикса и один из основных компонентов базальной мембраны [6].Базальная мембрана является ключевой структурой во всех эпителиальных и эндотелиальных тканях, таких как кожа и слизистая оболочка пищеварительной, дыхательной и сосудистой систем. Ламинин продуцируется различными клетками и играет роль в клеточной адгезии, миграции, дифференцировке, эмбриональном развитии и ангиогенезе во время заживления ран [6,17,18]. В настоящее время выделено 12 изоформ ламинина. Структурно ламинин состоит из трех дисульфидно связанных цепей (комбинация пяти α-цепей, трех β-цепей и трех γ-цепей) [6].Все ламинины имеют общие элементы, такие как небольшие глобулярные домены, участвующие в цепной полимеризации, повторы, подобные эпидермальному фактору роста, которые косвенно опосредуют связь с коллагеном 4 типа внутри базальной мембраны. Ламинин 1 был выделен первым и считается представителем этого класса; он имеет форму креста, как показано на рисунке 2. Ламинин 1 присутствует в базальной мембране эпителиальных клеток и структурно состоит из субъединиц α1, β3 и γ2. Большинство клеток находится в контакте с различными базальными мембранами, что делает ламинин интересным для STE, учитывая возможность улучшения интерфейса между хозяином и имплантатом [6].Путем включения ламинина в конструкцию, созданную с помощью кожи, ранее неприлипающая поверхность может быть увеличена с точки зрения клеточной адгезии, потенциально демонстрируя улучшенное заживление и регенерацию [19]. Дефекты экспрессии ламинина могут быть связаны с мышечной дистрофией и кожными пузырями [17] и могут играть роль в развитии рака и метастазов [6].

Эластин

Эластин — еще один структурный белок, обнаруженный в ВКМ млекопитающих. Внутри тканей он образует сложную трехмерную (3D) структуру, которая помогает связывать ткани, представляет собой доминирующую часть эластичного волокна и придает упругость и эластичность тканям [20].Эластичность — это механическое свойство, которое позволяет твердым материалам возвращаться к своей первоначальной структуре после деформации; неотъемлемый атрибут тканей, подверженных растягивающим силам. Отсюда следует, что ткани, такие как кровеносные сосуды, которые растягиваются и расслабляются более чем в миллиард раз в течение жизни, поэтому богаты эластином, так же как и связки, легкие и кожа [21]. Другим важным свойством тропоэластина (предшественника эластина) и эластиноподобных пептидов является их способность к самосборке в физиологических условиях [21], которая лежит в основе процесса, называемого коацервацией. Коацервация заключается в выравнивании молекул перед сшивкой. Период полураспада эластина составляет 70 лет, и это самый стабильный из известных белков [22]. Эластин важен для STE, учитывая его свойства эластичности, самосборки, долговременной стабильности и биологической активности [21]. Эластин можно применять при STE в различных формах, таких как нерастворимые эластиновые волокна, гидролизованный растворимый эластин, рекомбинантный тропоэластин (фрагменты), повторы синтетического пептида, блок-сополимеры эластина и, возможно, в комбинации с другими биополимерами [21].Эластин выделяют путем обработки богатых эластином тканей гидроксидом натрия или гуанидин гидрохлоридом; затем эту смесь либо одновременно, либо последовательно нагревают для удаления других белков и клеточного материала [20]. Сложность манипулирования эластином in vitro из-за обширного поперечного сшивания и связанной с этим нерастворимости делает эластин менее привлекательным для ТЕ [20,21]. Однако эластические свойства эластичных тканей были воспроизведены с помощью эластин-коллагеновых матриц, синтезированных с помощью процессов сублимационной сушки [20]. Учитывая, что коллаген-эластиновые матрицы могут поддерживать фибробласты и кератиноциты, эти гетерогенные матрицы были исследованы в качестве матриц регенерации дермы [20,21]. Также были синтезированы матрицы, состоящие из эластина с фибрином; однако они еще не тестировались in vivo [20].

Гликозаминогликаны

ГАГ, также называемые мукополисахаридами, представляют собой категорию крупных линейных полисахаридов, в которых повторяющийся дисахарид состоит из одного аминосахара ( N -ацетилглюкозамина или N -ацетилгалактозамина (глюкометилгалактозамина) и анурроновой кислоты идуроновая кислота).ГАГ очень полярны, притягивают и связывают молекулы воды, заполняя промежутки между коллагеновыми фибриллами внутри ЕСМ и тем самым облегчая их роль как смазки и амортизатора [23]. Практически все клетки продуцируют ГАГ, которые затем секретируются, что делает их исключительно преобладающими в ЕСМ. Наиболее важными для STE являются гиалуронан и хондроитинсульфат. ГАГ вводятся в состав пористых каркасов в сочетании с коллагеном, хитозаном или другими природными биоматериалами для модуляции определенных свойств, таких как доступность сайтов связывания. Например, кондроитин-6-сульфат вводится в шаблон для дермальной регенерации Integra ® , чтобы придать ему повышенную биодоступность.

Разработка и характеристика эукариотической системы экспрессии проколлагена человека II типа | BMC Biotechnology

  • 1.

    Myllyharju J, Kivirikko KI. Коллагены и заболевания, связанные с коллагеном. Ann Med. 2001. 33 (1): 7–21.

    Артикул CAS Google ученый

  • 2.

    Эйвери, Северная Каролина, Бейли, AJ. Влияние реакции Майяра на физические свойства и клеточные взаимодействия коллагена. Pathol Biol. 2006. 54 (7): 387–95.

    Артикул CAS Google ученый

  • 3.

    Ли Ч., Сингла А., Ли Ю. Биомедицинские применения коллагена. Int J Pharm. 2001. 221 (1–2): 1–22.

    Артикул CAS Google ученый

  • 4.

    Олсен Д., Ян К.Л., Бодо М., Чанг Р., Ли С., Баез Дж. И др.Рекомбинантный коллаген и желатин для доставки лекарств. Adv Drug Deliv Rev. 2003; 55 (12): 1547–67.

    Артикул CAS Google ученый

  • 5.

    Metcalfe AD, Ferguson MWJ. Тканевая инженерия замещающей кожи: перекресток биоматериалов, заживление ран, эмбриональное развитие, стволовые клетки и регенерация. Интерфейс J R Soc. 2007. 4 (14): 413–37.

    Артикул CAS Google ученый

  • org/Book»> 6.

    Эйр Д.Р., Ву Дж.Дж. Коллагеновые перекрестные связи. В: Brinckmann J, Notbohm H, Müller PK, редакторы. Коллаген, т. 247. Гейдельберг: Springer Berlin; 2005. с. 207–29.

    Google ученый

  • 7.

    Эйвери, Северная Каролина, Бейли, AJ. Ограничение поперечных связей, ответственных за механические свойства коллагеновых волокон: натуральных и искусственных. В: Фратцл П., редактор. Коллаген. США: Springer; 2008. с. 81–110.

    Google ученый

  • 8.

    Катаяма Y, Селик С., Нагата Н., Мартин Т.Дж., Финдли Д.М. Неферментативное гликирование коллагена I типа изменяет взаимодействие с преостеобластными клетками UMR 201-10B. Кость. 1997. 21 (3): 237–42.

    Артикул CAS Google ученый

  • org/ScholarlyArticle»> 9.

    Damodarasamy M, Vernon RB, Karres N, Chang CH, Bianchi-Frias D., Nelson PS, et al. Экстракты коллагена, полученные от молодых и пожилых мышей, демонстрируют различные структурные свойства и клеточные эффекты в трехмерных гелях.J Gerontol Ser A Biol Med Sci. 2010. 65A (3): 209–18.

    Артикул CAS Google ученый

  • 10.

    Мейсон Б.Н., Рейнхарт-Кинг, Калифорния. Контроль механических свойств трехмерных матриц посредством неферментативного гликирования коллагена. Органогенез. 2013; 9 (2): 70–5.

    Артикул Google ученый

  • 11.

    Розенблум Дж., Харш М., Хименес С. Содержание гидроксипролина определяет температуру денатурации коллагена куриных сухожилий.Arch Biochem Biophys. 1973; 158 (2): 478.

    Артикул CAS Google ученый

  • 12.

    Торре-Бланко А., Адачи Е., Ходжима Ю., Вуттон Дж., Минор Р., Прокоп Д. Посттрансляционная сверх-модификация проколлагена типа I, вызванная температурой. Влияние чрезмерной модификации белка на скорость расщепления проколлагеновой N-протеиназой и на самосборку коллагена в фибриллы. J Biol Chem. 1992. 267 (4): 2650–5.

    CAS Google ученый

  • 13.

    Notbohm H, Nokelainen M, Myllyharju J, Fietzek PP, Muller PK, Kivirikko KI. Рекомбинантные человеческие коллагены типа II с низким и высоким уровнями гидроксилизина и его гликозилированных форм обнаруживают заметные различия в фибриллогенезе in vitro. J Biol Chem. 1999. 274 (13): 8988–92.

    Артикул CAS Google ученый

  • 14.

    Samimi A, Last JA. Ингибирование лизилгидроксилазы малатионом и малаоксоном. Toxicol Appl Pharmacol. 2001. 172 (3): 203–209.

    Артикул CAS Google ученый

  • 15.

    Пинкас Д.М., Динг С., Рейнс Р.Т., Бэррон А.Е. Настраиваемое посттрансляционное гидроксилирование коллагеновых доменов в Escherichia coli. ACS Chem Biol. 2011; 6 (4): 320–4.

    Артикул CAS Google ученый

  • 16.

    Que R, Mohraz A, Da Silva NA, Wang S.W. Расширение функциональных возможностей рекомбинантного коллагена человека с помощью искусственно созданных неместных цистеинов. Биомакромолекулы. 2014; 15 (10): 3540–9.

    Артикул CAS Google ученый

  • 17.

    Фертала А., Сьерон А.Л., Гангули А., Ли С.В., Алакокко Л., Анумула К.Р. и др. Синтез рекомбинантного человеческого проколлагена-II в стабильно трансфицированной линии опухолевых клеток (HT1080). Biochem J. 1994; 298 (Pt 1): 31–7.

    Артикул CAS Google ученый

  • 18.

    Нокелайнен М., Хелаакоски Т., Мюллюхарью Дж., Нотбом Х., Пихлаяниеми Т., Фицек П.П. и др.Экспрессия и характеристика рекомбинантных коллагенов типа II человека с низким и высоким содержанием гидроксилизина и его гликозилированных форм. Matrix Biol. 1998. 16 (6): 329–38.

    Артикул CAS Google ученый

  • org/ScholarlyArticle»> 19.

    Баес Дж., Олсен Д., Полярек Дж. В.. Рекомбинантные микробные системы для производства человеческого коллагена и желатина. Appl Microbiol Biotechnol. 2005. 69 (3): 245–52.

    Артикул Google ученый

  • 20.

    Руоттинен М., Боллок М., Коглер М., Нойбауэр А., Краузе М., Хамалайнен Э. Р. и др. Улучшенное производство проколлагена человека типа II в дрожжах Pichia pastoris во встряхиваемых колбах с помощью беспроводной системы периодического действия с подпиткой. BMC Biotechnol. 2008; 8 (1): 33.

    Артикул Google ученый

  • 21.

    Rutschmann C, Baumann S, Cabalzar J, Luther K, Hennet T. Рекомбинантная экспрессия гидроксилированного коллагена человека в Escherichia coli. Appl Microbiol Biotechnol. 2014. 98 (10): 4445–55.

    Артикул CAS Google ученый

  • 22.

    Бюхтер Д.Д., Паолелла Д.Н., Лесли Б.С., Браун М.С., Мехос К.А., Грускин Е.А. Ко-трансляционное включение транс-4-гидроксипролина в рекомбинантные белки бактерий. J Biol Chem. 2003. 278 (1): 645–50.

    Артикул CAS Google ученый

  • 23.

    Мерль С., Перре С., Лакур Т., Йонваль В., Худавердиан С., Гаррон Р. и др.Гидроксилированный гомотримерный коллаген I человека в опосредованной Agrobacterium tumefaciens временной экспрессии и в трансгенном растении табак. FEBS Lett. 2002. 515 (1-3): 114–8.

    Артикул CAS Google ученый

  • org/ScholarlyArticle»> 24.

    Штайн Х., Виленски М., Цафрир Ю., Розенталь М., Амир Р., Авраам Т. и др. Производство биоактивного, посттрансляционно модифицированного, гетеротримерного человеческого рекомбинантного коллагена типа I в трансгенном табаке. Биомакромолекулы.2009; 10 (9): 2640.

    Артикул CAS Google ученый

  • 25.

    Джон DCA, Watson R, Kind AJ, Scott AR, Kadler KE, Bulleid NJ. Экспрессия сконструированной формы рекомбинантного проколлагена в молоке мышей. Nat Biotechnol. 1999. 17 (4): 385–9.

    Артикул CAS Google ученый

  • 26.

    Bulleid NJ, John DCA, Kadler KE. Системы рекомбинантной экспрессии для производства коллагена.Biochem Soc Trans. 2000. 28 (4): 350–3.

    Артикул CAS Google ученый

  • org/ScholarlyArticle»> 27.

    Fagerholm P, Lagali NS, Merrett K, Jackson WB, Munger R, Liu Y и др. Биосинтетическая альтернатива человеческой донорской ткани для индукции регенерации роговицы: 24-месячное наблюдение за фазой 1 клинического исследования. Sci Transl Med. 2010; 2 (46): 46ra61.

    Google ученый

  • 28.

    Pulkkinen HJ, Tiitu V, Valonen P, Jurvelin JS, Lammi MJ, Kiviranta I.Конструирование хряща в геле рекомбинантного человеческого коллагена типа II на модели голых мышей in vivo. Остеоартроз Хрящевой. 2010. 18 (8): 1077–87.

    Артикул CAS Google ученый

  • 29.

    Pulkkinen HJ, Tiitu V, Valonen P, Jurvelin JS, Rieppo L, Töyräs J, et al. Ремонт костно-хрящевых дефектов с помощью рекомбинантного геля коллагена человека типа II и аутологичных хондроцитов у кролика. Остеоартроз Хрящевой. 2013. 21 (3): 481–90.

    Артикул CAS Google ученый

  • 30.

    Майстерек И., Макадамс Э., Адачи Э., Дьюме С.Т., Фертала А. Перспективы и ограничения рациональной инженерии фибриллярных коллагенов. Protein Sci. 2003. 12 (9): 2063–72.

    Артикул CAS Google ученый

  • 31.

    Steplewski A, Majsterek I, McAdams E, Rucker E, Brittingham RJ, Ito H, et al. Градиент термостабильности тройной спирали коллагена выявляет ее многодоменную структуру. J Mol Biol. 2004. 338 (5): 989–98.

    Артикул CAS Google ученый

  • 32.

    Steplewski A, Ito H, Rucker E, Brittingham RJ, Alabyeva T, Gandhi M, et al. Положение одиночных аминокислотных замен в тройной спирали коллагена определяет их влияние на структуру коллагеновых фибрилл. J Struct Biol. 2004. 148 (3): 326–37.

    Артикул CAS Google ученый

  • 33.

    Hollander AP, Pidoux I, Reiner A, Rorabeck C, Bourne R, Poole AR. Повреждение коллагена типа II при старении и остеоартрите начинается на суставной поверхности, возникает вокруг хондроцитов и распространяется на хрящ с прогрессирующей дегенерацией.J Clin Invest. 1995. 96 (6): 2859–69.

    Артикул CAS Google ученый

  • 34.

    Пул А.Р., Кобаяши М., Ясуда Т., Лаверти С., Мвале Ф., Кодзима Т. и др. Деградация коллагена II типа и его регуляция в суставном хряще при остеоартрите. Ann Rheum Dis. 2002; 61 приложение 2: ii78–81.

    Артикул CAS Google ученый

  • 35.

    Spranger J, Winterpacht A, Zabel B.Коллагенопатии типа II: спектр хондродисплазий. Eur J Pediatr. 1994. 153 (2): 56–65.

    CAS Google ученый

  • 36.

    Nehrer S, Breinan HA, Ramappa A, Young G, Shortkroff S, Louie LK, et al. Тип матричного коллагена и размер пор влияют на поведение засеянных хондроцитов собак. Биоматериалы. 1997. 18 (11): 769–76.

    Артикул CAS Google ученый

  • 37.

    Fertala A, Han WB, Ko FK. Картирование критических участков в коллагене II для рационального дизайна генно-инженерных белков для материалов, поддерживающих клетки. J Biomed Mater Res. 2001. 57 (1): 48–58.

    Артикул CAS Google ученый

  • 38.

    Пипер Дж. С., ван дер Краан П. М., Хафманс Т., Камп Дж., Бума П., ван Сусанте Дж. Л.С. и др. Сшитые коллагеновые матрицы типа II: подготовка, характеристика и потенциал для хрящевой инженерии. Биоматериалы.2002. 23 (15): 3183–92.

    Артикул CAS Google ученый

  • 39.

    Rezaei N, Downing BPB, Wieczorek A, Chan CKY, Welch RL, Forde N. Использование оптического пинцета для изучения механических свойств коллагена. В: Photonics North 2011: 2011; Оттава, Канада. Беллингхэм, Вашингтон: SPIE; 2011. с. 80070К.

    Google ученый

  • org/ScholarlyArticle»> 40.

    Chung HJ, Jensen DA, Gawron K, Steplewski A, Fertala A.Замена R992C (p.R1192C) в коллагене II изменяет структуру мутантных молекул и вызывает ответ развернутого белка. J Mol Biol. 2009. 390 (2): 306–18.

    Артикул CAS Google ученый

  • 41.

    Lennon G, Auffray C, Polymeropoulos M, Soares MB. Изображение. Консорциум: Комплексный молекулярный анализ геномов и их экспрессии. Геномика. 1996. 33 (1): 151–2.

    Артикул CAS Google ученый

  • 42.

    Андерсон SML, Эллиотт Р.Дж. Оценка нового быстрого анализа коллагена. Biochem Soc Trans. 1991; 19 (4): 389С.

    Артикул CAS Google ученый

  • org/ScholarlyArticle»> 43.

    Паппин DJC, Hojrup P, Bleasby AJ. Быстрая идентификация белков с помощью фингерпринта пептидных масс. Curr Biol. 1993. 3 (6): 327–32.

    Артикул CAS Google ученый

  • 44.

    Bruckner P, Prockop DJ.Протеолитические ферменты как зонды тройной спиральной конформации проколлагена. Анальная биохимия. 1981. 110 (2): 360–8.

    Артикул CAS Google ученый

  • 45.

    Хаяси Т., Нагаи Ю. Аномальное поведение пептидов коллагена при электрофорезе в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия связано с низким содержанием гидрофобных аминокислотных остатков. J Biochem. 1980. 87 (3): 803–8.

    CAS Google ученый

  • org/ScholarlyArticle»> 46.

    Персиков А.В., Бродский Б. Нестабильные молекулы образуют устойчивые ткани. Proc Natl Acad Sci U S. A. 2002; 99 (3): 1101–3.

    Артикул CAS Google ученый

  • 47.

    Лейкина Е., Мертц М.В., Кузнецова Н., Лейкин С. Коллаген I типа термически нестабилен при температуре тела. Proc Natl Acad Sci U S. A. 2002; 99 (3): 1314–8.

    Артикул CAS Google ученый

  • 48.

    Kafienah W., Bromme D, Buttle DJ, Croucher LJ, Hollander AP.Катепсин К человека расщепляет нативные коллагены типа I и II на N-конце тройной спирали. Biochem J. 1998; 331: 727–32.

    Артикул CAS Google ученый

  • org/ScholarlyArticle»> 49.

    Li Z, Hou W-S, Brömme D. Коллагенолитическая активность катепсина K специфически модулируется хрящевыми сульфатами хондроитина. Биохимия. 2000. 39 (3): 529–36.

    Артикул CAS Google ученый

  • 50.

    Sun YL, Luo ZP, Fertala A, An KN. Прямая количественная оценка гибкости мономера коллагена типа I. Biochem Biophys Res Commun. 2002. 295 (2): 382–6.

    Артикул CAS Google ученый

  • 51.

    Sun YL, Luo ZP, Fertala A, An KN. Растяжка коллагена II типа оптическим пинцетом. J Biomech. 2004; 37: 1665–9.

    Артикул Google ученый

  • 52.

    Ке С., Цзян Ю., Ривера М., Кларк Р.Л., Маршалек ЧП.Ошибки, вызванные вытягиванием геометрической формы в измерениях силовой спектроскопии одиночных молекул. Biophys J. 2007; 92 (9): L76–8.

    Артикул CAS Google ученый

  • 53.

    Adhikari AS, Glassey E, Dunn AR. Конформационная динамика, сопровождающая протеолитическую деградацию тримерного коллагена I коллагеназами. J Am Chem Soc. 2012. 134 (32): 13259–65.

    Артикул CAS Google ученый

  • 54.

    Camp RJ, Liles M, Beale J, Saeidi N, Flynn BP, Moore E, et al. Молекулярная механохимия: переключатель низкой силы замедляет ферментативное расщепление мономера коллагена человека типа I. J Am Chem Soc. 2011; 133 (11): 4073.

    Артикул CAS Google ученый

  • org/ScholarlyArticle»> 55.

    Chang SW, Flynn BP, Ruberti JW, Buehler MJ. Молекулярный механизм силы индуцировал стабилизацию коллагена против ферментативного распада. Биоматериалы. 2012. 33 (15): 3852–9.

    Артикул CAS Google ученый

  • 56.

    Cisneros DA, Hung C, Franz CA, Muller DJ. Наблюдение за этапами роста самосборки коллагена с помощью покадровой атомно-силовой микроскопии высокого разрешения. J Struct Biol. 2006. 154 (3): 232–45.

    Артикул CAS Google ученый

  • 57.

    Стамов Д.Р., Шток Э., Франц С.М., Янке Т., Хашке Х. Визуализация фибриллогенеза коллагена I типа с высоким пространственно-временным разрешением. Ультрамикроскопия. 2015; 149: 86–94.

    Артикул CAS Google ученый

  • org/ScholarlyArticle»> 58.

    Kadler KE, Holmes DF, Trotter JA, Chapman JA. Образование коллагеновых фибрилл. Biochem J. 1996; 316 (Pt 1): 1–11.

    Артикул CAS Google ученый

  • 59.

    Холмс Д.Ф., Чепмен Дж. А., Прокоп Д. Д., Кадлер К. Э. Кончики роста фибрилл коллагена I типа, сформированные in vitro, имеют форму, близкую к параболоидальной, что подразумевает реципрокную взаимосвязь между срастанием и диаметром. Proc Natl Acad Sci. 1992. 89 (20): 9855–9.

    Артикул CAS Google ученый

  • 60.

    Markiewicz P, Goh MC. Визуализация наконечника зонда с помощью атомно-силовой микроскопии и улучшение изображений с помощью простой процедуры деконволюции. Ленгмюра. 1994. 10 (1): 5–7.

    Артикул CAS Google ученый

  • org/ScholarlyArticle»> 61.

    Ван Дж. К., Тернер М. С., Агарвал Г., Квонг С., Джозефс Р., Феррон Ф. А. и др. Микромеханика изолированных серповидно-клеточных гемоглобиновых волокон: модули изгиба и упорные длины. J Mol Biol. 2002. 315 (4): 601–12.

    Артикул CAS Google ученый

  • 62.

    Sachse C, Grigorieff N, Fändrich M. Параметры наномасштабной гибкости амилоидных фибрилл Альцгеймера, определяемые с помощью электронной крио-микроскопии. Angew Chem Int Ed. 2010. 49 (7): 1321–3.

    Артикул CAS Google ученый

  • 63.

    Ноулз TPJ, Бюлер MJ. Наномеханика функциональных и патологических амилоидных материалов. Nat Nano. 2011; 6 (8): 469–79.

    Артикул CAS Google ученый

  • org/ScholarlyArticle»> 64.

    Усов И., Мезенга Р. FiberApp: программное обеспечение с открытым исходным кодом для отслеживания и анализа полимеров, нитей, биомакромолекул и волокнистых объектов. Макромолекулы. 2015; 48 (5): 1269–80.

    Артикул CAS Google ученый

  • 65.

    Cesconetto EC, Junior FSA, Crisafuli FAP, Mesquita ON, Ramos EB, Rocha MS. Взаимодействие ДНК с актиномицином D: механические измерения раскрывают детали данных связывания. Phys Chem Chem Phys. 2013. 15 (26): 11070–7.

    Артикул CAS Google ученый

  • 66.

    Риветти К., Гутхольд М., Бустаманте С. Сканирующая силовая микроскопия ДНК, нанесенной на слюду: уравновешивание по сравнению с кинетическим захватом, изученное с помощью статистического анализа полимерных цепей. J Mol Biol. 1996. 264 (5): 919–32.

    Артикул CAS Google ученый

  • 67.

    Ловелади Х. Х., Шашидхара С., Мэтьюз РГ. Удельная стойкость молекулярного коллагена I типа в растворителе.Биополимеры. 2014. 101 (4): 329–35.

    Артикул CAS Google ученый

  • 68.

    Плечи MD, Raines RT. Структура и стабильность коллагена. Анну Рев Биохим. 2009. 78 (1): 929–58.

    Артикул CAS Google ученый

  • 69.

    Холмс Д.Ф., Капальди М.Дж., Чепмен Дж.А. Восстановление фибрилл коллагена in vitro; процесс сборки зависит от процедуры запуска.Int J Biol Macromol. 1986. 8 (3): 161–6.

    Артикул Google ученый

  • 70.

    Фертала А., Холмс Д. Ф., Кадлер К. Э., Сьерон А. Л., Прокоп Д. Д.. Сборка in vitro тонких и толстых фибрилл коллагена II из рекомбинантного проколлагена II. Мономеры в концах толстых фибрилл имеют противоположную ориентацию по сравнению с мономерами в растущих концах фибрилл коллагена I. J Biol Chem. 1996. 271 (25): 14864–9.

    Артикул CAS Google ученый

  • 71.

    Антипова О., Оргель JPRO. In situ D-периодическая молекулярная структура коллагена II типа. J Biol Chem. 2010. 285 (10): 7087–96.

    Артикул CAS Google ученый

  • org/ScholarlyArticle»> 72.

    Рашид С., Нельсон-Рис, Вашингтон, Тотт Е.М., Арнштейн П., Гарднер МБ. Характеристика недавно полученной линии клеток саркомы человека (HT-1080). Рак. 1974. 33 (4): 1027–33.

    Артикул CAS Google ученый

  • 73.

    Geesin JC, Gordon JS, Berg RA. Регулирование синтеза коллагена в дермальных фибробластах человека солями натрия и магния аскорбил-2-фосфата. Skin Pharmacol. 1993. 6 (1): 65–71.

    Артикул CAS Google ученый

  • 74.

    Раско Джей Джей, Готтшалк Р. Дж., Джу С.Ф., Миллер А.Д. Повышенная эффективность трансфекции HT-1080, линии клеток фибросаркомы, с использованием SuperFect Reagent. Qiagen News Transfection 1997; (2).

  • org/ScholarlyArticle»> 75.

    Ли Д.А., Ассоку Э., Дойл В. Специфический количественный анализ синтеза коллагена клетками, засеянными биоматериалами на основе коллагена, с использованием преципитации сириуса красного F3B. J Mater Sci Mater Med. 1998. 9 (1): 47–51.

    Артикул CAS Google ученый

  • 76.

    Хан С., Макбрайд Д. Д., Лозерт В., Лейкин С. Сегрегация гомо- и гетеротримеров коллагена типа I в фибриллах. J Mol Biol. 2008. 383 (1): 122–32.

    Артикул CAS Google ученый

  • 77.

    Prockop DJ, Кивирикко К.И. Коллагены — молекулярная биология, болезни и возможности терапии. Анну Рев Биохим. 1995. 64 (1): 403–34.

    Артикул CAS Google ученый

  • org/ScholarlyArticle»> 78.

    Линневерс К.Дж., МакГрат М.Э., Армстронг Р., Мистри Ф.Р., Барнс М.Г., Клаус Дж.Л. и др. Экспрессия катепсина К человека в Pichia pastoris и предварительные кристаллографические исследования комплекса ингибиторов. Protein Sci. 1997. 6 (4): 919–21.

    Артикул CAS Google ученый

  • 79.

    Даунинг BPB, ван дер Хорст А, Мяо М., Кили Ф.В., Форд Н.Р. Исследование эластичности ShortProteins с помощью оптического пинцета », в Advances in Imaging, OSA Technical Digest (CD) (Optical Society of America, 2009), статья OTuA3. (См. Сайт публикации по адресу https://www.osapublishing.org/abstract. cfm? uri = OTA-2009-OTuA3 для информации)

  • 80.

    Фарре А., ван дер Хорст А., Блаб Г. А., Даунинг БПБ, Форд Н. Р. Растягивание отдельных молекул ДНК для демонстрации возможностей голографических оптических пинцетов с высокой силой. J Biophotonics. 2010. 3 (4): 224–33.

    Артикул Google ученый

  • 81.

    Берг-Соренсен К., Фливбьерг Х. Анализ спектра мощности для оптического пинцета. Rev Sci Instrum. 2004. 75 (3): 594–612.

    Артикул CAS Google ученый

  • 82.

    Bustamante C, Marko JF, Siggia ED, Smith S. Энтропическая эластичность ДНК лямбда-фага. Наука. 1994. 265 (5178): 1599–600.

    Артикул CAS Google ученый

  • 83.

    Марко JF, Siggia ED. Растяжка ДНК. Макромолекулы. 1995. 28 (26): 8759–70.

    Артикул CAS Google ученый

  • org/ScholarlyArticle»> 84.

    Ройтер Y, Минко S: 2D одиночные молекулы. 2005: Бесплатное ПО; доступно для загрузки по адресу http://people.clarkson.edu/~sminko/nanostructured/responsive-smart-materials/2D-single-molecules-software.html.

  • 85.

    Graham JS, Vomund AN, Phillips CL, Grandbois M. Структурные изменения в фибриллах коллагена человека I типа исследованы с помощью силовой спектроскопии.Exp Cell Res. 2004; 299 (2): 335.

    Артикул CAS Google ученый

    • Набор для ИФА человеческого проколлагена типа 1 (ab229389)

    Обзор

    • Название продукта

    • Метод обнаружения

      Флуоресцентный

    • Точность

      Интра-анализ
      Образец n Среднее SD CV%
      Сыворотка 8 1. 8%
      Промежуточный анализ
      Образец n Среднее SD CV%
      Сыворотка 3 3%

    • Тип образца

      Супернатант клеточной культуры, сыворотка, экстракты клеточных культур, тканевые экстракты, гепатоплазма, EDTA-плазма, Cit плазма

    • Тип анализа

      Сэндвич (количественный)

    • Чувствительность

      3. 7 пг / мл

    • Диапазон

      3,91 пг / мл — 16000 пг / мл

    • Восстановление

      Извлечение по образцу
      Тип образца Среднее% Диапазон
      Сыворотка 93 91% — 94%
      Среда для культивирования клеток 99 97% — 101%
      Плазма гепатита 101 94% — 107%
      Плазма ЭДТА 108 105% — 114%
      Cit плазма 106 102% — 110%

    • Время анализа

      1 ч. 30м

    • Продолжительность анализа

      Одностадийный анализ

    • Реактивность видов

      Реагирует с: Человек
      Не реагирует с: Корова

    • Обзор продукции

      Pro-Collagen I alpha 1 in vitro Набор CatchPoint SimpleStep ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) разработан для количественного измерения белка Pro-Collagen I alpha 1 в сыворотке, плазме, супернатантах клеточных культур, а также клетках и тканях. извлечь образцы.

      Этот набор CatchPoint SimpleStep ELISA оптимизирован для считывателей микропланшетов Molecular Devices . Щелкните здесь, чтобы просмотреть список рекомендуемых ридеров для микропланшетов.
      При использовании планшет-ридера Molecular Devices, поддерживаемого программным обеспечением SoftMax® Pro, предварительно настроенный протокол для этих наборов CatchPoint SimpleStep ELISA со всеми настройками протокола и анализа доступен на сайте www. softmaxpro.org.

      CatchPoint SimpleStep ELISA использует захватывающее антитело, меченное аффинной меткой, и детекторное антитело, конъюгированное с репортером, которые иммуно захватывают анализируемый образец в растворе.Весь этот комплекс (улавливающее антитело / аналит / детекторное антитело), ​​в свою очередь, иммобилизируется посредством иммуноаффинности антитела против метки, покрывающего лунку. Для проведения анализа в лунки добавляют образцы или стандарты, а затем смесь антител. После инкубации лунки промывают для удаления несвязавшегося материала. Добавлен раствор для разработки CatchPoint, содержащий субстрат Stoplight Red. Во время инкубации субстрат катализируется HRP с образованием флуоресцентного продукта. Сигнал генерируется пропорционально количеству связанного аналита, и его интенсивность измеряется в флюоресцентном считывающем устройстве при 530/570/590 нм возбуждение / отсечка / испускание.

    • Банкноты

      Коллаген I типа — это самый распространенный структурный белок соединительных тканей, таких как кожа, кости и сухожилия. Он синтезируется как проколлагеновая молекула, которая характеризуется трехспиральным доменом длиной 300 нм, фланкированным глобулярными N- и C-концевыми пропептидами. В частности, человеческий проколлаген I альфа 1 состоит из сигнального пептида (аминокислоты (аа) 1-22), пропептида (аа 23-161), зрелой цепи (аа 162-1218) и другого пропептида (аа 1219 — 1464).Неспиральные пропептиды удаляются за счет активности проколлагеновых N- и C-протеиназ, так что зрелые тройные спирали могут самособираться в коллагеновые фибриллы, которые обеспечивают прочность на разрыв тканям.

      Abcam не имеет и не намерена подавать заявку на получение разрешения REACH на использование клиентами продуктов, содержащих вещества, содержащиеся в Европейском разрешительном списке (Приложение XIV).
      В обязанности наших клиентов входит проверка необходимости применения авторизации REACH и любых других соответствующих разрешений для предполагаемого использования.

    • Платформа

      Предварительно покрытый микропланшет (стрипы 12 x 8 лунок)

    Недвижимость

    • Инструкция по хранению

      Хранить при + 4 ° C. См. Протоколы.

    • Компоненты 1 x 96 тестов
      100X Стоп-сигнал красный субстрат 1 x 120 мкл
      10X Человеческое Pro-Collagen I alpha 1 захватывающее антитело 1 x 600 мкл
      10X Человеческое детекторное антитело про-коллаген I альфа 1 1 x 600 мкл
      10X Промывочный буфер PT (ab206977) 1 x 20 мл
      500X Перекись водорода (h3O2, 3%) 1 x 50 мкл
      Раствор усилителя экстракции клеток 50X (ab193971) 1 x 1 мл
      5X Буфер для экстракции клеток PTR (ab193970) 1 x 10 мл
      Разбавитель антител CPI — блокатор HAMA (ab193969) 1 x 6 мл
      Проколлаген человека I альфа 1 Лиофилизированный рекомбинантный белок 2 флакона
      Пластинчатые уплотнения 1 шт.
      Разбавитель образца NS (ab193972) 1 x 50 мл
      96-луночный микропланшет SimpleStep Pre-Coated Black с черным покрытием 1 шт.
      Красный стоп-сигнал Буфер для подложки 1 x 12 мл

    • Направления исследований

    • Релевантность

      Коллагены высоко консервативны на протяжении всей эволюции и характеризуются непрерывным триплетным повторением «Glycine X Y», которое является необходимой частью тройной спиральной структуры.Коллаген I типа (95 кДа) обнаружен в костях, роговице, коже и сухожилиях. Мутации в кодирующем гене связаны с несовершенным остеогенезом, синдромом Элерса-Данлоса и идиопатическим остеопорозом. Взаимные транслокации между хромосомами 17 и 22, где расположены этот ген и ген бета-фактора роста, полученного из тромбоцитов, связаны с определенным типом кожной опухоли, называемой протуберанской дерматофибросаркомой, в результате нерегулируемой экспрессии фактора роста. Проколлаген 1 типа в основном синтезируется остеобластами и после расщепления N- и C-концевых пептидов удлинения используется для отложения фибрилл коллагена в ткани остеоида.

    • Сотовая локализация

      Секретный

    • Альтернативные названия

      • Коллаген Alpha 1 типа I
      • Коллаген Alpha 2 типа I
      • COL1A1
      • COL1A2

    • Ссылки на базу данных

    Изображения

    • Другое — набор для ИФА человеческого про-коллагена I альфа 1, флуоресцентный (ab229389)

      Технология

      SimpleStep ELISA позволяет формировать комплекс антитело-антиген за один этап, сокращая время анализа до 90 минут. Добавьте образцы или стандарты и смесь антител в лунки сразу, инкубируйте, промойте и добавьте окончательный субстрат. См. Подробное пошаговое руководство в протоколе.

    • Пример стандартной кривой человеческого Pro-Collagen I alpha 1 в разбавителе образца NS.

      Значения данных за вычетом фона (среднее +/- SD) нанесены на график.

    • Интерполированные концентрации нативного проколлагена I альфа 1 в образцах сыворотки и плазмы человека.

      Концентрации Pro-Collagen I alpha 1 были измерены в двух экземплярах, интерполированы из стандартных кривых Pro-Collagen I alpha 1 и скорректированы на разведение образца. Неразбавленные образцы представлены следующим образом: сыворотка 1%, плазма (цитрат) 1%, плазма (EDTA) 1% и плазма (гепарин) 1%. На графике нанесены интерполированные скорректированные значения коэффициента разбавления (среднее +/- SD, n = 2). Средняя концентрация проколлагена I альфа 1 составила 142,1 нг / мл в сыворотке, 135.9 нг / мл в плазме (цитрат), 112,1 нг / мл в плазме (EDTA) и 102,1 нг / мл в плазме (гепарин).

    • Интерполированные концентрации нативного проколлагена I альфа 1 в экстракте человеческого IMR-90 на основе загрузки экстракта 2 мкг / мл.

      Концентрации Pro Collagen I alpha 1 были измерены в двух экземплярах и интерполированы по стандартной кривой Pro Collagen I alpha 1 и скорректированы на разведение образца.На графике нанесены интерполированные скорректированные значения коэффициента разбавления (среднее +/- SD, n = 2). Средняя концентрация проколлагена I альфа 1 в экстракте IMR-90 составила 1,62 нг / мл.

    • Сыворотка десяти отдельных здоровых женщин-доноров была разведена 1: 200 и измерена в двух экземплярах.

      Интерполированные скорректированные значения коэффициента разбавления нанесены на график (среднее +/- SD, n = 2). Средняя концентрация проколлагена I альфа 1 составила 197.3 нг / мл в диапазоне 113,0–417 нг / мл.

    • Сэндвич-ИФА — набор для ИФА человеческого про-коллагена I альфа 1, флуоресцентный (ab229389)

      Чтобы узнать больше о преимуществах рекомбинантных антител, см. Здесь.

    Список литературы (0)

    ab229389 еще не упоминался в каких-либо публикациях.

    Отзывы и вопросы клиентов

    Проколлагеновый пептид типа III (PIIINP)

    Клиническое применение: Пептид проколлагена III типа является сывороточным маркером обмена коллагена и используется для оценки фиброза печени у пациентов, длительно принимающих метотрексат.
    Фон: PIIINP представляет собой аминоконцевой пептид проколлагена III типа, высвобождаемый из пептида-предшественника во время синтеза и отложения коллагена III типа. PIIINP в сыворотке может быть получен в результате синтеза нового коллагена III типа или в результате деградации существующих фибрилл коллагена III типа. Имеются доказательства того, что измерение PIIINP в сыворотке является эффективным неинвазивным тестом для обнаружения и мониторинга фиброза и цирроза печени, вызванного метотрексатом, а серийные измерения могут снизить потребность в биопсии печени. У дерматологических пациентов с повторяющимися нормальными уровнями PIIINP очень маловероятно значительное повреждение печени в результате фиброза или цирроза.И наоборот, высокий уровень PIIINP в сыворотке или ряд высоких значений могут указывать на то, что требуется биопсия печени, а в некоторых случаях следует отменить метотрексат.

    Обратите внимание, что уровень PIIINP может повышаться после перелома кости, а также у пациентов с ревматологическими заболеваниями, поскольку он может быть ложно повышен при воспалительном артрите.

    Референсные диапазоны: Рассмотреть возможность биопсии печени у взрослых пациентов, принимающих метотрексат от псориаза:
    Предварительная обработка PIIINP > 8.0 г / л
    PIIINP > 4,2 г / л в трех образцах за 12 месяцев
    PIIINP > 8,0 г / л в двух последовательных образцах
    Рассмотрите возможность отмены метотрексата:
    PIIINP > 10 г / л в трех образцах более 12 месяцев

    При принятии решения о проведении биопсии печени, отмене или продолжении лечения также необходимо учитывать тяжесть заболевания, возраст пациента и альтернативные методы лечения. Быстрое необычное падение или подъем, устойчивый нисходящий или продолжающийся восходящий тренд любого маркера требует осторожности и повышенной бдительности. [Руководство BSR / BHPR по модифицирующей болезнь терапии
    противоревматическими препаратами (DMARD) при консультации с Британской ассоциацией дерматологов-ревматологов; ревматология 2008]

    Сопутствующие болезни:
    Подготовка пациента: Не требуется
    Требования к образцу: Требуется образец сыворотки (SST).
    Срок выполнения: 4 недели
    Дополнительная информация:
    Рекомендованный тест: Рекомендованный тест
    Расположение: Специализированная пробирная лаборатория

    Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности.Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.

    Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

    Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

    • В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
    • Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались.Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, используйте кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
    • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
    • Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
    • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie.Вы должны отключить приложение при входе в систему или уточнить у системного администратора.

    Почему этому сайту требуются файлы cookie?

    Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.

    Что сохраняется в файлах cookie?

    Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

    Как правило, в файле cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

    Уровни пропептидов проколлагена типа III и типа I в сыворотке и жидкости бронхоальвеолярного лаважа пациентов с легочным саркоидозом

    Abstract

    Не существует единого теста для надежной оценки активности или прогноза легочного саркоидоза.В этом исследовании мы оценили два маркера проколлагена, аминотерминальный пропептид проколлагена типа III (PIIINP) и карбоксиконцевой пропептид проколлагена типа I (PICP) в сыворотке и жидкости бронхоальвеолярного лаважа (BALF) и сравнили их с другими маркерами болезни легочного саркоидоза. такие как сывороточный уровень ангиотензинпревращающего фермента (S-ACE) или сывороточный рецептор интерлейкина-2 (S-IL-2R). Бронхоальвеолярный лаваж был проведен у 40 пациентов с саркоидозом без (стадии 0-I) и у 20 пациентов с поражением паренхимы легких (стадии II-III), а также у 17 пациентов контрольной группы.Сыворотка (S) — и BALF-PIIINP и PICP, S-ACE, S-IL-2R, BALF-альбумин, BALF-лимфоциты и тучные клетки были определены у этих пациентов. BALF-PIIINP был явно и S-PIIINP слегка повышен при саркоидозе по сравнению с контролем. Точно так же BALF-PICP, но не S-PICP, был значительно выше при саркоидозе. BALF-PIIINP, но не BALF-PICP, коррелировал с уровнями S-ACE и S-IL-2R. Пациенты с паренхиматозным заболеванием легких имели более высокие уровни S-ACE и BALF-PIIINP, но ни S-IL-2R, S-PIIINP, ни S- или BALF-PICP не были повышены.S-PIIINP и S-IL-2R, но не S-ACE, были выше у пациентов с симптомами, чем у бессимптомных. Симптоматические пациенты с паренхиматозным заболеванием имели повышенный BALF-PIIINP, тогда как в группе симптоматических непаренхиматозных S-PIIINP был повышен. В заключение, это первое исследование по оценке карбоксиконцевого пропептида проколлагена I типа при саркоидозе и показало повышенные уровни в жидкости бронхоальвеолярного лаважа. В отличие от уровней аминотерминального пропептида проколлагена типа III в жидкости бронхоальвеолярного лаважа, уровни карбоксиконцевого пропептида проколлагена I типа не коррелировали с сывороточным уровнем ангиотензинпревращающего фермента и уровнями сывороточного рецептора интерлейкина-2, что позволяет предположить, что карбоксиконцевой пропептид проколлагена I типа может быть менее подходящим маркером заболевания при саркоидозе, чем аминоконцевой пропептид проколлагена типа III.Однако роль карбоксиконцевого пропептида проколлагена I типа как индикатора фиброгенеза требует дальнейшего изучения.

    Проколлаген-лизилгидроксилаза 2 необходима для индуцированного гипоксией метастазов рака молочной железы

    1 Сосудистая программа, Институт клеточной инженерии; 2 Институт генетической медицины МакКусика-Натанса; Кафедры 3 педиатрии, 4 онкологии, 5 медицины, 6 радиационной онкологии и 7 биологической химии Медицинского факультета Университета Джона Хопкинса; 8Johns Hopkins Physical Sciences — Онкологический центр; и 9 Кафедра химической и биомолекулярной инженерии, Университет Джона Хопкинса, Балтимор, Мэриленд

    1 Сосудистая программа, Институт клеточной инженерии; 2 Институт генетической медицины МакКусика-Натанса; Кафедры 3 педиатрии, 4 онкологии, 5 медицины, 6 радиационной онкологии и 7 биологической химии Медицинского факультета Университета Джона Хопкинса; 8Johns Hopkins Physical Sciences — Онкологический центр; и 9 Кафедра химической и биомолекулярной инженерии, Университет Джона Хопкинса, Балтимор, Мэриленд

    1 Сосудистая программа, Институт клеточной инженерии; 2 Институт генетической медицины МакКусика-Натанса; Кафедры 3 педиатрии, 4 онкологии, 5 медицины, 6 радиационной онкологии и 7 биологической химии Медицинского факультета Университета Джона Хопкинса; 8Johns Hopkins Physical Sciences — Онкологический центр; и 9 Кафедра химической и биомолекулярной инженерии, Университет Джона Хопкинса, Балтимор, Мэриленд

    1 Сосудистая программа, Институт клеточной инженерии; 2 Институт генетической медицины МакКусика-Натанса; Кафедры 3 педиатрии, 4 онкологии, 5 медицины, 6 радиационной онкологии и 7 биологической химии Медицинского факультета Университета Джона Хопкинса; 8Johns Hopkins Physical Sciences — Онкологический центр; и 9 Кафедра химической и биомолекулярной инженерии, Университет Джона Хопкинса, Балтимор, Мэриленд

    1 Сосудистая программа, Институт клеточной инженерии; 2 Институт генетической медицины МакКусика-Натанса; Кафедры 3 педиатрии, 4 онкологии, 5 медицины, 6 радиационной онкологии и 7 биологической химии Медицинского факультета Университета Джона Хопкинса; 8Johns Hopkins Physical Sciences — Онкологический центр; и 9 Кафедра химической и биомолекулярной инженерии, Университет Джона Хопкинса, Балтимор, Мэриленд

    1 Сосудистая программа, Институт клеточной инженерии; 2 Институт генетической медицины МакКусика-Натанса; Кафедры 3 педиатрии, 4 онкологии, 5 медицины, 6 радиационной онкологии и 7 биологической химии Медицинского факультета Университета Джона Хопкинса; 8Johns Hopkins Physical Sciences — Онкологический центр; и 9 Кафедра химической и биомолекулярной инженерии, Университет Джона Хопкинса, Балтимор, Мэриленд

    1 Сосудистая программа, Институт клеточной инженерии; 2 Институт генетической медицины МакКусика-Натанса; Кафедры 3 педиатрии, 4 онкологии, 5 медицины, 6 радиационной онкологии и 7 биологической химии Медицинского факультета Университета Джона Хопкинса; 8Johns Hopkins Physical Sciences — Онкологический центр; и 9 Кафедра химической и биомолекулярной инженерии, Университет Джона Хопкинса, Балтимор, Мэриленд

    1 Сосудистая программа, Институт клеточной инженерии; 2 Институт генетической медицины МакКусика-Натанса; Кафедры 3 педиатрии, 4 онкологии, 5 медицины, 6 радиационной онкологии и 7 биологической химии Медицинского факультета Университета Джона Хопкинса; 8Johns Hopkins Physical Sciences — Онкологический центр; и 9 Кафедра химической и биомолекулярной инженерии, Университет Джона Хопкинса, Балтимор, Мэриленд

    .

    No related posts.

    Предыдущая запись
    Следующая запись

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

    *
    *

    2015-2019 © MULTI CROSS - интернет-магазин одежды для спорта и отдыха.
    РФ, г. Новосибирск

    Карта сайта