Денатурация коллагена: Радиочастотный лифтинг: инновации | Медиолан
Радиочастотный лифтинг: инновации | Медиолан
Процедура радиочастотного лифтинга используется в косметологии уже более 5 лет. Показаниями к данному виду воздействия являются снижение тонуса и эластичности кожи лица и тела, изменение ее рельефа вследствие перенесенной угревой болезни. Хорошие результаты получены также при лечении атрофических и гипотрофических рубцов. Сегодня в Европе и России появляются новые методики, позволяющие улучшить результаты RF-процедур.
Формула
В основе применения электрического тока радиочастотного диапазона в эстетической медицине, лежит определенный физический закон, который заключается в зависимости энергии электромагнитного поля в обрабатываемой зоне от электрического заряда, сопротивления (импеданса) тканей и времени воздействия по формуле
J = I x R x T
где:
J — энергия,
I— ток,
R — импеданс тканей,
T — время.
При прохождении тока по тканям выделяемая электромагнитная энергия встречает сопротивление, превращающее ее в термическую энергию.
Глубина и степень теплового эффекта зависят от проводимости обрабатываемых структур и времени воздействия.
Коллаген
При температуре 45°С коллаген частично денатурирует, что приводит к его перестройке за счет разрыва межмолекулярных связей. Это обеспечивает увеличение плотности дермы и способствует формированию подтягивающего эффекта, видимого при объективном исследовании — как визуальном, так и на ощупь. Как показывает гистологическая экспертиза, такое термическое влияние электрического тока на волокна приводит к протеосинтетическому увеличению и производству коллагена типа I. Частичная денатурация коллагена происходит сразу же, в то время как секреторное увеличение наступает позже, поэтому эффект от курса процедур оценивается лишь шесть месяцев спустя.
Для достижения необходимой денатурации волокон коллагена следует в процессе процедуры контролировать температуру и время воздействия. Даже при температуре 430С, но продолжительности воздействия более 20 минут отмечается денатурация белковых волокон в обрабатываемой зоне. Поэтому наряду с получением моментального эффекта подтяжки кожи крайне важно не допустить необратимых последствий — разрушения белка.
Методики
Существуют моно — и биполярные методики радиочастотного лифтинга. В первом случае рабочая манипула представляет собой активный электрод или полюс, при этом пассивный электрод накладывается на необрабатываемую поверхность. Электрическая цепь замыкается, и ток течет между двумя полюсами, прогревая ткани на глубину до 1,5 см. Данный метод больше подходит для коррекции проблем кожи тела.
В 2010 году на российском рынке появились мультиполярные манипулы, которые работают по принципу монополярных и применяются в том случае, когда обработке необходимо подвергнуть большую площадь кожи. По такой манипуле ток как бы «пробегает волной», обеспечивая равномерное воздействие на всю обрабатываемую поверхность. При этом глубина проникновения электромагнитного поля, как и при проведении монополярного метода, составляет 1,5 см.
RF-аппараты, действующие по биполярному принципу, снабжены манипулой, в которой присутствуют оба полюса сразу. В этом случае глубина проникновения электромагнитного поля равна половине расстояния между полюсами и составляет, как правило, 3-5 мм. Поскольку два электрода помещены в одну манипулу, воздействие является более локальным и ограничено площадью самой манипулы. Триполярные и шестиполярные манипулы являются разновидностью биполярных манипул.
Из вышеизложенного следует, что монополярную методику RF-воздействия целесообразнее применять для улучшения плотности и эластичности кожи тела, а биполярную — при работе с кожей лица.
Температура
Для контроля температурного режима во время процедуры на приборах радиочастотного лифтинга имеются специальные датчики. При резком повышении температуры дермы специалист должен сам принимать решение о прекращении процедуры. Некоторые аппараты измеряют температуру обрабатываемой поверхности с точностью до десятых долей градуса и подают специалисту звуковой сигнал, предупреждающий о повышении температуры дермы и моменте достижения наивысшего значения этого параметра. Известно, что коллаген необратимо денатурирует при температуре свыше 50°С. Но если время воздействия составляет не более 15 секунд, то при 45-50°С разрушение коллагена не происходит. В то же время длительный нагрев в течение 15-20 минут может привести к необратимым последствиям даже при нагревании до 43-44°С.
В 2010 году была предложена новая методика, которая предполагает трёхкратное воздействие на каждую зону. Сначала кожа прогревается до 45°С, а затем, при вотором и третьем воздействии, температура увеличивается каждый раз на 1,5°С. Важно, чтобы при достижении максимальной температуры дермы время воздействия не превышало 8 секунд. Такой подход является оптимальным: температура дермы увеличивается до 48°С, не происходит необратимых изменений коллагена, максимально стимулируется функция фибробластов, у пациента не возникает болевых ощущений, сокращается время процедуры. При использовании этого метода процедуры проводят с интервалом 10-15 дней, а не 5-7 как ранее. На курс требуется 10 процедур, первые восемь их них проводятся один раз в 10-15 дней, последующие две — один раз в месяц.
Увеличение продукции коллагена происходит в течение полугода, достигнутые результаты сохраняются на протяжении 2-3 месяцев. Далее в течение полугода количество и качество коллагеновых волокон начинает снижаться, поэтому через 6-8 месяцев чаще всего требуется поддерживающий курс, состоящий из 4-5 процедур, проводимых 1 раз в 10-15 дней.
Результаты
Синтез коллагена — сложный процесс, протекающий при участии многих ферментов и метаболитов. Так, при недостатке аминокислот, витаминов, минералов, кислорода даже самые эффективные методы стимуляции работы фибробластов не дадут результатов. Негативные факторы внешней среды, чрезмерная инсоляция, вредные привычки, прием глюкокортикоидов — все это ведет к преждевременному разрушению коллагена, поэтому длительность эффекта при проведении курса процедур RF-лифтинга в таких условиях заметно сокращается. Образование нового коллагена в организме — относительно медленный процесс: видимый эффект моментального лифтинга сохраняется в течение 1-3 дней после процедуры, а основной результат можно наблюдать только через несколько месяцев.
Свойства белка коллагена — Docsity
C03. Строение и функции коллагенаСтроение Строение и функции коллагенаи Строение и функции коллагенафункции Строение и функции коллагенаколлагена 1) Молекулы коллагенов 1, 2, 3, 5, 6 образованы тремя полипептидными цепями (первичная структура), каждая из которых скручена в левую спираль(вторичная структура), а эти спиральные цепи скручены вместе в правую суперспираль (третичная структура). Тройная спираль стабилизирована водородными связями и водными мостиками. Остатки лизина участвуют в образовании ковалентных связей между молекулами коллагена при сборке коллагеновых фибрилл. Пептидные цепи коллагена 4 сохраняют концевые глобулярные домены. Взаимодействуя глобулярными С- концевыми доменами, молекулы образуют димеры, а при взаимодействии N-концевыми доменами- тетрамеры (это четвертичные структуры). К ним конец в конец добавляются латеральные взаимодействия трехцепочечных спиральных доменов, в том числе с образованием суперспиралей. В результате получается гексагональная структура с ячейками 170 нм. То есть функция доменов-структурная, соединяющая2) Коллагены — семейство родственных фибриллярных белков Белки фибриллярные Имеют структуру в виде нити, не растворяются в воде и имеют массу молекулы очень большую, структура которой приходит в устойчивое состояние благодаря взаимодействиям между разными цепями полипептидов. К фибриллярным белкам относятся: кератины (волосы и иные роговые покровы), эластин (сосуды и легкие), коллаген (сухожилия и хрящи). Коллаген Является компонентом соединительной ткани совместно с эластином. Коллагеновые фибриллы очень прочны, выдерживают огромную нагрузку и не растягиваются. Этот белок выполняет множество функций: -защитную, характеризующуюся обеспечением прочности тканей и их защитой от травм; -опорную, обусловленную скреплением органов и формированием их форм; -восстановительную, характеризующуюся регенерацией на клеточном уровне. Также коллагены придают тканям эластичности, предотвращают развитие меланом кожи, участвуют в образовании оболочек клеток. Кератины (альфа и бета) Альфа-кератины формируют покровы, которые выполняют защитную функцию. Они представлены в сухом весе волос, ногтей, перьев, шерсти, панцирей и так далее. Эластин Имеет резиноподобные свойства. Его нити, которые находятся в легочной ткани, сосудистых стенках и связках, могут растягиваться во много раз больше своей обычной длины. Эластин обеспечивает растяжение и сжатие органов, артерий, сухожилий, кожи и прочего. Он помогает органам восстанавливать первоначальные размеры после растяжения.
3) Коллаген относится к простым белкам. Макромолекула состоит только из остатков α-аминокислот. Простетическая группа отсутствует
4) Воздействия на коллаген: Нагревание при 80 градусах Происходит денатурация белка. Сначала разрушаются межмолекулярные связи между тропоколлагеновыми единицами,т.е. разрушается четвертичная структура. Затем разрушаются водородные связи между а- спиралями, соединенными в тройную суперспираль, т.е. разрушается третичная структура. Затем происходит разрушение связей внутри а-спирали, т.е. происходит разрушение вторичной структуры. Длительное воздействие такой высокой температуры может привести к разрыву пептидных связей. В результате образуется глютин, который в отличие от нативного коллагена не только хорошо набухает, но при температуре 40°С и выше неограниченно растворяется в воде. Действие концентрированной соляной кислоты В присутствии сильной кислоты группы основного характера в белковых цепях становятся
Изменение белков рыбы при тепловой обработке.
Поможем написать любую работу на аналогичную тему
Получить выполненную работу или консультацию специалиста по вашему учебному проекту
Узнать стоимостьИзменение мышечных белков. По мере прогревания кусков рыбы, происходит денатурация мышечных белков. Начинается она при довольно низкой температуре(30-35С). В интервале 60-65С денатурация идет быстро и к 80С денатурирует около 90-95% белков. Денатурация белков вызывает их свертывание, гели мышечных волокон(миофибрилл) уплотняются. При этом уменьшается гидратация и выпресовывается значительная часть воды вместе с растворенными в ней веществами (минеральные, экстрактивные, витамины). В результате уменьшается диаметр мышечных волокон, снижаются пищевая ценность продукта и масса п/ф. Чем выше температура нагрева, тем интенсивнее уплотнение волокон и больше потери массы и растворимых веществ. Поэтому рыбу рекомендуется варить и припускать при температуре 80-85С, вследствие чего мышечные волокна уплотняются в меньшей степени. При варке и припускании часть растворимых белков прежде, чем они денатурируют, переходит в бульон. Кол-во их невелико и не превышает 1% общего содержания. В дальнейшем эти белки так же денатурируют и свертываются, образуя хлопья на поверхности бульона(пену). Помимо свертывания, при тепловой обработке рыбы частично происходят и гидролитические процессы. Изменение белков соединительной ткани. Соединительная ткань состоит в основном из белка коллагена. Он так же входит в состав органической части костей, кожи, чешуи, жаберных крышек, костных жучков осетровых рыб и т.д. При нагревании рыба так же, как и при тепловой обработке мяса, коллагеновые пучки соединительной ткани в присутствии воды набухают. Дальнейшее нагревание приводит к разрыву межмолекулярных связей и уменьшению длины волокон примерно на 1/3 их первоначальной длины(сваривание или усадка). В результате денатурации объем куска рыбы сокращается, но менее значительно, чем у мяса. В кожных покровах рыбы сваривание коллагена вызывает большее сокращение линейных размеров(усадку) кожи, чем мышечной ткани. Это приводит к деформации кусков, поэтому перед тепловой обработкой на коже п/ф делают надрезы. Кожа рыбы после тепловой обработки сравнительно хорошо усваивается, т.к. коллаген после денатурации легче разрушается протеалетическими ферментами пищеварительного тракта. При дальнейшем нагреве происходит деструкция коллагеновых волокон — распад их на отдельные полипептидные цепочки (дезагрегация коллагена). В результате коллаген превращается в растворимый глютин (желатин). Переход коллагена в глютин — основная причина размягчения рыбы, уменьшения механической прочности ее тканей. При чрезмерно продолжительной тепловой обработке весь коллаген превращается в глютин, мышцы распадаются на миокомы, в результате качество готовых изделий ухудшается.
Внимание!
Если вам нужна помощь в написании работы, то рекомендуем обратиться к профессионалам. Более 70 000 авторов готовы помочь вам прямо сейчас. Бесплатные корректировки и доработки. Узнайте стоимость своей работы.
1 | 1 января 2016 г.-31 декабря 2016 г. | Фототермические и фотомеханические эффекты в лазерной инженерии соединительных тканей. |
Результаты этапа: 1. Определены температуры, достигаемые на внешней поверхности сосуда и степени денатурации коллагена венозной стенки в зависимости от мощности лазерного излучения с длиной волны 1.47 мкм при разных скоростях тракции с использованием световода с радиальным типом излучения. 2. Определены критические температуры и мощности излучения для полной деградации матрикса венозной стенки в присутствии крови и без нее при воздействии волоконных лазеров с излучением на длинах волн 0. 97, 1.56 и 1.68 мкм с использованием световода с торцевым типом излучения. 3. Определены типы повреждений и модификаций матрикса ткани при воздействии лазерного излучения с параметрами, ниже критических. 4. Определены критические температуры и мощности излучения для полной деградации коллагена связки при воздействии лазерного излучения с длиной волны 1.56 мкм. Обнаружено изменение механических свойств связки. | ||
2 | 1 января 2017 г.-31 декабря 2017 г. | Фототермические и фотомеханические эффекты в лазерной инженерии соединительных тканей. |
Результаты этапа: 1. Выявлены особенности модификации коллагенового каркаса ткани связки и венозной стенки. Показана предденатурационная модификация коллагенового каркаса. 2. Выявлены особенностей термических и лазерно-индуцированных процессов в крови. Определены температурные пороги денатурации белков, коагуляции клеток, термодеструкции и окислительной деструкции органических соединений. 3. Определены порогов термической и лазерной денатурации коллагена в ткани с разнонаправленными коллагеновыми волокнами – коже. Показано, что температура начала денатурации зависит от длины аолны и мощности излучения. 4. Создана феноменологической модели процессов в венозной стенке в условиях эндовенозной лазерной абляции. Модель включает нагрев, превращение элементов крови, теплоотвод к стенке сосуда и ее деградацию. | ||
3 | 1 января 2018 г.-31 декабря 2018 г. | Фототермические и фотомеханические эффекты в лазерной инженерии соединительных тканей. |
Результаты этапа: 1. Определены пороги термической и лазерной денатурации коллагена в ткани с ламельной укладкой коллагеновых волокон – склере и роговицы.Показано, что при лазерном нагреве денатурация происходит при более низких температурах, чем при нагреве в печи калориметра. 2. Определены индуцируемые лазерным излучением морфологические изменения тканях связки, кожи, склеры. Показано, что неоднородный лазерный нагреве приводит к низкотемпературной дезорганизации коллагенового каркаса ткани. Особенности дезорганизации зависят от характера укладки волокнистых структур в интактной ткани. 3. Показано, что неоднородный лазерный нагреве приводит к низкотемпературной дезорганизации коллагенового каркаса ткани. Установлено, что при лазерном нагреве происходит разволокнение крупных структур (пучков, ламелл) с искажением (дивиргенцией) хода волокон, в то время как при традиционном нагреве происхродит слияние пучков и ламелл. |
Термическая обработка мясопродуктов
Колбасные изделия, кроме сырокопченых, большинство изделий из свинины непосредственно после посола или после копчения варят. При этом сырой продукт доводится до состояния, при котором его можно употреблять в пищу без нагрева, и повышается стойкость продукта при хранении. При варке в продукте происходят: тепловая денатурация белковых веществ, сваривание и гидротермический распад коллагена, плавление твердых триглицеридов жировой ткани, изменения экстрактивных веществ и витаминов, отмирание вегетативных форм микроорганизмов. В результате происходящих при тепловой обработке физико-химических изменений составных частей мясопродуктов — белков, жиров, витаминов, экстрактивных веществ они приобретают соответствующий вкус, запах, цвет и консистенцию.
Денатурация белковых веществ
Основное внимание при тепловой обработке обращают на денатурационные изменения белковых веществ. Современный уровень знаний структуры белковой молекулы позволяет представить денатурацию как любую модификацию вторичной, третичной или четвертичной структуры белковой молекулы, если она не сопровождается разрывом ковалентных связей.
В процессе тепловой денатурации белков изменяется природная пространственная конфигурация белковых молекул, уменьшается их гидратация и растворимость. Происходит резкое снижение или полная потеря ферментативной и гормональной активности белков. Белковым веществам в нативном состоянии свойственна уникальная, строго определенная структура. В денатурированном виде эти вещества могут иметь различные неспецифические структуры в зависимости от типа и степени денатурации. Происходит дезорганизация нативной структуры белковой молекулы, которая приобретает более рыхлую открытую конфигурацию. Степень денатурации зависит от того, какая затронута структура: вторичная, третичная или четвертичная.
При денатурации глобулярных белков разрушаются α-спиральные участки макромолекулы, в результате чего молекула белка теряет α-спиральное строение и приобретает β-складчатую структуру. При этом образуется рыхлый хаотический клубок, пропитанный водой. Таким образом, в основе денатурации лежат изменения структурного характера белковой молекулы, т. е. конформационные изменения, которые приводят к изменению сродства молекулярной поверхности к окружающей среде. Следствием этого является изменение растворимости и гидратации белков.
Возникновение новых связей между пептидными цепями в белковой молекуле приводит к уменьшению числа гидрофильных центров путем блокирования полярных группировок в результате их взаимодействия друг с другом. В результате изменений пространственной природной конфигурации обнаруживаются гидрофобные группы белковых молекул. Процесс денатурации белков может рассматриваться как один из факторов, способствующих вторичному структурообразованию. Нарушенные во время денатурации связи хаотично восстанавливаются по новым местам в процессе коагуляции, способствуя образованию белкового структурированного каркаса. В результате денатурации вязкость растворов белка повышается, что обусловлено агрегацией денатурированных молекул, изменением формы или степени гидратации белковых молекул, а также развертыванием полипептидных цепей.
При тепловой денатурации происходит разрыв не всех водородных связей, удерживающих полипептидные цепи в белковой молекуле. В связи с этим степень денатурации может быть различной — от незначительных структурных изменений до существенного нарушения взаимного расположения пептидных цепей. При незначительных изменениях белковой молекулы возможно частичное восстановление ее исходных свойств.
Характер изменений белков зависит от температуры и условий нагрева. При разработке режимов тепловой обработки мясопродуктов необходимо учитывать, что температура и продолжительность обработки должны быть минимально необходимыми соответственно особенностям состава и свойств продукта. Это обусловлено зависимостью переваримости продуктов от глубины развития коагуляционных процессов. Чрезмерно продолжительный нагрев мяса может снизить его пищевую ценность.
Влияние тепла на миофибриллярные белки (миозин, актин) обнаруживается уже при температуре 40° С. В первую очередь денатурации подвергается миозин; при нагреве при 40° С в течение 3 ч его ферментативная активность снижается на 50%. При 50° С денатурация становится значительной, а при 70° С денатурация миофибриллярных белков в основном заканчивается. При нагреве до 50° С большая часть белков саркоплазмы денатурирует, однако некоторые белки саркоплазмы, такие как глобулин, денатурируются не полностью даже при 70° С. При 70° С начинается денатурация Mb и Hb, при этом ослабевает связь между гемом и глобином и изменяется окраска мяса. Наряду с этим даже при 100° С некоторые белки мяса не теряют растворимости. В мясе, подвергнутом посолу, возрастает устойчивость белков к тепловой денатурации.
Жесткость вареных мясопродуктов зависит от влажностного состояния денатурированных белков, которое в свою очередь зависит от степени коагуляции белков, глубины предварительного автолиза мяса и pH среды, в которой происходит тепловая обработка. Жесткость продукта возрастает с увеличением степени обезвоживания. При тепловой обработке мышечные волокна уплотняются, уменьшается их диаметр, разрушаются ядра. При более продолжительном нагреве и повышении температуры снижается содержание воды в мясе, что увеличивает его жесткость. При этом значительно увеличивается усилие резания, например при варке свинины при 100° С в течение 1 ч оно повышается в 2,5 раза.
При тепловой обработке парного мяса потери влаги минимальны и максимальны для мяса в состоянии окоченения, такое мясо отличается высокой жесткостью. Нежность и сочность мяса после тепловой обработки зависят от степени его созревания. Это необходимо учитывать при выработке мясопродуктов. Изменение водосвязывающей способности мяса при тепловой обработке зависит от величины pH. С повышением температуры нагревания водосвязывающая способность гомогенизированного свиного мяса уменьшается в различной степени в зависимости от pH сырого мяса. При тепловой обработке происходит заметное повышение pH ткани, что влияет на водосвязывающую способность мяса и обусловлено сокращением кислых групп без одновременного уменьшения основных групп. Р. Хамм показал, что происходит сокращение связывающих пигмент кислых групп до 50—55% от первоначального количества и наиболее заметные сокращения наблюдаются при температуре в интервале 70—120° С.
Одним из характерных признаков денатурации белковых веществ является увеличение числа SH-групп, которые в нативном белке входят в конфигурацию молекулы в более сложных сочетаниях либо не обнаруживаются или же выявляются не полностью.
Повышение водосвязывающей способности вареных мясопродуктов достигается добавлением к мясу фосфатов или органических кислот — уксусной или молочной. При добавлении кислот происходит сдвиг pH от изоэлектрической точки. При повышении сочности мяса его жесткость снижается.
При термической обработке фаршевых изделий ввиду разрушения клеточной структуры мяса характер коагуляционных процессов отличается от происходящих в неразрушенной мышечной ткани. Белковые частицы связаны друг с другом молекулярными силами сцепления, в результате чего образуется сплошная сетка с прочно удерживаемыми частицами воды. Образованный вокруг дисперсных частиц сольватный слой препятствует агрегации белковых молекул. Увеличение степени измельчения мяса способствует увеличению водосвязывающей способности фарша. Это обусловлено возможным разрывом нативных связей, соединяющих нити фибрилл, и образованием коллоидной системы, которая связывает значительное количество воды.
Изменения свойств коллагена
В формировании качества мяса и мясопродуктов важное значение имеет изменение структуры коллагена при нагреве. При нагреве во влажном состоянии до 58—62° С происходит сваривание коллагена. Коллагеновые волокна деформируются, укорачиваясь и утолщаясь. Их структура разрыхляется, а прочность тканей, в которые входят эти волокна, ослабляется. При денатурации коллагена тройные плотно свитые спирали нативного коллагена перестраиваются в одноцепные, беспорядочно свернутые молекулы. Дезагрегация этих спиралей происходит в результате разрыва водородных связей и солевых мостиков в три стадии: разрыв связей внутри длинных полипептидных цепей, разрыв боковых связей между цепями и разрыв водородных связей между пептидными цепями и молекулами воды. Полный гидролиз коллагена происходит при нагреве при 126° С в течение 3 ч.
Увеличение водосвязывающей способности и выходов достигается при глубоком гидролизе коллагена, продукты которого могут значительно повысить сочность изделий. Однако достаточно глубокий гидролиз коллагена достигается при жестких режимах обработки, приводящих к снижению качества продукта. Сваривание и гидротермическая дезагрегация коллагена сопровождаются снижением прочностных характеристик нагреваемых продуктов. При достаточно длительном нагреве сваренного коллагена происходит его дезагрегация с превращением в глютин. Переход коллагена в глютин способствует повышению усвояемости мясопродуктов и снижает прочность соединительной ткани. Коллаген становится доступным действию пепсина и трипсина. При этом снижаются потери воды и содержащихся в ней экстрактивных веществ. Продолжительный нагрев при высокой температуре приводит к нежелательному разрушению структуры мяса, вплоть до разволокнения, вследствие дезагрегации соединительнотканных прослоек между волокнами и пучками волокон.
Жесткость мяса с небольшим содержанием соединительной ткани возрастает с увеличением продолжительности термической обработки. При высоком содержании соединительной ткани или при наличии легко разваривающейся соединительной ткани уменьшается жесткость при более продолжительной варке. Следовательно, кулинарная готовность мясопродуктов с небольшим содержанием соединительной ткани определяется денатурационными изменениями белков саркоплазмы и миофибрилл. Кулинарная готовность мяса с высоким содержанием соединительной ткани определяется глубиной распада коллагена. По данным ВНИИМПа, в свином окороке после обычной варки распаду подвергается 35—40% коллагена; скорость распада коллагена при нагреве возрастает с увеличением степени измельчения соединительной ткани. По данным Института питания АМН СССР, состояние кулинарной готовности говяжьего мяса достигается, когда распаду подвергается 20—45% коллагена соединительной ткани. Процесс разваривания коллагена мяса птиц и свиней происходит значительно быстрее, чем коллагена говядины и баранины; мяса молодых животных — быстрее, чем мяса старых животных. Особенно медленно разваривается соединительная ткань субпродуктов.
Замедление гидролиза коллагена с возрастом животных обусловлено изменением пространственного расположения полипептидных цепей и образованием новых эфирных связей и прочных покрытий из мукополисахаридов и глюкопротеинов коллагеновой фибриллы, делающих ее нерастворимой.
Формирование вкуса, аромата и окраски мясопродуктов при термической обработке
При тепловой обработке глубоким изменениям подвергаются экстрактивные вещества мышечной ткани, что играет решающую роль в образовании специфических аромата и вкуса вареных продуктов. Часть экстрактивных веществ, а также соли и нитрита при варке изделий переходит в бульон и теряется.
Из аминокислот при окислительном дезаминировании образуются алифатические альдегиды, например из лейцина образуется изовалерьяновый альдегид. Из метионина образуется метиональ, обладающий мясным ароматом.
При выплавлении из жира высвобождаются некоторые летучие соединения, что сообщает дополнительный аромат мясу и бульону. Условия тепловой обработки наряду с качеством исходного сырья играют важную роль в образовании аромата и вкуса мяса. Выбор оптимальных условий тепловой обработки (температуры, метода, греющей среды) обеспечивает получение готового продукта с максимальным содержанием летучих веществ, участвующих в образовании аромата. Образцы мяса, подвергнутые более мягким режимам тепловой обработки, обладали более выраженным ароматом, содержали большее количество карбонильных соединений и летучих жирных кислот. При чрезмерно продолжительной варке разрушаются соединительнотканные оболочки, связывающие мышечные пучки, увеличиваются потери экстрактивных веществ, мясо становится волокнистым, теряет вкусовые свойства.
При термической обработке мяса важное значение имеют изменения миоглобина, определяющие окраску мяса. При 60° С красная окраска сохраняется внутри куска мяса, при 60—70° С мясо окрашивается в розовый цвет, а при 70—80° С и выше становится серо-коричневым, что соответствует полной денатурации миоглобина.
Во время нагрева изделий, при посоле которых использованы нитриты, происходит ускоренное образование MbNO, что улучшает окраску. Чем выше темп нагрева в интервале 35—50° С и быстрее денатурация белков, в частности Mb, тем менее выражено положительное влияние тепловой обработки на стабильность окраски. Однако значительное снижение скорости нагрева также отрицательно влияет на качество продукта. При обжарке и варке происходит фиксация окраски в результате превращения MbNO в NO-миохром (нитрозогемохромоген). При тепловой обработке увеличивается также стойкость окраски изделий, что обусловлено различием в стойкости гемовых и геминовых соединений, тепловой инактивацией тканевых и микробных ферментов. Важное значение для сохранения окраски имеет инактивация микроорганизмов, в частности протеолитических.
Изменения состава и пищевой ценности продукта
При тепловой обработке продукта вместе с выделяющейся водой могут быть удалены ценные в пищевом отношении вещества — водорастворимые белки, жиры, витамины, макро- и микроэлементы, экстрактивные вещества. При нагревании продуктов происходит распад белков и других высокомолекулярных и низкомолекулярных азотистых веществ, в том числе аминокислот — цистина до 44%, пролина до 33%, лизина до 2%. Это снижает пищевую ценность и выход готового продукта. Потери при варке зависят от режима и способа варки, pH среды, содержания соли, наличия оболочки на поверхности изделий, введения фосфатов. Потери увеличиваются при снижении pH, повышении температуры и длительности варки.
При варке изделий в воде наибольшие изменения наблюдаются в первые 30 мин — это потери белков, экстрактивных веществ, минеральных веществ. При варке окороков в течение 4—6 ч потери достигают 18—20%, а кусков свинины массой 0,4—0,5 кг — 30—35 %. Таким образом, потери находятся в обратной зависимости от размеров изделий. Потери при варке колбас незначительны по сравнению с потерями при варке мяса, что обусловлено низкой влагопроницаемостью оболочки.
При варке изделий из свинины их помещают в воду температурой 95° С и выдерживают 30 мин; это приводит к коагуляции белков в поверхностном слое и снижению чрезмерных потерь белков, влаги и экстрактивных веществ. При нагреве мяса после укладки в холодную воду потери белков и экстрактивных веществ поверхностного слоя значительно выше. Белковые вещества, растворенные в воде, при варке коагулируют и образуют пену на поверхности. При варке паром или паровоздушной смесью снижаются потери составных частей продукта по сравнению с варкой в воде, так как практически отсутствуют потери в греющую среду, обусловленные диффузией, получают менее жесткий и более сочный продукт с хорошим ароматом и вкусом.
При варке изделий из свинины выплавляется и переходит в воду некоторая часть жира. Жир сначала плавится, а затем коалесцирует, образуя в клетке гомогенную фазу в виде капли. Значительная часть жира эмульгируется, что вызывает помутнение бульона. Происходит увеличение кислотного, перекисного и ацетильного числа жира. Рост кислотного числа свидетельствует о гидролитическом распаде жира, а ацетильного — о присоединении гидроксильных групп к жирнокислотным радикалам. Уменьшение йодного числа свидетельствует о насыщении непредельных связей радикалов жирных кислот. Все это приводит к некоторому снижению пищевой ценности жира.
Имеющиеся данные по изменению атакуемости белков мяса после тепловой обработки противоречивы. Однако большинство авторов приходит к выводу, что значительного влияния нагрев при температурах ниже 100° С на изменение биологической ценности не оказывает. Качество продукта при тепловой обработке при температуре до 100° С повышается — улучшаются вкус, аромат, переваримость, усвоение; при температуре выше 100° С происходит некоторая потеря биологической ценности мяса. В целом мясо после тепловой обработки становится более доступным действию протеолитических ферментов.
При тепловой денатурации белков нарушается структура белковых молекул. При этом их внутренние пептидные связи становятся более доступными действию пищеварительных ферментов, а поэтому умеренно денатурированные белки лучше перевариваются в желудочно-кишечном тракте.
Главной причиной снижения усвояемости белков является чрезмерная тепловая обработка при изготовлении продукта с применением жестких температурных режимов. Умеренная тепловая обработка улучшает перевариваемость вследствие денатурации нативных белков. Из аминокислот наиболее подвержен различным воздействиям лизин, что объясняется повышенной реактивностью его свободных NH2-групп. С лизином могут реагировать карбонильные группы восстанавливающих сахаров (реакция Майяра) и др. вещества (окисленные жиры). Быстро разрушаются серосодержащие аминокислоты — цистин и цистеин. Степень термического повреждения аминокислот снижается в среде с высоким содержанием воды.
Наряду с этим при термической обработке в результате взаимодействия аминокислот с жирными кислотами возможно образование соединений, трудно поддающихся расщеплению протеолитическими ферментами. Снижение биологической ценности мяса возможно вследствие реакции между углеводами и аминокислотами, взаимодействия аминокислот, расщепления чувствительных к теплу аминокислот и их окислительного разложения.
Тепловая обработка изделий из свинины сопровождается потерями минеральных солей и водорастворимых витаминов. Варка мясопродуктов даже при умеренных температурах приводит к некоторому уменьшению содержания в них витаминов как за счет их разрушения, так и за счет потерь во внешнюю среду. Наиболее характерные для мяса витамины B1, В6, фолиевая кислота теряются на 30—70%, витамины В2, РР, пантотеновая кислота устойчивы к действию температуры 75—100° С и теряются на 1—30%. Потери витаминов при варке колбас зависят от их свойств, условий и режимов варки.
Потери витаминов при варке колбас
Для получения вареных изделий из свинины высокого качества тепловая обработка должна быть умеренной, однако должна обеспечивать отмирание или резкое сокращение количества вегетативной микрофлоры. При термической обработке погибает подавляющее большинство микроорганизмов. При нагреве до 70° С в течение 5—10 мин погибают вегетативные формы микроорганизмов. Однако имеются термофильные микроорганизмы, способные размножаться при 80° С. К воздействию высоких температур устойчивы споровые формы микробов. В ряде случаев в колбасах после варки сохраняются наиболее стойкие кокковые формы и спороносные палочки Bac. subtilis mesentericus. Высокую устойчивость при хранении имеют продукты, которые нагревают до более высокой температуры в центре, но при этом сильно увеличиваются потери массы при варке. Остаточная микрофлора после окончания тепловой обработки в значительной степени зависит от начальной микробиальной загрязненности сырья, используемого для изготовления продукта. Микробиальная обсемененность составляет 1000—10 000 микроорганизмов в 1 г.
При варке для получения более высокого выхода продукта с нежной и сочной консистенцией температура воды должна поддерживаться на уровне 75—80° С. Варка заканчивается при температуре 68—70° С в толще окорока. Ориентировочная продолжительность варки 50—55 мин на 1 кг окорока или 48—52 мин на 1 кг рулета.
При варке окороков для предотвращения перевара ножки спустя 30—40 мин при температуре 95° С палки с окороками поднимают на специальные рамы, укрепленные на бортах котла. В этом случае ножка находится над уровнем воды. На ряде предприятий производят ветчину в форме, при этом окороку придают правильную форму, что обеспечивает равномерный прогрев продукта. В этом случае потери во внешнюю среду незначительны. Образующийся в формах концентрированный бульон желатинизируется при охлаждении и вполне пригоден в пищу.
Для улучшения качества готового продукта предложен трехступенчатый метод тепловой обработки. На 1-й стадии производят нагрев при 100° С в течение времени, достаточного для образования поверхностного денатурированного слоя с низкой влагопроникающей способностью. На 2-й стадии при 60° С достигается медленная коагуляция миофибриллярных белков, слабая усадка и высокая сочность продукта. На 3-й стадии при 80° С происходит коагуляция саркоплазматических белков и белков стромы. При ступенчатой обработке достигается лучшее перераспределение и связывание влаги по всему объему продукта.
Продукты (окорока, рулеты) после варки охлаждают при температуре воздуха 1—3° С в подвешенном состоянии или разложенными на полках шкуркой вниз. Охлажденные продукты должны иметь температуру около 8° С.
Термическая обработка мясопродуктов СВЧ-энергией
В последние годы наблюдается значительное расширение диапазона исследований в области совершенствования методов и разработки научно обоснованных режимов тепловой обработки мяса и мясопродуктов. Необходимость интенсификации и совершенствования процессов тепловой обработки обусловлена, в частности, тем, что при ней формируются характерные показатели качества готового продукта и что она является «узким местом» при производстве ряда мясопродуктов.
Применяемые в настоящее время в мясной промышленности технологические процессы тепловой обработки в ряде случаев достигли естественного предела скорости и по своей природе не могут быть интенсифицированы. Значительная их продолжительность отрицательно сказывается на качестве продуктов. За последние десятилетия разработаны высокопроизводительные процессы и аппаратура, основанные на использовании физических методов обработки, в частности микроволновой энергии. Их применение возможно на основе глубокого изучения сущности физико-химических и биохимических превращений, которые могут происходить в продуктах, установления полной безвредности и сохранения биологической ценности продуктов.
Имеющиеся данные об изменениях, происходящих в белках, жирах, ферментах и других сложных молекулярных структурах, указывают на отсутствие снижения качества продуктов при тепловой обработке СВЧ-энергией. Многочисленные исследования показывают на высокое качество продуктов, подвергнутых СВЧ-тепловой обработке. Потери белков при термической обработке фарша СВЧ-энергией составляют 1—5%, при традиционной 2—8%.
Исследованием аминокислотного состава и переваримости установлено, что мясо после микроволновой обработки обладает более высокой пищевой ценностью, чем при традиционном нагреве, в частности количество продуктов гидролиза белков пепсином и трипсином на 10—20% выше. Предполагается, что повышенная переваримость продуктов после СВЧ-нагрева обусловлена характером постденатурационных изменений белка и образованием комплексов менее резистентных к действию протеолитических ферментов. Установлено, что менее продолжительная тепловая обработка при применении СВЧ-метода влияет на степень постденатурационных изменений белков мышечной ткани. При длительном нагреве наблюдается более резкое снижение количества свободных SH-групп, обусловленное более глубокими денатурационными изменениями белков.
Тепловая обработка СВЧ-энергией сопровождается меньшими потерями витаминов, в говядине после СВЧ-нагрева сохраняется 77% витамина B1 от первоначального количества, в то время как при обычном нагреве — 55%.
При термической обработке мясопродуктов в СВЧ-поле денатурационные изменения белковых веществ обусловлены нагревом и взаимодействием между заряженными группами белка и СВЧ-полем. Денатурационные изменения белков в СВЧ-поле начинаются при более низкой температуре (30°С), чем при тепловой обработке мяса обычным методом (40°С). Имеется гипотеза о наличии нетеплового «специфического» эффекта электромагнитного СВЧ-поля. Она заключается в том, что под действием таких полей все поляризованные белковые цепи макромолекул ориентируются в направлении электрических силовых линий, что может привести к разрыву водородных и других вторичных внутри- и межмолекулярных связей и к изменению зоны гидратации. Другие исследователи считают, что при воздействии СВЧ-поля на коллоидную систему (в том числе на мясо) полярные молекулы белка ориентируются медленнее по сравнению с частотой поля, реагируют на изменение поля с заметным отставанием и это может привести к денатурации или коагуляции молекул.
Наряду с вышеизложенным в связи со значительной скоростью СВЧ-нагрева по основным показателям может быть достигнута готовность продукта при отсутствии необходимых изменений коллагена, что отрицательно влияет на качественные показатели продукта. В связи с этим при отработке параметров тепловой обработки фаршевых изделий микроволновой энергией одним из важных условий, обеспечивающих требуемое качество готового продукта, является достаточно высокая степень дезагрегации коллагена.
Запекание. Это тепловая обработка мясопродуктов горячим воздухом или горячими дымовыми газами при температуре 150—220° С. В последнем случае запекание совмещается с копчением и изделия называются копчено-запеченными. При запекании поверхностные слои изделий подсушиваются, уплотняются и происходит прогрев всего изделия до требуемой температуры (68—70°С). Такая обработка позволяет получить нежный, сочный продукт со своеобразной корочкой. Для уменьшения усушки продукты запекают в ротационных или люлечных печах, а также в коптильных камерах.
Сушка
Копченые продукты, предназначенные для длительного хранения или транспортировки, сушат в сушилке при температуре 10—15° С и относительной влажности 75%. Продолжительность сушки от 2 до 10 сут. Процессы, происходящие при сушке изделий из свинины, изучены недостаточно. В процессе сушки уменьшается неравномерность распределения коптильных и посолочных веществ между внешними и внутренними слоями продукта. Часть коптильных веществ испаряется во внешнюю среду.
Источник: Ю.Ф. Заяс. Качество мяса и мясопродуктов. Легкая и пищевая промышленность. Москва. 1981
Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter.
Подтяжка кожи лица и тела
Эффект от процедуры
Для получения выраженного эффекта достаточно одного сеанса. Результаты сохраняются около 1.5 лет. На 30% эффект проявляется мгновенно. В дальнейшем он носит накопительный характер и постепенно нарастает в последующие 90 дней после проведения альтерапии. Результаты аппаратного воздействия сохраняются около 18 месяцев и более в зависимости от индивидуальных анатомических параметров пациента и особенностей его образа жизни. Врачи всегда уверены в результате воздействия аппаратом Ulthera System. Нередко специалист сначала обрабатывает одно сторону лица и дает пациенту зеркало, чтобы оценить мощный лифтинговый эффект в сравнении с необработанной половиной лица.
Показания и противопоказания
<Процедура проводится с 30 лет, оптимальный возраст для ее проведения — от 40 лет. Показаниями к проведению SMAS –лифтинга на аппарате Ulthera System являются: нависшя линия бровей, признаки старения периорбитальной области, нависшие веки, углубление носогубных складок в комплексе с уплощением области щек, деформация овала лица, опущение уголков губ, наличие «второго подбородка», обусловленное дряблостью кожи, потеря тургора и упругости, появление морщин в области шеи и декольте. Стоит отметить, что SMAS-лифтинг сегодня с успехом проводится не только при коррекции, но и с целью профилактики подобных проявлений старения.
Несмотря на безопасность и универсальность процедуры, все же имеются некоторые ограничения при ее проведении. Они касаются пациенток в период беременности и лактации, с тяжелыми формами угревой болезни на лице, нарушениями процесса регенерации кожи. Повреждения и воспаления кожи в области обработки также являются противопоказанием к проведению процедуры. Проходить SMAS-лифтинг не рекомендуется при наличии кардиостимулятора, онкозаболеваний, системных заболеваний соединительной ткани.
Какие проблемы решает процедура на аппарате Ulthera System
- Все проявления гравитационного птоза – провисания тканей;
- Дряблость кожи лица и шеи в результате значительной потери веса;
- Оседание скуловой области, деформация черт и пропорций лица;
- Появление так называемых «брылей» — мешковатых, неэстетичных образований в области подбородка;
- Нарушение четкой линии овала лица;
- Ярко выраженные носогубные складки;
- Лифтинг зон шеи и декольте.
Безопасность процедуры
Процедуру можно без сомнений назвать безопасной. Энергия ультразвука используется в самых разных разделах медицины: стоматологии, диагностике, косметологии и других. Высококачественные аппараты производства США имеют безопасные параметры работы, которые существенно снижают роль человеческого фактора в ходе проведения манипуляций. Кроме того, доктор следит за ходом процедуре на мониторе в точности как при проведении УЗИ. Это дает возможность контролировать все процессы на микроуровне, следить за глубиной подачи импульса и состоянием коллагеновых волокон.
Процедура не оставляет повреждений, рубцов, заметных отеков и не провоцирует развитие гиперпигментации. Благодаря строго определенной глубине и зонам воздействия повреждение кровеносных сосудов и нервных окончаний исключены. Аппарат Ulthera System позволяет осуществлять целевое воздействие без повреждения прилегающих мягких тканей. Ультразвук воздействует только на определенный слой и не проникает в нижележащие структуры. Технология SMAS-лифтинга прекрасно изучена, прошла все необходимые лабораторные и клинические испытания. Она обладает прогнозируемым результатом, а значит дает пациенту уверенность и душевное равновесие.
7 плюсов SMAS – лифтинга
- Прекрасный лифтинговый эффект без разрезов и повреждения кожи;
- Ulthera System — единственная неинвазивная процедура в категории «Лифтинг», одобренная FDA (Управление санитарному по надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США). Это знак высокого признания в данной сфере;
- Глубина воздействия прибора – до 4.5 мм. На этом уровне могут работать только пластические хирурги и Ulthera System;
- Естественный результат. Нет резкой перемены внешности. Эффект нарастает со временем, и вы выглядите все лучше;
- Не требует восстановительного периода, пациенты могут практически сразу вернуться к привычному образу жизни;
- Однозначно можно подчеркнуть отсутствие рисков, связанных с хирургическим вмешательством. К таковым относятся длительная реабилитация, последствия наркоза, эмоциональный стресс.
- Большинству пациентов достаточно всего одно сеанса для получения желаемого результата. Кроме того, вы можете пройти процедуру тогда, когда вам этого хочется – сезонные ограничения отсутствуют.
Отличия от других аппаратных методик
Современная косметология и эстетическая медицина предлагают немало омолаживающих методик. Справедливости ради стоит сказать, что все они успешно справляются с поставленными задачами. Среди наиболее популярных процедур можно выделить лазерное воздействие, радиочастотный лифтинг, фотоомоложение, фракционный лазерный термолиз. Они дают хороший результат при коррекции поверхностных изменений: мелких морщин, постакне, неровного дермального рельефа и т.п. Когда же дело касается гравитационного птоза и выраженных возрастных изменений, здесь технология SMAS-лифтинга Ulthera System вне конкуренции. Ее эффект можно сравнить только с хирургической подтяжкой, но это уже совсем другая история.
Ни одна аппаратная процедура не способна воздействовать на глубину до 4.5 мм. Для сравнения, лазер воздействует только на эпидермис (1-1. 5 мм), а радиочастотный лифтинг – на эпидермис и дерму (до 3 мм). Температурный режим также различен. Ulthera System вызывает нагрев до 60-70 градусов. При этих значениях происходит денатурация коллагена и оптимальный неоколлагенез. При воздействии лазером температура может достигать 100 градусов, что вызывает видимое повреждение кожи. Радиочастотный лифтинг вызывает нагрев до 40-50 градусов. При данной температуре происходит субоптимальный (локальный, незначительный) неоколлагенез. Отметим, что в отличие от термажа, SMAS-лифтинг на аппарате Ulthera System не противопоказан пациентам с сухой, тонкой кожей, липодистрофией и розацеа.
Этапы и ход процедуры
Процедура SMAS-лифтинга безболезненна и хорошо переносится пациентами. Она длится от 30 до 90 минут в зависимости от области воздействия. Последовательность проведения процедуры такова:
- Консультация врача, сбор анамнеза, выявление показаний и противопоказаний к проведению процедуры;
- Демакияж, очищение кожи;
- Фотосъемка обрабатываемой области в разных проекциях, которая позволит оценить эффект воздействия;
- Разметка области ультразвукового воздействия. По желанию пациента может быть использован местноанестезирующий крем;
- Нанесение на поверхность кожи проводящего геля для ультразвука;
- Подбор индивидуальных параметров работы аппарата. Контроль хода процедуры, позиции датчика на экране. Аппаратное воздействие. Пациент не чувствует боли и выраженного дискомфорта, возможно ощущение покалывания и тепла;
- Удаление геля, нанесение завершающего крема.
Подводя итоги
Аппаратная косметология сегодня уверенно конкурирует с пластической хирургией. Риски, связанные с хирургической операцией, не позволяют многим людям почувствовать себя моложе и привлекательнее. Альтера Систем – уникальный аппарат, который помогает добиться прекрасного омолаживающего эффекта без операции. В честь этого прибора саму технологию все чаще называют «альтерапией». Методика хорошо сочетается с другими аппаратными и инъекционными технологиями, в дальнейшем вы не будете ограничены в выборе средств воздействия. SMAS –лифтинг – идеальное решение для омоложения лица, шеи и декольте после 40 лет.
Журнал СТМ — Html View
В.М. Чудновский, В.И. Юсупов, О.Л. Захаркина, Н.Ю. Игнатьева, В.С. Жигарьков, М.Н. Яшкин, В.Н. Баграташвили
Ключевые слова: эндовенозная лазерная облитерация; коагуляция венозной крови; черненый торец волокна; лазероиндуцированная гидродинамика; конвективная теплоотдача; механизм действия.
Цель исследования — экспериментальное обоснование механизма эндовенозной лазерной облитерации (ЭВЛО), основанного на лазероиндуцированной конвективной теплоотдаче крови венозным стенкам, обусловленной ее кипением, как доминирующего процесса в сложном механизме теплообмена при эндовазальных лазерных манипуляциях.
Материалы и методы. В эксперименте по моделированию ЭВЛО были использованы фрагменты варикозно-измененных стволов больших подкожных вен, удаленных при комбинированной флебэктомии. Лазерное излучение с длиной волны 970 нм и мощностью 6 и 7 Вт подводили в вену через кварцевый световод с плоским предварительно зачерненным торцом. Скорость тракции составляла 0,5 мм/с. В процессе облучения с помощью тепловизора FLIR A600 (Швеция) измеряли температуру поверхности вены. Денатурацию коллагена венозной стенки в результате лазерного воздействия определяли методом дифференциальной сканирующей калориметрии.
Результаты. Регистрация динамики температуры на поверхности вены с помощью тепловизора позволила визуализировать «точечные» нагревы стенки вены жидкостью, окружающей парогазовые пузырьки. Установлено существование температурного насыщения в динамике прогрева исследуемых сред, что является одним из характерных признаков фазового перехода первого рода. Степень денатурации коллагена в образцах венозной стенки при мощностях излучения 6 и 7 Вт составила 87±5 и 97±3% соответственно.
Заключение. Экспериментально подтверждено пузырьковое кипение крови в венозном сосуде, которое обеспечивает быструю и эффективную теплоотдачу разогретой крови от нагретого торца кварцевого волокна на венозные стенки. Для успешного проведения ЭВЛО перемещение волокна нужно начинать с момента закипания крови; при меньших мощностях лазерного излучения волокно необходимо удерживать большее время. В клинической процедуре ЭВЛО можно использовать менее мощные и более безопасные в смысле возможных осложнений лазерные аппараты.
Эндовенозная лазерная облитерация — ЭВЛО (коагуляция, абляция), в том числе и большой подкожной вены — безопасный, малотравматичный и эффективный хирургический метод лечения варикозной болезни. В последнее время он занимает ведущее положение среди других используемых хирургических методов. С момента первого применения в 1999 г. данной технологии [1] физический механизм ЭВЛО, на основе которого можно было бы выработать единый подход к выбору режима, экспозиции и длины волны лазерного излучения, остается дискуссионным.
Использование эндовенозного лазерного излучения в хирургической практике основано на преобразовании лазерного излучения в тепло, которое посредством теплообмена доставляется к патологически измененным венозным стенкам. Для успешной облитерации сосуда должна произойти необратимая денатурация коллагена, образующего каркас венозной стенки. Таким образом, достигаемая температура венозной стенки должна превышать температуру денатурации основного структурного белка ткани [2].
Как известно, существует три вида теплообмена — теплопроводность (кондукция), конвекция (перемешивание) и излучение (радиация) [3]. В соответствии с ними рассматриваются различные способы доставки преобразованного в тепло лазерного излучения к венозным стенкам. Эти способы во многом определяют физические механизмы ЭВЛО.
Кондуктивный теплообмен требует непосредственного контакта теплоносителя с интимой — внутренним, взаимодействующим с кровью слоем вены. В ранних исследованиях полагали, что венозная стенка нагревается вследствие контакта генерируемых лазерным излучением пузырьков пара с интимой [4]. Затем этот механизм расширили за счет учета конденсации пара с выделением теплоты и предположения, что вена разогревается по принципу работы тепловой трубки [5, 6].
Этот механизм доминировал в представлениях клиницистов достаточно долго, пока не появились сомнения в его физической состоятельности. Пузырьки пара не могут значительно нагреть венозную стенку, поскольку плотность насыщенного пара при атмосферном давлении даже при температуре 100°С составляет только 6·10–4 от плотности воды, а аналогия с тепловой трубкой некорректна из-за того, что в пузырьках присутствуют не только пары воды, но и другие газы [7–9].
В отношении радиационного теплообмена проведено значительное количество исследований по изучению влияния длины волны излучения на эффективность ЭВЛО. Первыми в процедуре были использованы лазеры с длинами волны в диапазоне 0,75–1,06 мкм, попадающими в полосы поглощения окси- и дезоксигемоглобина [10]. Эта группа лазеров получила название гемоглобинпоглощающих [4, 11–13]. Позднее нашли применение лазеры, излучение которых попадало в область максимумов поглощения воды (полоса 1,32–1,56 мкм). По отношению к ЭВЛО эти лазеры стали называть водопоглощающими [14–16]. Считается, что излучение водопоглощающих лазеров может свободно достигать венозной стенки, минуя поглощение клетками крови — эритроцитами, в то время как гемоглобинпоглощающие лазеры изначально действуют только на эритроциты, инициируя образование тромбов. В результате сложного кондуктивно-радиационного теплообмена между разогретыми излучением тромбами и окружением венозная стенка нагревается. Такое представление было подвергнуто критике уже потому, что эритроциты на 65–70% состоят из воды [7]. В итоге оказалось, что различия в клинической эффективности водопоглощающих и гемоглобинпоглощающих лазеров несущественны, значимы лишь методологические особенности проведения процедур различными авторами [7, 8, 17].
В некоторых исследованиях [8, 18, 19] обращено внимание на то, что в процессе лазерного облучения вены контактирующий с кровью торец световода (волокна) покрывается слоем нагара (чернится). Как почти абсолютно черное тело, этот рабочий конец поглощает лазерное излучение любой длины волны и нагревается до температур порядка 1000°С и выше [20–25]. При этом такой горячий торец (hot tip) становится источником мощного теплового излучения (излучения Планка), которое может непосредственно прогревать венозные стенки, что, по мнению авторов [8], и обусловливает физический механизм ЭВЛО. Такому прогреву препятствует поглощающая тепловое излучение вода, которая окружает торец оптического волокна. В связи с этим авторы предлагают использовать лазерное излучение большой мощности (около 20 Вт), которое должно «осушить» окрестное пространство. Однако при больших мощностях наблюдаются серьезные осложнения [26, 27], такие как перфорация стенки вены, перифлебит, гематомы и парестезии.
Искусственное чернение торца волокна — нанесение на его поверхность слоя углерода — с целью создания разогретого до высоких температур точечного источника тепла (диаметр кварцевой жилы световода — 100–600 мкм) широко используется в хирургической практике. По такому принципу, в частности, работает лазерный скальпель для контактного рассечения водонасыщенных биологических тканей [23, 24]. Черненый торец используют в пункционных операциях для лечения грыжевых дисков [28, 29], истинных кист [30] и др. Важно отметить, что сильный разогрев зачерненного участка световода достигается уже при низких мощностях лазерного излучения. На практике горячий торец можно успешно получить уже при мощностях лазерного излучения ~0,5–1,0 Вт [23].
Разогретый до высоких температур торец волокна при введении в вену вступает в контакт с кровью (водная дисперсия), что приводит к ее взрывному кипению и экзотермическому окислению органических компонентов [21, 23]. Эти процессы инициируют потоки горячей крови с последующей конвективной теплоотдачей венозным стенкам. Обеспечить закипание крови в окрестности черненого торца достаточно просто уже при умеренной мощности (1–7 Вт) лазерного излучения, причем с любой длиной волны [23, 31].
Для обоснования механизма ЭВЛО нужна регистрация в динамике действия потоков нагретой жидкости на стенку вены. Проводимые же исследования распределения тепловых потоков в вене с использованием точечных термопар [2, 17] позволяют оценить распределение температуры непосредственно на венозной стенке очень приближенно и без учета динамики нагрева. Эта задача, необходимая для уточнения механизма ЭВЛО, может быть решена с применением современной скоростной высокочувствительной тепловизионной камеры, которая использована в предлагаемой работе.
Цель исследования — экспериментальное обоснование механизма эндовенозной лазерной облитерации, основанного на лазероиндуцированной конвективной теплоотдаче крови венозным стенкам, обусловленной ее кипением, как доминирующего процесса в сложном механизме теплообмена при эндовазальных лазерных манипуляциях.
Материалы и методы. Для моделирования ЭВЛО использовали варикозно-измененные стволы больших подкожных вен, удаленных при комбинированной флебэктомии (4 пациента, средний возраст — 51,6±7,8 года, клинический класс болезни — С2 по классификации СЕАР). Стволы хранили в 0,15 М растворе NaCl при температуре 4–8°С до начала эксперимента не более 8 ч. Каждый ствол разделяли на фрагменты длиной 50±5 мм, средний диаметр фрагментов составлял 5,4±1,6 мм. В эксперименте было использовано 15 фрагментов.
Концы участков вен стягивали в 1–2 мм от края таким образом, чтобы уменьшить внутренний диаметр до ~1 мм, сохраняя при этом форму сечения отверстия, наиболее близкую к кругу. Затем концы закрепляли со слабым натяжением на пластиковой подложке треугольного сечения, при этом одна из сторон оставалась открытой. В вену с обоих концов вводили около 0,5 мл гепаринизированной крови, которую равномерно распределяли по длине. С дистального конца внутрь фрагмента вены вводился кварцевый световод с плоским, предварительно зачерненным торцом диаметром 600 мкм. Всю конструкцию помещали горизонтально в контейнер размером 11×70 мм, заполненный 0,15 М раствором NaCl. Полоска вены шириной ~1 мм выступала над поверхностью раствора, что позволило регистрировать интенсивность теплового излучения от внешней поверхности венозной стенки. Регистрацию динамики температурных полей осуществляли с помощью инфракрасного термографа FLIR A600 (Швеция) с постоянной времени датчика 8 мс и скоростью съемки 50 кадров в секунду.
В эксперименте использовали полупроводниковый лазер ЛС-0,97 («ИРЭ-Полюс», Россия) с длиной волны излучения 0,97 мкм и максимальной мощностью 11 Вт. Мощность излучения контролировали измерителем мощности UP12-H (Gentec Electro-Optics, Канада). Тракцию световода в сосуде осуществляли в автоматическом режиме с аппаратно-заданной скоростью 0,5 мм/с.
После проведения лазерной обработки образцы из средней части фрагмента анализировали методом дифференциальной сканирующей калориметрии. Препараты массой 7–10 мг герметично закрывали в стандартных алюминиевых тиглях (20 мкл) и нагревали в ячейке калориметра DSC204F (Netzch, Германия): от комнатной температуры до 85°C со скоростью 10°K/мин. Образцом сравнения служил пустой тигель. Энтальпию денатурации (ΔНd) пересчитывали на сухой остаток препарата.
Статистическую обработку количественных результатов выполняли, используя t-критерий Стьюдента, среднее арифметическое и стандартное отклонение. Предварительно проводили анализ на соответствие сравниваемых выборок нормальному закону распределения. Различия считали статистически значимыми при p<0,001. Рассчитывали средние величины и стандартную ошибку среднего (M±m).
Результаты. С помощью инфракрасного термографа получено типичное изображение поверхности раствора NaCl c веной в контейнере (рис. 1). Выделяется нагретый участок выступающей полоски венозной стенки. В наиболее горячей области, соответствующей положению торца волокна, отчетливо визуализируются тепловые проекции парогазовых пузырьков. На рис. 2 приведены примеры временнóй эволюции максимальной температуры на внешней поверхности венозной стенки при движении световода для мощностей лазерного излучения 6 и 7 Вт. Зависимость максимальной температуры от времени имеет вид кривой с насыщением. Насыщение начиналось примерно через 7 с после включения лазера, когда температура достигала 70–80°С, и волокно перемещалось на расстояние ~3,5 мм. Неожиданный результат заключается в том, что кривая 1, полученная при мощности лазерного излучения 7 Вт, в период времени 0–9 с лежит ниже кривой 2, полученной при мощности 6 Вт. Например, для времени 5,0±0,2 с значение температуры для 6 Вт — Т6=68,5±0,5°С, а для 7 Вт — Т7=64,7±0,4°С, при этом выборки статистически значимо отличаются, p=0,008, т.е. большей мощности соответствует меньшая скорость роста температуры. При бóльших временах (25±5 с), как видно из рис. 2, большей мощности лазерного излучения соответствует большая температура: Т6=83,0±0,5°С, а Т7=91,1±0,3°С, при статистически значимом отличии выборок, p=0,002.
|
Рис. 1. Пример типичного распределения температуры на поверхности вены при моделировании ЭВЛО. Скорость перемещения торца лазерного волокна — 0,5 мм/с. Прямоугольником выделены контуры вены. Видны «точечные» нагревы стенки вены жидкостью, окружающей парогазовые пузырьки |
|
Рис. 2. Изменение максимальной температуры внешних стенок вен при мощности лазерного излучения 7 Вт (1) и 6 Вт (2) в процессе продвижения торца лазерного волокна в вене. Скорость перемещения торца лазерного волокна — 0,5 мм/с |
На рис. 3 представлены термограммы образцов венозной стенки, выполненные с помощью дифференциальной сканирующей калориметрии. На термограммах интактных препаратов (кривая 1) наблюдается эндотермический пик с максимумом 68,0±0,7°C, связанный с поглощением теплоты при денатурации (переход спираль–клубок) макромолекул коллагена [32]. Площадь пика соответствует энтальпии денатурации ΔHd, которая составляет 10±3Дж/г сухого остатка. После лазерной обработки площадь пика существенно уменьшается вплоть до полного исчезновения (кривые 2–4). Уменьшение энтальпии перехода ΔH указывает на уменьшение в результате лазерного воздействия доли интактных макромолекул в препаратах. Степень денатурации коллагена α определяли по соотношению α=(1–ΔH/ΔHd)·100%. Для мощностей 6 и 7 Вт величина α составляла 87±5 и 97±3% соответственно; ΔHd=–18,4 мДж/г сухого остатка. Таким образом, происходила практически полная деградация коллагенового каркаса стенки сосуда.Следует отметить сложный профиль кривых на линии насыщения. В частности, наблюдаются локальные максимумы, когда температура превышает 90°С, и минимумы. Это можно объяснить активными гидродинамическими процессами, а также влиянием (экранировкой) пузырьков, возникающих при кипении крови.
|
Рис. 3. Термограммы венозных стенок, выполненные с помощью дифференциальной сканирующей калориметрии: 1 — интактный образец; 2 — образец после лазерной обработки мощностью 6 Вт; 3, 4 — образцы после лазерной обработки мощностью 7 Вт. На термограмме 4 тепловой эффект денатурации коллагена не проявляется |
Обсуждение. В работе исследовались температурные характеристики процессов, генерируемых лазерным излучением, в заполненном гепаринизированной кровью венозном сосуде. Установлено, что лазероиндуцированная гидродинамика в такой модели, связанная с кипением крови, обеспечивает конвективную теплоотдачу на стенки сосудов и создает необходимые и достаточные условия для успешного проведения ЭВЛО. Главным условием является прогрев венозной стенки до температур, при которых происходит необратимая денатурация белков, входящих в ее состав, а достаточным — полная деградация каркаса матрикса ткани [2].
Экспериментальные результаты доказали, что при условии предварительного чернения торца волокна температура внешней поверхности стенки сосуда быстро достигает значений ~80–90°С (см. рис. 2), которые значительно превышают температуру денатурации коллагена в тканях [33]. В первые 9 с скорость температурного роста с увеличением мощности лазерного излучения уменьшается. Это можно объяснить тем, что с увеличением мощности излучения растет объем вовлеченной в движение жидкости и на ее прогрев требуется большее время. При бóльших временах (в период 25–40 с) температура на поверхности венозной стенки с увеличением мощности поднимается до бóльших значений.
Следующий важный результат — температурное насыщение в динамике прогрева исследуемых сред (см. рис. 2). Он означает, что при лазерном нагреве наполненной кровью вены срабатывает некий механизм теплоотвода, который слабо зависит от мощности теплового источника; от нее зависит только скорость достижения температуры насыщения. Аналогичный результат — достижение температурного плато в экспериментальной модели ЭВЛО для лазерного излучения с длиной волны 1470 нм — показан в работе [2]. Однако авторы решали другую задачу и не обсуждали полученный результат, который в сопоставлении с нашими данными, в частности, означает, что от длины волны эффект вскипания крови не зависит.
Это заключение очевидно для хорошо зачерненного торца волокна (предварительно либо по ходу проведения процедуры), когда слой углерода на торце световода (как абсолютно черное тело) будет разогреваться при поглощении лазерного излучения практически с любой длиной волны.
Наличие температурного плато при нагреве — один из характерных признаков фазового перехода первого рода [3]; в случае обсуждаемой системы таким переходом является кипение. Кипение — это процесс интенсивного парообразования и интенсивной конвекции, сопровождающихся перемещением в пространстве жидкости и паровых пузырьков. Динамика пузырьков обусловлена температурными градиентами и, собственно, обеспечивает теплоотвод.
Ранее в работах [21, 22] было показано, что раскаленный лазерным излучением предварительно зачерненный торец световода в воде генерирует образование и интенсивное движение пузырьков с размерами от 10 мкм до 0,5 см (пузырьковое кипение). При этом линейные скорости мелких пузырьков достигают 100 мм/с. В движение пузырьков вовлечена присоединенная масса разогретой жидкости, которая для сферического тела равна половине массы жидкости, заключенной в объеме пузырька, и в случае пузырькового кипения обеспечивает быструю и эффективную теплоотдачу на стенки сосуда [3]. Траектории пузырьков в капиллярах имеют сложную форму закрученной спирали, а также линейных трансляций — затопленных микроструй [22, 23]. Мы считаем, что подобная лазероиндуцированная динамика в системе «венозная стенка/кровь» приводит к разогреву стенки посредством конвективной теплоотдачи от кипящей крови на интиму вен. Наш вывод подтверждается клиническими данными, полученными при проведении операций ЭВЛО под УЗ-контролем. Клиницисты отмечают пелену кипящих пузырьков в венозном сосуде под действием лазера при проведении УЗ-ассистированных операций, однако связывают это явление с физически неубедительными механизмами разогрева вен [6, 34].
Таким образом, найдено решение актуальной проблемы современной флебологии — установлен физический механизм эндовенозной лазерной облитерации варикозно-расширенных вен. В предлагаемых ранее механизмах не рассматривали индуцированную лазерным излучением гидродинамику и связанную с ней динамику парогазовых пузырьков, генерируемых в вене при контакте разогретого до высоких температур (~1000°С) торца кварцевого волокна с кровью.
Выполненное моделирование ЭВЛО экспериментально подтвердило пузырьковое кипение крови в венозном сосуде, которое обеспечивает быструю и эффективную теплоотдачу разогретой крови венозным стенкам. Проведенные температурные измерения доказали, что венозная стенка быстро и эффективно разогревается до температур, превышающих температуру необратимой денатурации основного структурного белка матрикса ткани — коллагена. В конечном итоге обеспечивается надежная облитерация венозного сосуда. При этом чернение волокна обеспечивает эффективность ЭВЛО вне зависимости от длины волны лазерного излучения.
Поскольку кипение является пороговым процессом, то оно не возникнет, если мощность подводимого лазерного излучения будет меньше пороговой. Следовательно, для успешного проведения ЭВЛО перемещение волокна нужно начинать с момента закипания крови. При меньших мощностях лазерного излучения волокно необходимо удерживать большее время. Из этого следует, что в клинической процедуре ЭВЛО в принципе можно использовать менее мощные, а значит, более безопасные в смысле возможных осложнений и более дешевые лазерные аппараты.
Заключение. Экспериментально подтверждено пузырьковое кипение крови в венозном сосуде, которое обеспечивает быструю и эффективную теплоотдачу разогретой крови от нагретого торца кварцевого волокна на венозные стенки. Для успешного проведения ЭВЛО перемещение волокна нужно начинать с момента закипания крови; при меньших мощностях лазерного излучения волокно необходимо удерживать большее время. В клинической процедуре ЭВЛО можно использовать менее мощные и более безопасные лазерные аппараты.
Финансирование исследования. Работа выполнена при поддержке Российского научного фонда (грант №14-15-00840).
Конфликт интересов. У авторов нет конфликта интересов.
- Bone Salat C. Tratamiento endoluminal de las varices con láser de diodo. Estudio preliminar. Revista de Patología Vascular 1999; 5(1): 31–39.
- Шевченко Ю.Л., Стойко Ю.М., Мазайшвили К.В., Максимов С.В., Циплящук А. В., Париков М.А., Игнатьева Н.Ю., Захаркина О.Л. Выбор оптимальных параметров излучения 1470 нм для эндовенозной лазерной облитерации. Флебология 2013; 7(4): 18–24.
- Кутателадзе С.С. Основы теории теплообмена. М: Атомиздат; 1979; 416 с.
- Proebstle T.M., Lehr H.A., Kargl A., Espinola-Klein C., Rother W., Bethge S., Knop J. Endovenous treatment of the greater saphenous vein with a 940-nm diode laser: thrombotic occlusion after endoluminal thermal damage by laser-generated steam bubbles. J Vasc Surg 2002; 35(4): 729–736, http://dx.doi.org/10.1067/mva.2002.121132.
- Proebstle T., Sandhofer M., Kargl A., Gül D., Rother W., Knop J., Lehr H.A. Thermal damage of the inner vein wall during endovenous laser treatment: key role of energy absorption by intravascular blood. Dermatol Surg 2002; 28(7): 596–600, http://dx.doi.org/10.1046/j.1524-4725.2002.01309.x.
- van der Geld C.W., van den Bos R.R., van Ruijven P.W., Nijsten T., Neumann H. A., van Gemert M.J. The heat-pipe resembling action of boiling bubbles in endovenous laser ablation. Lasers Med Sci 2010; 25(6): 907–909, http://dx.doi.org/10.1007/s10103-010-0780-2.
- Malskat W.S., Poluektova A.A., van der Geld C.W., Neumann H.A., Weiss R.A., Bruijninckx C.M., van Gemert M.J. Endovenous laser ablation (EVLA): a review of mechanisms, modeling outcomes, and issues for debate. Lasers Med Sci 2014; 29(2): 393–403, http://dx.doi.org/10.1007/s10103-013-1480-5.
- Шевченко Ю.Л., Стойко Ю.М., Мазайшвили К.В., Хлевтова Т.В. Механизм эндовенозной лазерной облитерации: новый взгляд. Флебология 2011; 5(1): 46–50.
- Жилин К.М. Влияние длины волны лазерного излучения ближнего ИК-диапазона на характер силового воздействия на биологические ткани (кровь, венозная стенка, слизистая оболочка и костная ткань). Автореф. дис. … канд. физ.-мат. наук. Москва; 2013.
- Roggan A., Friebel M., Dörschel K., Hahn A., Müller G. Optical properties of circulating human blood in the wavelength range 400–2500 nm. J Biomed Opt 1999; 4(1): 36–46, http://dx.doi.org/10.1117/1.429919.
- Proebstle T.M., Gül D., Kargl A., Knop J. Endovenous laser treatment of the lesser saphenous vein with a 940-nm diode laser: early results. Dermatol Surg 2003; 29(4): 357–361, http://dx.doi.org/10.1046/j.1524-4725.2003.29085.x.
- Oh C.K., Jung D.S., Jang H.S., Kwon K.S. Endovenous laser surgery of the incompetent greater saphenous vein with a 980-nm diode laser. Dermatol Surg 2003; 29(11): 1135–1140, http://dx.doi.org/10.1046/j.1524-4725.2003.29353.x.
- Weiss R.A. Comparison of endovenous radiofrequency versus 810 nm diode laser occlusion of large veins in an animal model. Dermatol Surg 2002; 28(1): 56–61, http://dx.doi.org/10.1046/j.1524-4725.2002.01191.x.
- Schwarz T., von Hodenberg E., Furtwängler C., Rastan A., Zeller T., Neumann F.J. Endovenous laser ablation of varicose veins with the 1470-nm diode laser. J Vasc Surg 2010; 51(6): 1474–1478, http://dx.doi. org/10.1016/j.jvs.2010.01.027.
- Rathod J., Taori K., Joshi M., Mundhada R., Rewatkar A., Dhomane S., Gour P. Outcomes using a 1470-nm laser for symptomatic varicose veins. J Vasc Interv Radiol 2010; 21(12): 1835–1840, http://dx.doi.org/10.1016/j.jvir.2010.09.009.
- Соколов А.Л., Лядов К.В., Луценко М.М., Лавренко С.В., Любимова А.А., Вербицкая Г.О., Минаев В.П. Применение лазерного излучения 1,56 мкм для эндовазальной облитерации вен в лечении варикозной болезни. Ангиология и сосудистая хирургия 2009; 15(1): 69–76.
- Шайдаков Е.В., Илюхин Е.А., Петухов А.В., Росуховский Д.А. Сравнение лазеров с длиной волны 970 и 1470 нм при моделировании эндовазальной лазерной облитерации вен in vitro. Флебология 2011; 5(4): 23–30.
- Amzayyb M., van den Bos R.R., Kodach V.M., de Bruin D.M., Nijsten T., Neumann H.A., van Gemert M.J. Carbonized blood deposited on fibres during 810, 940 and 1470 nm endovenous laser ablation: thickness and absorption by optical coherence tomography. Lasers Med Sci 2010; 25: 439–447, http://dx.doi.org/10.1007/s10103-009-0749-1.
- Mordon S., Wassmer B., Servell P., Desmyttère J., Grard C., Stalnikiewicz G. Is a vein filled with blood a good model for studying endovenous laser ablation? Lasers Surg Med 2009; 41(8): 543–544, http://dx.doi.org/10.1002/lsm.20809.
- van den Bos R.R., Kockaert M.A., Martino Neumann H.A., Bremmer R.H., Nijsten T., van Gemert M.J. Heat conduction from the exceedingly hot fiber tip contributes to the endovenous laser ablation of varicose veins. Lasers Med Sci 2009; 24(2): 247–251, http://dx.doi.org/10.1007/s10103-008-0639-y.
- Yusupov V.I., Chudnovskii V.M., Bagratashvili V.N. Laser-induced hydrodynamics in water-saturated biotissues. 1. Generation of bubbles in liquid. Laser Phys 2010; 20(7): 1641–1647, http://dx.doi.org/10.1134/S1054660X1014001X.
- Yusupov V.I., Chudnovskii V.M., Bagratashvili V.N. Laser-induced hydrodynamics in water-saturated biotissues: 2. Effect on delivery fiber. Laser Phys 2011; 21(7): 1230–1234, http://dx.doi.org/10.1134/S1054660X11140015.
- Yusupov V.I., Chudnovskii V.M., Bagratashvili V.N. Laser-induced hydrodynamics in water and biotissues nearby optical fiber tip. In: Hydrodynamics — advanced topics. Schulz H.E. (editor). InTech; 2011; p. 95–118, http://dx.doi.org/10.5772/28517.
- Чудновский В.М., Юсупов В.И. Пункционная световодная игла (варианты) и ограничитель для нее. Патент на полезную модель 58904. 2006.
- Шевченко Ю.Л., Стойко Ю.М., Мазайшвили К.В. Лазерная хирургия варикозной болезни. М: Боргес; 2010.
- Dexter D., Kabnick L., Berland T., Jacobowitz G., Lamparello P., Maldonado T., Mussa F., Rockman C., Sadek M., Giammaria L.E., Adelman M. Complications of endovenous lasers. Phlebology 2012; 27(Suppl 1): 40–45, http://dx.doi.org/10.1258/phleb.2012.012S18.
- Dunst K.M., Huemer G.M., Wayand W., Shamiyeh A. Diffuse phlegmonous phlebitis after endovenous laser treatment of the greater saphenous vein. J Vasc Surg 2006; 43(5): 1056–1058, http://dx.doi.org/10.1016/j.jvs.2006.01.030.
- Чудновский В., Буланов В., Юсупов В. Лазерное индуцирование акустогидродинамических эффектов в хирургии. Фотоника 2010; 1: 30–36.
- Чудновский В.М., Юсупов В.И., Маховская Т.Г. Лазер-индуцированные акустогидродинамические эффекты в хирургии грыжевых дисков. Вестник неврологии, психиатрии и нейрохирургии 2013; 4: 76–82.
- Кухарева Л.И., Невожай В.И., Чудновский В.М. Возможности эхографии в диагностике и склерозирующей терапии кистозных образований молочных желез. Дальневосточный медицинский журнал 2008; 3: 49–51.
- Yusupov V.I., Bulanov V.V., Chudnovskii V.M., Bagratashvili V.N. Laser-induced hydrodynamics in water-saturated tissue: III. Optoacoustic effects. Laser Phys 2014; 24(1), http://dx.doi.org/10.1088/1054-660X/24/1/015601.
- Willett T.L., Labow R.S., Lee J.M. Mechanical overload decreases the thermal stability of collagen in an in vitro tensile overload tendon model. J Orthop Res 2008; 26(12): 1605–1610, http://dx.doi.org/10.1002/jor.20672.
- Игнатьева Н.Ю. Термическая стабильность коллагена в соединительных тканях. Автореф. дис. … докт. хим. наук. М; 2011.
- van der Geld C.W.M. The dynamics of a boiling bubble before and after detachment. Heat Mass Transf 2009; 45(7): 831–846, http://dx.doi.org/10.1007/s00231-007-0254-7.
Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.
Настройка вашего браузера для приема файлов cookie
Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:
- В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
- Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, используйте кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
- Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
- Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
- Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или уточнить у системного администратора.
Почему этому сайту требуются файлы cookie?
Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.
Что сохраняется в файле cookie?
Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.
Как правило, в файле cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.
Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.
Настройка вашего браузера для приема файлов cookie
Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:
- В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
- Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, используйте кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
- Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
- Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
- Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или уточнить у системного администратора.
Почему этому сайту требуются файлы cookie?
Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.
Что сохраняется в файле cookie?
Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.
Как правило, в файле cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.
Наука медленного приготовления
Мышца полностью окружена толстой оболочкой из соединительной ткани (эпимизий) и разделена на пучки волокон сетью соединительной ткани (перимизий). Отдельные мышечные волокна ограничены плазматической мембраной, окруженной соединительной тканью (эндомизиумом), которая состоит из базальной мембраны, окруженной сетчаткой позже, в которой сеть тонких фибрилл коллажа встроена в матрицу. Сухожилия — это эластичные коллагеновые ткани.
ВЫЗОВ В ПРИГОТОВЛЕНИИ МЯСА
Нам нравится наше мясо нежным и сочным одновременно …
Поэтому мы хотим, чтобы наше мясо было приготовлено нежным, в котором жесткий коллаген превращается в желатин, но с минимальной потерей влаги. Реальность такова, что эти методы противоречивы и, следовательно, являются проблемой или дилеммой при приготовлении мяса. Однако для минимизации потери влаги требуется температура ниже 130F. превращение коллагена в желатин требует температуры выше 160F и в течение продолжительных периодов времени. По мере испарения влаги мясо начинает сжиматься. Плита может потерять 20% или более своего веса при варке из-за усадки. Даже мясо, приготовленное в жидкости, сохнет, хотя и не так быстро. Итак, мы столкнулись с дилеммой. Чтобы разжижить коллаген, нам нужно приготовить мясо до 180 ° F и держать его там в течение длительного периода времени. Но к тому времени он уже не будет хорошо прожарен, и мышечные волокна могут высохнуть. В результате нам нужно добавить влаги.
Как замедлить потерю влаги
Рассол. Рассол добавляет значительное количество влаги, помогает удерживать влагу во время готовки, способствует заметному усилению вкуса.
Варка на пару. Другой метод добавления влаги — приготовить мясо при очень высокой влажности, завернув его в фольгу с небольшим количеством воды или сока. Это предотвращает выход влаги, а некоторые пары проникают в мясо.
Тушение или припуск (—низкие температуры -). Тушение — это метод приготовления, при котором мясо погружают в горячую жидкость, но не настолько, чтобы можно было закипеть. Тушение может сделать мясо сочным, нежным и ароматным, особенно если вы используете ароматную жидкость для тушения. Но он имеет тенденцию вытягивать весь коллаген и лишать мясо его естественного аромата. Ароматизируйте жидкость (вода с маринованными специями — хорошее простое начало), полностью погрузите плиту, не закрывайте крышку, держите температуру около 160-180F в течение примерно 30 минут и дайте мясу остыть в жидкости в течение 20 минут. 30 минут, чтобы он впитал немного воды, прежде чем ставить его на гриль.
Разрыв ковалентных связей коллагена с использованием кислот — (смягчение мяса кислотой) — Хорошо известно, что добавление небольшого количества уксуса в бульон поможет смягчить мясо во время приготовления. Также полезно замариновать мясо в течение нескольких часов, используя уксус, чтобы смягчить его. Оффер и Найт (1988) предположили, что одним из механизмов повышения чувствительности мяса, вызванного pH, может быть разрыв ковалентных поперечных связей коллагена и некоторых специфических пептидных связей.
Вот несколько советов, которые следует учитывать при медленном прожаривании:
— Перед медленным приготовлением образуйте карамелизованную корочку. — обжарьте мясо на сухой сковороде или с небольшим количеством масла или жира.
— Поместите мясо или жаркое на сковороду стороной , чтобы оно намылось.
— Сделайте куски мяса мягче. — например, измельчение мяса, покупка выдержанного мяса (примечание: мясо, приготовленное дольше при температуре 120 ° F, будет выдерживаться и будет более нежным), замариновать мясо кислотами и смягчить его.
— Оберните оставшееся мясо фольгой и подождите 10–15 минут, прежде чем разрезать его, чтобы сок мяса вернулся в центр; нарезать мясо против волокон.
КУХОННЫЕ ПРИБОРЫ ДЛЯ МЕДЛЕННОГО ПРИГОТОВЛЕНИЯ
Новые приборы, такие как плиты Sous Vide , печи CVap и пароконвектоматы , теперь используются в ресторанах и домах. Читайте больше об этом: Что такое Sous Vide Cooking? — Сравнение Sous Vide с CVap и пароконвектоматами, Как передается тепло при приготовлении пищи.
Список литературы
Обзор: Вклад коллагена в прочность мяса: теоретические аспекты Жак Лепети..Meat Science 80 (2008) 960–967
.Предложение, Г., & Найт, П. (1988). Структурная основа удержания воды в мясе. Часть 1: Общие принципы и водопоглощение при переработке мяса. События в мясной науке, 4, 63–171.
Трансуретральная радиочастотная денатурация коллагена для лечения женщин с недержанием мочи
Стрессовое недержание мочи (SUI) — это назойливая проблема, которая может отрицательно сказаться на качестве жизни многих пациентов. Подсчитано, что 38% женщин в Соединенных Штатах страдают той или иной формой недержания мочи, наиболее распространенной из которых является СНМ. При выборе метода лечения уролог имеет в своем арсенале широкий спектр инструментов, как хирургических, так и нехирургических. Предпочтение пациента часто диктует необходимость ухода, и часто преобладает мнение, что «чем новее, тем лучше».
В этом систематическом обзоре мы изучили опубликованные исследования, оценивающие эффективность трансуретральной радиочастотной денатурации коллагена при SUI.Первоначально одобренный в 2005 году под торговой маркой Renessa®, в настоящее время продается под торговой маркой Lyrette® компанией Verathon. Это лечение является относительно новым, минимально инвазивным вмешательством на основе устройств, которое можно удобно проводить в офисных условиях с минимальной анестезией. Разрез не требуется, так как вмешательство заключается в размещении радиочастотного зонда, похожего на катетер, в проксимальном отделе уретры. Несколько радиочастотных игл вводят в подслизистую оболочку уретры через короткие промежутки времени в 36 местах.Сообщалось, что это лечение вызывает денатурацию подслизистого коллагена, что снижает эластичность уретры, уменьшает воронку и увеличивает функциональную длину уретры.
Как и многие новые хирургические устройства, трансуретральная радиочастотная денатурация коллагена была одобрена в рамках процесса утверждения предварительного уведомления FDA 510 (k), который не требует дополнительных испытаний на людях, если устройство считается в значительной степени похожим на устройство, уже представленное на рынке. Lyrette® был одобрен на основании предыдущего успеха радиочастотной аблации метастатических поражений печени и доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ДГПЖ), которые заметно отличаются друг от друга болезненными процессами.
Наш систематический обзор текущей литературы выявил только одно небольшое фиктивно контролируемое рандомизированное исследование с доказательствами низкого качества. В этом испытании в контрольном плече использовался фиктивный зонд, в котором отсутствовали игольчатые электроды и который не передавал радиочастотную энергию. Мы обнаружили, что в исследовании были неполные данные об исходах, высокий риск выборочной отчетности и высокий риск систематической ошибки и неточности. Пациенты были ослеплены, однако не было сказано, были ли ослеплены врачи или специалисты по оценке результатов.Все эти факторы серьезно снизили качество доказательств в исследовании. Кроме того, не было обнаружено статистически значимого эффекта в отношении основного результата изменения общей международной оценки качества жизни (I-QOL). Только вторичный апостериорный анализ женщин с НМН от умеренной до тяжелой на исходном уровне показал потенциальную пользу.
В целом, на основании ограниченного и низкого качества доказательств остается значительная неопределенность в отношении истинной терапевтической эффективности и рисков, связанных с этим вмешательством.Принимая во внимание немногочисленность и низкое качество доказательств эффективности трансуретральной радиочастотной денатурации коллагена, ее нельзя рекомендовать в качестве метода лечения в контексте других более надежных вариантов лечения.
Автор: :
Philipp Dahm, MD
Госпиталь для ветеранов, Университет Миннесоты, Миннеаполис, Миннесота, США.
Джулия Хан, доктор медицины
Отделение урологии, Университет Флориды, Гейнсвилл, Флорида, США.
Diana Kang, MD
Отделение урологии, Калифорнийский университет в Лос-Анджелесе, Лос-Анджелес, Калифорния, США.
Abstract : Трансуретральная радиочастотная денатурация коллагена для лечения женщин с недержанием мочи
Советы по протоколу коллагена | Abcam
Рис. 1. Фиксированные формалином залитые парафином срезы ткани толстой кишки человека, окрашивающие коллаген I с помощью ab138492 (вверху слева).Иммунофлуоресцентный анализ суставных хондроцитов человека, окрашивание коллагена II с помощью ab34712 (вверху справа). Окрашивание Ab21286 коллагена I (красный) в опухолевых клетках толстой кишки мыши с помощью ICC (внизу слева). Иммуногистохимический анализ залитой парафином ткани печени человека с меткой коллагена VI с помощью ab182744 (внизу справа).
Процесс экстракции коллагенаОбычно используются три основных типа экстракции коллагена:
- Экстракция осаждением соли — используется для солевого растворимого коллагена
Экстракция в нейтральных солевых растворах путем постепенного добавления хлорида натрия.
например 0,45 М NaCl при pH 7,5 в течение 24 часов при перемешивании - Кислотная экстракция — используется для кислотно-растворимого коллагена
Экстракция в органической кислоте, такой как уксусная кислота
например, 0,5 М уксусная кислота при pH 2,5 в течение 24 часов - Экстракция ферментов — используется для коллагена, растворимого в пепсине
Экстракция в органической кислоте с добавлением пепсина.
например 0,1% (мас. / Об.) Пепсина в 0,5 М уксусной кислоте при pH 2,5 в течение 48 часов
Рисунок 2. Сравнительные данные экстрагированных фракций растворимого коллагена. По материалам Mocan, E., Tagadiuc, O., Nacu, V. (2011). 2
Экстракция путем осаждения солей дает низкие уровни коллагена (рис. 2). Следовательно, для выделения коллагена обычно предпочтительнее кислотная или ферментная обработка, причем пепсин является наиболее эффективным методом, поскольку он может удалить неспиральные концы коллагена и повысить растворимость коллагена. Однако экстрагированный коллаген может частично перевариваться, поскольку пепсин может расщеплять концевые неспиральные области, которые содержат межмолекулярные поперечные связи.
Раскрутка тройных спиралей чувствительна к температуре. Следовательно, постоянное охлаждение во время экстракции коллагена важно для предотвращения деградации и денатурации.
Если вы используете антитела к коллагену, которые разработаны с использованием неденатурированных 3D-эпитопов (например, ab34710), вы должны быть осторожны, чтобы не денатурировать белок коллагена во время эксперимента.У ваших антител будет сниженная реактивность с денатурированным коллагеном или фиксированными формалином и залитыми парафином тканями. В таблице данных на отдельные антитела будет указано, распознает ли ваше антитело неденатурированный трехмерный коллаген, поэтому обязательно проверьте это в первую очередь. Здесь вы можете найти несколько советов о том, как адаптировать свои протоколы с учетом этого.
Наконечники ELISA для коллагенов
Используйте стандарты коллагена с нативными трехмерными структурами
Из-за высокого сходства последовательностей коллагенов только третичная структура достаточно отличается, чтобы различать разные типы коллагена.Следовательно, коллаген-специфические антитела зависят от наличия нативной структуры для специфического обнаружения, и следует использовать стандарты коллагена с нативными трехмерными структурами.
Рекомендуется сэндвич-ИФА
Для антител к коллагену, которые специфически распознают неденатурированные трехмерные эпитопы, рекомендуется сэндвич-ИФА, поскольку он будет поддерживать нативную структуру коллагена.
Непрямой ИФА не рекомендуется, поскольку нативная структура коллагена нарушается при прямом связывании с планшетом ИФА и, следовательно, специфичность антитела может быть потеряна.
Наконечники для вестерн-блоттинга (WB) для коллагенов
Будьте осторожны с pH, температурой и концентрацией, чтобы избежать полимеризации коллагена.
Коллаген растворим в кислых условиях, поэтому кислый pH имеет решающее значение для стабильности и растворимости коллагена. При базовом pH коллаген полимеризуется и образует гидрогель. Это также произойдет при использовании слишком высоких концентраций коллагенов. Точно так же, поскольку коллагены более нестабильны, чем другие белки, анализы следует проводить при температуре <10 ° C.
Оптимизация условий работы геля
> Добавьте в образцы детергенты, восстанавливающие и хаотропные агенты.
> Используйте 6% акриламидный гель для коллагенов I, II и III.
> Используйте 10% акриламидный гель для коллагенов IV, V и VI. В качестве альтернативы, градиентный гель может быть более подходящим для просмотра полноразмерных и более мелких фрагментов.
Примечание: Мы рекомендуем использовать стандарты нативного белка в качестве положительного и отрицательного контроля.
Рекомендуемое разведение антител: 0.5-1 мкг / мл.
Наконечники вестерн-блоттинга для коллагена IКоллаген I может быть сложной мишенью для работы, поскольку правильный метод выделения коллагена имеет решающее значение для успеха вестерн-блоттинга.
| |
Электрофорез | Используйте 6% акриламидный гель для коллагена I. |
Перенос | Мы рекомендуем добавить буфер SDS для конечной концентрации 0,1% в белки. |
| Чтобы определить успешность переноса путем визуализации белков в мембранах, мы рекомендуем использовать Ponceau S. |
Максимизация сигнала | Кислотная или ферментная обработка пепсином — лучший метод выделения коллагена I. |
| Непрерывное охлаждение во время экстракции коллагена важно для предотвращения деградации и денатурации. |
| Будьте осторожны с pH, температурой и концентрацией, чтобы избежать полимеризации коллагена:
|
Контроли | Положительные: |
Полная информация о работе с коллагеном I:
Скачать на английском языке
Эти советы также доступны на Мандарин.
Советы по иммуногистохимии (ИГХ) для коллагенов — парафин, фиксированный формалином
Определите степень перекрестного сшивания и выберите подходящие условия поиска антигена фибриллы, а затем волокна. Степень перекрестного связывания может варьироваться и будет определять условия получения антигена, необходимые для экспонирования эпитопа. Красный пикросириус (ab150681) специфически связывается со спиральной структурой [gly-X-Y] n на фибриллярном коллагене (тип I – V) и, следовательно, может использоваться для определения степени поперечного сшивания коллагена.
По возможности следует минимизировать суровые условия поиска антигена, чтобы не нарушить третичную структуру коллагена. Мы рекомендуем извлечение антигена с помощью натрийцитратного буфера, pH 6,0, однако также обычно используется ферментативное расщепление.
Всегда следуйте рекомендованному методу извлечения антигена, указанному в таблице данных.
Рекомендуемые разведения антител: 1: 500-1: 2000
Советы по протоколу для антител, распознающих короткие пептидные последовательностиЕсли вы используете антитела к коллагену, разработанные с использованием коротких пептидных последовательностей (e.грамм. ab138492) вам не нужно быть настолько осторожным, чтобы поддерживать трехмерную структуру коллагена. Все наши антитела к коллагену RabMAb ® сделаны с использованием короткого синтетического пептида, последовательность которого специфична для интересующего коллагена. Это позволяет вам использовать обычные протоколы вестерн-блоттинга, ELISA или IHC с без адаптации , чтобы принимать во внимание.
Дополнительные советы и протоколы вы можете найти в нашей книге протоколов, которая включает протоколы для ELISA, IHC / ICC и вестерн-блоттинга.
Как выбрать правильные антитела к коллагену?
Таблица 1. Коллагены позвоночных. По материалам Shoulders, M.D. и Raines R.T. (2009). 1
Ссылки- Shoulders, M.D., Raines R.T. Структура и стабильность коллагена. Годовой обзор биохимии . 78 , 929-958 (2009).
- Мокан, Э., Тагадюк, О., Наку, В. Аспекты процедуры выделения коллагена. Clin. Res. Исследования. 2 , 3–5 (2011).
Влияние гидратации на фазы коллагена и желатина в пергаментных артефактах | Heritage Science
Пергаментные артефакты состоят из коллагена, его разложившегося желатина, различных минералов, липидов, а также чернил и красок для документов. Основными структурными компонентами являются коллаген и желатин, оба гигроскопичны. Изменения относительных пропорций коллагена и желатина (которые могут быть опосредованы неблагоприятными условиями хранения и ускорены действием липидов или чернил) вносят вклад в доминирующий эффект механических свойств пергамента.Также было показано, что высокие количества желатина связаны с физическими свойствами пергамента, которые могут быть нежелательными, такими как морщинистость [1]. Таким образом, понимание взаимосвязи между механическими и термодинамическими свойствами структуры пергамента и содержанием воды имеет решающее значение для установления соответствующих условий температуры (Ta) и относительной влажности (RH) для хранения, демонстрации и консервации пергаментных артефактов. При установлении этих параметров важно учитывать структурную организацию коллагена и желатина, поскольку взаимодействие воды с коллагеном отличается от взаимодействия с желатином (обсуждается позже).
Структура и гидратация пергамента, коллагена и желатина
Работа последних 10 лет с использованием таких методов, как дифракция рентгеновских лучей с микрофокусом, показала, что внутри пергамента компоненты коллагена и желатина находятся в отдельных слоях, где локализуется большая часть желатина. на поверхности [2]. Это открытие было подтверждено использованием инфракрасной спектроскопии с ослабленным полным отражением и преобразованием Фурье (ATR-FTIR), которая регистрировала спектральную характеристику желатина на поверхности образцов пергамента, и когда эти поверхности были соскребены, и повторное измерение выполняло спектральную характеристику коллаген был зарегистрирован [3].Следовательно, пергаментные артефакты можно описать структурно как матрицу коллагеновых волокон, соединенных с желатиновым внешним слоем. Это структурное расслоение происходит как из-за денатурации коллагена, вызванной стадией сильнощелочного известкования (гидроксид кальция) во время производственного процесса, так и из-за воздействия на поверхность других агентов, вызывающих денатурацию после производства, таких как УФ-свет [4]. Помимо описанного распределения коллагена и желатина в пергаменте, существуют также специфические локусы желатина, которые, по-видимому, связаны с наличием дырок в образцах [5], это может быть связано с повышенным уровнем эндогенных липидов в этих областях, которые кажется, коррелирует с деградацией коллагена [6].Другие агенты, такие как чернила на металлической основе, также приводят к локальному разложению коллагена вокруг участков с чернилами по всей глубине пергаментных листов [7].
Структура и иерархическая организация коллагена хорошо задокументированы. Процесс конструирования коллагеновой ткани начинается с трех полипептидных цепей коллагена, каждая из которых содержит более 1050 аминокислот с определенной скрученной последовательностью, чтобы сформировать молекулу коллагена с жесткой веревкой, подобной мотиву тройной спирали. Альтернативное направление скручивания и стерическое локальное расположение аминокислот в цепи заставляют спираль фиксироваться в определенной структуре, где вода имеет существенное отношение к молекуле коллагена.Затем молекулы коллагена агрегируются очень специфическим и направленным образом, где стабильность достигается за счет ионных взаимодействий, гидрофобных областей и ковалентных внутри- и межмолекулярных сшивок с образованием нерастворимых коллагеновых фибрилл. Коллагеновые фибриллы представляют собой тонкие структуры (шириной ~ 120 нм в коже и длиной не менее нескольких микрон), каждая фибрилла состоит из нескольких тысяч молекул коллагена в поперечном сечении и простирается на несколько молекул коллагена в длину. Фибриллы менее специфично организованы в пучки, чтобы сформировать коллагеновое волокно, и, наконец, коллагеновые волокна образуют коллагеновую ткань [8].
Стабильность тройной спирали коллагена частично обусловлена взаимосвязью коллагена с водой на определенных уровнях иерархической организации в ткани. Молекулы воды можно классифицировать как связанные с коллагеном в ткани в четырех различных фазах: структурная вода (фаза I), прочно связанная в тройной спирали коллагена; либо через двойную, либо через тройную водородную связь. Связанная вода (фаза II), где молекулы воды образуют мостики между соседними полипептидными цепями и действуют как рецепторы для водородных связей CH-O [9].Свободная вода (фаза III), где вода фиксируется одной водородной связью между полипептидными цепями или фиксируется в зонах дырок на конце полипептидной цепи, и, наконец, переходная вода или невозмущенная объемная вода (фаза IV), где молекулы воды связаны между собой. фибриллы [10, 11]. Общее количество структурной и связанной воды (фазы I и II), содержащейся в коллагене, составляет примерно 0,5 г / г [12–14]. Оставшееся количество свободной и основной воды (фазы III и IV), содержащейся в коллагеновой ткани, зависит от относительной влажности.
В самом чистом смысле желатин можно определить как полипептидную цепь со случайной конфигурацией клубков. Такая структура может быть получена в результате денатурации и развертывания тройных спиралей коллагена, эта форма имеет большее сродство к воде, чем коллаген, и поэтому желатин характеризуется как растворимый белок. В некоторых случаях, в зависимости от механизма денатурации, нативные полипептидные цепи могут фрагментироваться на более мелкие аминокислотные последовательности. Следовательно, чтобы охарактеризовать различные структуры желатина, желатин также можно определить как имеющий молекулярно-массовое распределение 10-300 Дальтон.В процессе денатурации коллагена задействованы два агента. Во-первых, агент, нарушающий мотив тройной спирали коллагена и его связывающие отношения с другими молекулами коллагена, такие как низкий или высокий pH, УФ-облучение или тепло [15]. Во-вторых, присутствие воды необходимо для того, чтобы спираль коллагена могла раскручиваться и перераспределять водородные связи [16]. Предметом обсуждения является вероятность того, что такие агенты, как УФ-облучение или загрязнение, могут вызывать эффекты разрыва связей при низких уровнях гидратации, но не позволяют разворачиваться спирали коллагена.Поэтому возможно, что коллаген остается в предварительно желатинизированном состоянии, которое трудно отличить от нативного коллагена без дальнейшего нарушения системы, пытаясь извлечь коллаген и исследовать его физические свойства или целостность. По сравнению с коллагеном желатин является энтропийно более стабильным состоянием и не имеет каких-либо распознаваемых регулярных структур. Когда тройные спирали коллагена разворачиваются, структурная целостность фибрилл и волокон коллагена утрачивается. Наблюдается, что пучки волокон становятся тоньше и начинают терять сцепление.Между пучками появляются небольшие открытые пространства, которые перемежаются перекрещенными, спутанными тонкими волокнами коллагена [17]. Пучки коллагеновых волокон начнут терять ориентацию и расщепляться, в результате чего волокна образуют гель, а коллагеновая ткань одновременно теряет свою механическую прочность [18].
В структуре желатина водородные связи, опосредованные водой, будут образовываться с любой доступной полярной аминокислотной боковой цепью [19]. Это: заряженные группы боковых цепей аминокислот, такие как лизин, аргинин, глутаминовая и аспарагиновая кислоты, гидроксильные группы боковых цепей серина, треонина и гидроксилизина; и карбонильные группы и группы N-H боковых цепей и полимеров основной цепи, не участвующие во внутримолекулярном связывании [20].В развернутой структуре коллагена больше полярных групп подвергаются воздействию воды, поэтому желатин может связываться со значительно большим количеством молекул воды, чем исходная структура коллагена. Якимец и др. [21] изучили, как вода взаимодействует с желатином, и сообщили, что для желатина типа B с высоким индексом цветения (225) полный монослой воды на структуре был достигнут при содержании воды 14%. При содержании воды 14–22% образуются многослойные слои менее сильно взаимодействующей воды, а при содержании воды выше 22% вода, по-видимому, ведет себя как невозмущенная объемная фаза.
В таблице 1 приведено процентное содержание воды, содержащейся в очищенном коллагене I типа и желатине при различных относительной влажности и Ta. Обычно наблюдается, что в белковых структурах, таких как коллаген, абсорбция воды увеличивается как сигмоидальная функция RH [22], что обычно указывает на явления насыщения и указывает на то, что могут иметь место различные уровни взаимодействия воды и коллагена. Также можно видеть, что количество воды, удерживаемой в коллагене при определенной относительной влажности, ниже при повышении температуры от 25 до 40 ° C, что показывает тесную взаимосвязь между относительной влажностью, Ta и содержанием воды в образце.Для сравнения, желатин содержит меньше воды, чем коллаген, при той же относительной влажности и Ta до 95% относительной влажности (25 ° C), когда желатин содержит на 7,6% больше воды, чем коллаген. Более того, в структуре желатина характерное сигмоидальное изменение воды, наблюдаемое с увеличением относительной влажности, больше не обнаруживается. Количество воды, удерживаемой в желатине, увеличивается с шагом ≈ 2–2,5% для диапазона относительной влажности 10–60%, после чего количество воды увеличивается экспоненциально до растворения желатина. Из данных, представленных в таблице 1, интересно, что коллаген и желатин содержат разный процент воды при одной и той же относительной влажности, потому что это означает, что в композитных коллагеновых и желатиновых материалах, таких как пергамент, процент общего содержания воды в коллагене и желатине фазы будут разные.
Таблица 1 Процентное содержание воды в коллагене и желатине при различной относительной влажностиМы постулируем, что различия в содержании воды между желатиновыми фазами коллагена в пергаменте являются критическим звеном при определении подходящих условий относительной влажности для хранения, обращения и демонстрации пергамента. Специфическое взаимодействие между водой и коллагеном на различных уровнях молекулярной и надмолекулярной структуры означает, что изменения в содержании воды будут вызывать хорошо описанные и характерные структурные изменения на каждом уровне; однако в желатине отсутствие конформационной специфичности означает, что изменения в содержании воды могут быть описаны только относительным уровнем близости и запутанности полипептидных цепей коллагена.Стратиграфия желатин-коллаген внутри пергамента может означать, что разница в содержании воды при любой данной относительной влажности может вызывать различия в сцеплении между этими структурными фазами [24, 25]. Также возможно, что разница в структурной стабильности между фазами коллагена и желатина может влиять на механические свойства пергамента, вызывая напряжение на границах раздела между коллагеном и желатином. Если изменения в воздействии воды являются циклическими, возникающее напряжение может в конечном итоге привести к механической усталости и разрушению, это будет механизм прямой связи, в котором коллаген еще больше повреждается и превращается в желатин.Поскольку коллагеновый, желатиновый и интерфейсные слои будут поглощать разные количества воды при одной и той же относительной влажности, будет различное распределение воды при любой данной относительной влажности, обычно используемой в условиях хранения; изменение относительной влажности вызовет изменение распределения воды и физических свойств различных компонентов [26]. Влияние несоответствия содержания воды в коллагене и желатине на стабильность пергамента неясно, и его необходимо устранить. Электронно-микроскопические изображения поверхностей пергамента показывают отслоение стеклянного поверхностного слоя пергамента, который частично отделился от нижележащей сердцевины пергамента.Эти трещины, возможно, представляют различное поведение слоев и границ пергаментного документа [27].
В предыдущем разделе, описывающем пергамент и его структурные компоненты, коллаген и желатин, было показано, что структурное поведение пергаментных артефактов при изменении содержания воды будет варьироваться в зависимости от относительных пропорций коллагена и желатина в пергаментном объекте. Это имеет значение для установления экологических стандартов для сохранения пергаментных артефактов, потому что это означает, что не все пергаментные артефакты будут реагировать одинаковым образом при одинаковой относительной влажности.Алиев [28] показал, что содержание воды в пергаментах 20-го века (новый) и 17-19 век (историческое) различается примерно на 3% и что часть воды удерживается в пергаменте липидным компонентом. Содержание воды в пергаментах 20-го века (новый), книжных (исторических) 17-го века (исторический) и 14-го века (средневековый) при разной относительной влажности сообщается в [29], они приведены в таблице 2. По сравнению с новым пергаментом, наблюдение состоял в том, что исторические образцы пергамента поглощали меньше воды в исследованном диапазоне относительной влажности, а средневековые образцы пергамента поглощали больше воды.Однако ни в одном из этих исследований остается неясным, сколько воды удерживалось в каждой из коллагеновой или желатиновой фаз пергамента, это было связано с ограничениями используемого аналитического метода.
Таблица 2 Процентное содержание воды в пергаменте при различной относительной влажностиКритическая оценка исследований по изучению изменений пергаментных артефактов с изменением RH
В идеале диапазон RH для хранения пергамента, демонстрации и обращения должен минимизировать а) преобразование нарушенного / предварительно желатинизированного коллагена в желатин, б) уменьшить потеря воды из пергамента, что увеличит его хрупкость, в) уменьшит рост плесени и г) будет экономически выгодным.Следовательно, ключом к определению наиболее подходящей относительной влажности для хранения, демонстрации и обращения с пергаментом является понимание диапазона относительной влажности, в которой пергамент может подвергаться воздействию, до того, как между соседними фибриллами коллагена останется достаточно места для их развертывания, и определить взаимосвязь между структурными изменениями. и содержание воды. Поскольку пергаменты являются композитными материалами, понимание того, как содержание воды влияет на термодинамическую стабильность и механические свойства, является сложной задачей. В настоящее время рекомендуемые стандарты хранения пергамента основаны на рекомендациях для водопоглощающих материалов (гигроскопичных).Для европейского климата рекомендуемая относительная влажность составляет 55% [30], средняя точка между верхним пределом в 70%, когда среда благоприятна для прорастания плесени [31], и 40% точкой, при которой гигроскопичные материалы (в целом) могут стать хрупкими. .
В таблице 3 приведены рекомендуемые условия относительной влажности для хранения пергамента по результатам нескольких исследований. В исследовании Weiner et al. [32] были измерены относительные пропорции коллагена и желатина в образцах свитков Мертвого моря (DSS), и было рекомендовано, чтобы верхний предел относительной влажности для хранения пергамента не превышал 65%.Это значение основано на их рассуждениях о том, что количество воды, необходимое для денатурирования оставшегося коллагенового компонента свитков: «Должны быть установлены оптимальные условия хранения, которые минимизируют скорость превращения (коллагена в желатин)». Наши рассуждения совпадают с рассуждениями Вайнера; однако исследование Вайнера не предоставляет читателю доказательств того, что верхний предел хранения составляет 65% относительной влажности. Цифра 65% RH основана на поглощении воды коллагеном из сухожилия хвоста крысы (RTT) и цитируется из работы Gustavson [33].Здесь Густавсон показал, что потребление воды для сухого коллагена сухожилия хвоста крысы линейно до относительной влажности 65%, после чего количество воды, поглощаемой коллагеном, увеличивается экспоненциально с увеличением давления водяного пара. Во-первых, работа Густавсона не дает никаких доказательств того, что относительная влажность выше 65% увеличивает преобразование коллагена в желатин; поскольку гидратирующий коллаген не вызывает денатурации, если целостность коллагена каким-либо образом не нарушена. Хотя может быть уместно смоделировать изменения гидратации коллагена в пергаменте с изменениями в сухожилиях; учитывая, что оба они состоят преимущественно из фибрилл коллагена I типа, это не оптимально для целого пергаментного артефакта.Это связано с тем, что экстрагированное сухожилие, по сравнению с пергаментом, содержит не менее 95% коллагена (вес / вес) с минимальным содержанием желатина и некоторыми неколлагеновыми компонентами, такими как протеогликаны и эластичные белки.
Таблица 3 Краткое изложение диапазона относительной влажности, рекомендованного в литературеИсследование DSS, проведенное Schilling et al. [34] измерил изменение объема пергамента в результате поглощения и десорбции воды (коэффициент гигроскопического расширения) при различной относительной влажности.Это исследование показало, что скорость поглощения воды была самой низкой, а изменение объема — самым низким в деградированных новых (контрольных) образцах пергамента. Они также обнаружили, что скорость абсорбции и изменение объема в образцах DSS были того же порядка величины, что и используемые образцы желатина. В частности, данные показали, что при относительной влажности 38–46% коэффициент гигроскопического расширения был самым низким почти для всех образцов, включая контрольные образцы нового пергамента и нового желатина (полученные от Kremer Pigmente, биологический источник неизвестен).Это указывает на то, что в этом диапазоне относительной влажности изменение объема пергамента было наименьшим, что свидетельствует о достижении равновесия. Исследование также показало, используя динамический механический анализ (DMA), что внутренние напряжения (сопротивление материала внешним силам) на новом пергаменте были значительно больше, когда образцы подвергались воздействию условий ниже 30% относительной влажности. Это указывает на то, что относительная влажность 30% является критической точкой, когда пергамент теряет достаточно воды, чтобы вызвать изменение механических свойств пергамента.
Исследование Dernovšková , et al., [35] исследовали количество воды, поглощаемой пергаментами при различной относительной влажности, и обнаружили, что пергаменты XVI века (исторические) обычно поглощают больше воды, чем новые пергаменты, и что максимальное водопоглощение было достигнуто при относительной влажности 45,5% и относительной влажности 28,1%. соответственно. Хотя в исследовании не было представлено никаких доказательств, можно предположить, что разница в количестве поглощенной воды и относительной влажности при достижении максимального водопоглощения была результатом разницы в пропорциях коллагена и желатина между образцами.Часто обнаруживается, что в более старых пергаментах содержится больше желатина, потому что они обычно гораздо дольше подвергались вредным условиям окружающей среды, таким как УФ-свет.
Эти исследования успешно показывают, что существуют изменения физических свойств пергаментных артефактов при разной относительной влажности, и это может быть вызвано соотношением коллагена и желатина, присутствующих в пергаменте. К сожалению, ни в исследовании Шиллингса, ни в исследовании Дерновшковой не использовался достаточно большой набор образцов, чтобы предоставить достаточно данных для широкого спектра пергаментных артефактов.Шиллинг использовал только образцы DSS, которые подтверждают результаты для очень специфического набора образцов, а исследование Дерновшковой сравнивало только козий пергамент 1550 года нашей эры. Следовательно, эти наборы образцов должны быть дополнены дальнейшими исследованиями, чтобы обобщить случай и быть репрезентативными для ряда пергаментных артефактов с точки зрения производственных процедур, используемых шкур животных или типа условий хранения после изготовления. Кроме того, необходимо разработать методы оценки количества коллагена и желатина в каждом образце и соотнести это с физическими изменениями, наблюдаемыми при различных значениях относительной влажности, хотя свойства структурных компонентов пергамента (желатина и коллагена) были охарактеризованы в Отчасти из-за реакции на RH необходимо учитывать пространственные отношения коллагена и желатина на различных масштабах длины в пределах каждого пергамента.
Исследование Bowden , et al. [36] далее продемонстрировал, что существует разница между новыми и историческими пергаментами, измеряя тепловую реакцию (изменение температуры в результате экзотермических или эндотермических реакций, вызванных изменениями гигрометрии, то есть увеличением или потерей несвязанной воды) пергаментов во время изменений относительной влажности. Исследование показало, что площадь теплового пика, которая представляет изменение температуры пергамента при воздействии различной относительной влажности, связана с массой образца.Основной вывод свидетельствует о том, что изменение гигрометрии (то есть водообмен) в желатине и исторических образцах пергамента (15-18 века) происходит намного медленнее, чем в новых образцах пергамента, что указывает на то, что поведение артефактов пергамента при различной относительной влажности связано с пропорции коллагена и желатина, которые они содержат. Результаты этого исследования показывают, что метод тепловой реакции подходит для демонстрации реакции пергамента на изменение относительной влажности; однако в нем не содержится каких-либо конкретных указаний по настройке параметров окружающей среды для пергамента.
Hansen et al. [37] — ключевое исследование, которое рекомендует условия относительной влажности, основанные на механических изменениях пергамента, которые происходят в зависимости от относительной влажности. Хансен измерил нагрузку для разрушения, энергию для разрушения и процентное значение деформации для разрушения с целью количественного определения силы, необходимой для возникновения механического разрушения, и показал, как это изменяется в зависимости от количества воды, удерживаемой в пергаменте. Хансен также измерил начальный модуль и сдерживаемую силу с целью количественной оценки сопротивления пергамента структурным изменениям в отношении относительной влажности и, следовательно, изменения содержания воды.
Первоначальные эксперименты по модулю упругости, проведенные Хансеном, являются мерой эластичности пергамента и являются прямым измерением того, как увеличение или уменьшение опосредованных водой связей способствует изменению хрупкости образцов. Это дает понимание того, какая относительная влажность может изменять физические свойства пергамента и его способность противостоять структурным деформациям. Из-за высокого коэффициента вариации при измерении растяжения (до 32–34% в некоторых случаях), исследование не показало существенной разницы в начальном модуле упругости пергаментов при любой относительной влажности, за исключением 11% для нового пергамента.Хансен сравнил результаты с исследованием, проведенным на коже [38], и пришел к такому же общему выводу, что используемые методы были недостаточно чувствительны, чтобы различать тонкие различия между образцами. Более точное измерение механических изменений, вызванных изменением содержания воды, может быть выполнено путем измерения напряжения сдвига. Напряжение сдвига измеряется как составляющая напряжения, которая копланарна поперечному сечению материала, и используется для описания напряженного состояния, в котором форма материала будет изменяться без какого-либо конкретного изменения объема.Измерение напряжения сдвига позволит получить более четкое представление о величине напряжения, оказываемого на пергамент при изменении содержания воды при различной относительной влажности.
Исследование Хансена рекомендует поддерживать относительную влажность при хранении в пределах 30-40% и основывает эту рекомендацию на обнаружении значительного изменения механических свойств пергамента, когда относительная влажность ниже 25%. Хансен рекомендует 30% относительной влажности в качестве нижнего предела для учета колебаний +/- 5%. Верхний предел 40% был рекомендован для предотвращения роста микробов и основан на работе Valetin et al. [39]. Валентин сообщил, что «проанализированные микроорганизмы продемонстрировали значительное замедление своей биологической активности в диапазоне уровней кислорода 0,1–1,1% и относительной влажности ниже 43%». Было обнаружено, что скорость роста микробов при относительной влажности 43% составляет примерно две трети от среды с относительной влажностью 75% и половину от скорости роста при относительной влажности 100%. Кроме того, исследование показало, что, несмотря на это снижение роста, в течение 3 недель биологическая активность, указывающая на присутствие микробов, была почти одинаковой во всех средах O 2 .Поэтому верхний предел, рекомендуемый Хансеном, не сильно поддерживается работой Валентина, и его следует тщательно продумывать.
Исследование Хансена могло показать, как RH влияет на эластичность пергамента. Однако, поскольку в отобранных образцах не учитывались большие механические отклонения, которые могут иметь место в ориентации коллагеновых волокон в различных частях шкуры животного и случайным образом взяты образцы из пергаментных артефактов, разброс данных был слишком большим, чтобы поддержать сильные выводы.Хотя случайный отбор образцов полезен для выявления различий в пергаменте, это означает, что измерения растяжения сложнее сравнивать. Двигаясь вперед, можно сказать, что более полезный метод отбора проб мог бы взять все образцы из одного и того же участка одного и того же пергамента; это уменьшило бы количество вариаций между образцами и улучшило бы повторяемость результатов.
Денатурация коллагена, показывающая положительные долгосрочные результаты недержания мочи
, 12 мая 2008 г. (Новый Орлеан) — Долгосрочное наблюдение показывает, что трансуретральная радиочастотная денатурация коллагена ( Renessa , Novasys Medical Inc) снижает стрессовое недержание мочи у женщин, вызванное повышенной подвижностью выходного отверстия мочевого пузыря, со значительным снижением еженедельных утечек стресса. у большинства пролеченных пациентов.
Трехлетние результаты трансуретральной радиочастотной денатурации коллагена были представлены здесь, на 56-м ежегодном клиническом совещании Американского колледжа акушеров и гинекологов, главным исследователем Дениз М. Эльзер, доктором медицины, из Illinois Urogynecology LTD, Oak Lawn.
В исследовании приняли участие 136 женщин с недержанием мочи при напряжении в течение не менее 12 месяцев, у которых не было консервативного лечения. Исходно было 2,9 эпизода утечки стресса в день и 20 эпизодов.3 серии в неделю. Средний балл по шкале качества жизни при недержании (I-QOL) составил 51,3 балла, а средний балл по шкале урогенитального дистресс-теста 6 (UDI-6) составил 52,7 балла.
Женщинам во время визита в клинику была проведена процедура, при которой в выходное отверстие мочевого пузыря вводился радиочастотный катетер, вызывающий микроскопическую денатурацию коллагена в нескольких отдельных областях в пределах шейки мочевого пузыря и проксимальной части подслизистой оболочки уретры.
«Прохождение процедуры во время визита в офис было очень важно для наших пациентов», — сказал д-р.Эльзер рассказала Medscape акушерство / гинекология и женское здоровье . «Он предлагает им уединение и конфиденциальность … Вся процедура может быть выполнена примерно за 30 минут … и у нас не было никаких побочных реакций».
Доктор Эльзер сказал, что новый коллаген, который образуется после процедуры, намного жестче, чем денатурированный коллаген, который он заменяет. «Именно эта жесткость снижает утечки напряжения. Для полного заживления требуется от 2 до 3 месяцев, а прочность сохраняется в течение 3 лет наблюдения…. Мы не наблюдаем снижения [эффективности] с течением времени ».
Данные были доступны через 12 месяцев после процедуры у 73 женщин. Анализ намерения лечить «показал, что не было никаких характерных различий между пациентами, которые были потеряны для последующего наблюдения, и теми, кто оценивался через 12 месяцев», — прокомментировал доктор Эльзер.
Через 12 месяцев у 45% женщин больше не было эпизодов недержания мочи. В целом, 69% пациентов сообщили об уменьшении объема утечки на 50% или более при испытании с нагрузкой на прокладки.Среднее снижение составило 15,2 г ( P <0,0001).
Среднее изменение показателя I-QOL составило 19,6 балла ( P = 0,0001), а среднее улучшение показателя UDI-6 составило 21,1 балла ( P = 0,0001).
«К 40 годам по крайней мере четверть женщин страдают недержанием при стрессе, но их число может быть намного больше», поскольку пациенты неохотно сообщают о симптомах, — отметила она.
«Мы еще не знаем, можно ли повторить эту процедуру», если выходное отверстие мочевого пузыря начнет ослабевать », но мы не наблюдали этого за 3 года наблюдения», — сказал доктор.- сказал Эльзер.
«Это ни в коем случае не идеальное решение, но это хорошая альтернатива хирургическому вмешательству», — говорит Майкл П. Вудс, доктор медицинских наук, доцент клинической медицины Университета Небраски, который также имеет частную практику в Белвью, штат Небраска. , прокомментировал Medscape акушерство / гинекология и женское здоровье .
«Это хорошо для пациента, который не хочет ложиться в больницу, который не хочет подвергаться серьезной операции или у которого не может быть простоев», — сказал он.
«В моей практике у нас есть женщины, проходящие реабилитацию тазового дна, и если это не поможет, я проведу процедуру слинга … Я не выполняю никаких других [хирургических вмешательств] на данном этапе», — доктор Вудс. прокомментировал. «[Трансуретральная радиочастотная денатурация коллагена] кажется очень безопасной и достаточно эффективной, не вызывая рубцевания мочевого пузыря».
Исследование доктора Эльзера было частично поддержано грантом Novasys Medical Inc. Д-р Вудс — консультант отдела женского здоровья и урологии Johnson & Johnson.
56-е ежегодное клиническое собрание Американского колледжа акушеров и гинекологов: плакат 116. Представлен 5 мая 2008 г.
.
Добавить комментарий